Мониторинг волчаночного нефрита через внеклеточные пузырьки мочи

Введение. Волчаночный нефрит (ВН) является тяжелым проявлением системной красной волчанки (СКВ), которое может привести к необратимому повреждению почек, если его не обнаружить и не начать своевременное лечение. ЛН классифицируется на основе гистопатологических особенностей. Классификация помогает определить тяжесть и соответствующую стратегию лечения этого состояния, а также исключить другие состояния, которые могут имитировать клиническую картину ВН. Наиболее часто используемой системой классификации является классификация Международного общества нефрологов/общества патологии почек (ISN/RPS), которая делит волчаночный нефрит на шесть классов: I) минимальные изменения, II) мезангиальный пролиферативный ВН, III) фокальный пролиферативный ВН, IV) Диффузно-пролиферативный ЛУ, V) Мембранозный ЛУ, VI) Расширенный склерозирующий ЛУ2. Классификация требует инвазивной биопсии почки, которая труднодоступна и связана с потенциальными осложнениями и дискомфортом для пациента. Более того, биопсия почки представляет собой лишь небольшую часть почки. Недавние исследования показали, что внеклеточные везикулы мочи (uEV) являются потенциальными неинвазивными биомаркерами заболеваний почек, включая LN4. нЭВС представляют собой небольшие наноразмерные внеклеточные везикулы эндосомального происхождения, которые секретируются в мочу путем слияния мультивезикулярных телец с плазматической мембраной. Таким образом, они могут представлять собой многообещающую жидкую биопсию, отражающую характер и/или тяжесть гистологического повреждения почек.

Гипотеза: Основная цель этого проспективного исследования — изучить полезность экзосом мочи в качестве неинвазивного биомаркера для мониторинга активности и прогрессирования волчаночного нефрита у пациентов с СКВ.

Методы: Пациенты с СКВ, соответствующие классификационным критериям EULAR/ACR 2019 года, направленные на биопсию почки, будут набраны из отделения ревматологии и отделения нефрологии университетской больницы Оденсе. От каждого пациента будут собраны подробные демографические и клинические данные, включая возраст, пол, этническую принадлежность, медикаментозное лечение, продолжительность активности СКВ, поражение СКВ и результаты лабораторных исследований. Активность СКВ во время биопсии будет оцениваться с использованием индекса активности заболевания СКВ 2000 (SLEDAI-2K). Ущерб SLE будет оцениваться в соответствии с индексом ущерба SLICC. Будут собраны пробы мочи, добавлены ингибиторы протеазы и заморожены при -80 градусах. UEV будут выделены с использованием осаждения полиэтиленгликолем (ПЭГ), концентрация uEV будет определена, а доступ к белку будет получен с помощью вестерн-блоттинга и/или ПЦР. Будут выделены гломерулярно-специфичные мкЭ и применены ранее разработанные тесты для обнаружения мембраноатакующего комплекса (MAC)/комплекса C5b-95. нЭВ из плазмы/сыворотки будут выделены для проверки корреляции с нЭВ. Биопсия почки будет подвергнута гистологическому анализу в отделении патологии опытными нефропатологами в соответствии с существующими клиническими рекомендациями. Различия в нагрузке мЭВ между пациентами с СКВ с волчаночным нефритом и без него будут проанализированы с использованием соответствующих статистических тестов. Корреляции между экзосомальными биомаркерами, гистологическими различиями в биопсии почки и активностью заболевания будут оцениваться с использованием корреляционного анализа Пирсона.

Перспективы: Целью данного проспективного исследования является установление экзосом мочи в качестве потенциальных неинвазивных биомаркеров для мониторинга волчаночного нефрита у пациентов с СКВ. Результаты этого исследования могут привести к разработке более эффективных и удобных для пациентов подходов к лечению ВН, что позволит проводить своевременные вмешательства и улучшить почечные исходы у пациентов с СКВ.