Övervakning av lupus nefrit genom extracellulära urinblåsor

Inledning: Lupus nefrit (LN) är en allvarlig manifestation av systemisk lupus erythematosus (SLE) som kan leda till irreversibel njurskada om den inte upptäcks och hanteras omgående. LN klassificeras baserat på dess histopatologiska egenskaper. Klassificeringen hjälper till att bestämma svårighetsgraden och lämpliga behandlingsstrategier för tillståndet och att utesluta andra tillstånd som kan efterlikna den kliniska bilden av LN. Det vanligaste klassificeringssystemet är klassificeringen International Society of Nephrology/Renal Pathology Society (ISN/RPS), som delar in lupusnefrit i sex klasser: I) Minimal Change, II) Mesangial Proliferative LN, III) Focal Proliferative LN, IV) Diffus proliferativ LN, V) Membranös LN, VI) Avancerad skleroserande LN2. Klassificeringen kräver invasiva njurbiopsier, som knappast är tillgängliga och förknippas med potentiella komplikationer och patientbesvär. Dessutom representerar njurbiopsierna bara en liten del av njuren. Ny forskning har föreslagit urinära extracellulära vesiklar (uEV) som potentiella icke-invasiva biomarkörer för njursjukdomar, inklusive LN4. uEVS är små extracellulära vesiklar i nanostorlek av endosomalt ursprung, som utsöndras i urinen genom fusion av multivesikulära kroppar med plasmamembranet. Således kan de representera en lovande flytande biopsi som återspeglar mönstret och/eller svårighetsgraden av njurhistologisk skada.

Hypotes: Det primära syftet med denna prospektiva studie är att undersöka användbarheten av urinexosomer som en icke-invasiv biomarkör för att övervaka aktiviteten och progressionen av lupusnefrit hos SLE-patienter.

Metoder: SLE-patienter som uppfyller EULAR/ACR-klassificeringskriterierna 2019, hänvisade till njurbiopsi, kommer att rekryteras från Reumatologiska avdelningen och Nefrologiska avdelningen vid Odense Universitetssjukhus. Detaljerade demografiska och kliniska data inklusive ålder, kön, etnicitet, medicin, varaktighet av SLE-aktivitet, SLE-skador och laboratorieresultat kommer att samlas in från varje patient. Aktiviteten av SLE vid tidpunkten för biopsi kommer att utvärderas med hjälp av SLE sjukdomsaktivitetsindex 2000 (SLEDAI-2K). SLE-skador kommer att utvärderas i enlighet med SLICC-skadaindex. Spot-urinprover kommer att samlas in, tillsättas proteashämmare och frysas vid -80 grader. UEV kommer att isoleras med polyetylenglykol (PEG) utfällning, koncentrationen av uEV kommer att bestämmas och protein kommer att nås med hjälp av western blotting och/eller PCR. Glomerulära specifika uEVs kommer att isoleras och tidigare utvecklade tester kommer att tillämpas för att detektera membranattackkomplexet (MAC)/C5b-9-komplexet5. uEV från plasma/serum kommer att isoleras för att testa för korrelation med uEV. Njurbiopsier kommer histologiskt analyseras vid avdelningen för patologi av erfarna nefropatologer enligt befintliga kliniska riktlinjer. Skillnader i uEV-last mellan SLE-patienter med och utan lupusnefrit kommer att analyseras med hjälp av lämpliga statistiska tester. Korrelationer mellan exosomala biomarkörer, histologiska skillnader på njurbiopsi och sjukdomsaktivitet kommer att utvärderas med Pearsons korrelationsanalys.

Perspektiv: Denna prospektiva studie syftar till att etablera urinexosomer som potentiella icke-invasiva biomarkörer för övervakning av lupusnefrit hos SLE-patienter. Resultaten från denna forskning kan leda till utvecklingen av mer effektiva och patientvänliga metoder för LN-hantering, vilket möjliggör snabba ingrepp och förbättrade njurresultat hos SLE-patienter.