Monitoreo de la nefritis lúpica a través de vesículas extracelulares urinarias

Introducción: La nefritis lúpica (NL) es una manifestación grave del lupus eritematoso sistémico (LES) que puede provocar daño renal irreversible si no se detecta y trata oportunamente. La LN se clasifica según sus características histopatológicas. La clasificación ayuda a determinar la gravedad y las estrategias de tratamiento adecuadas para la afección y a descartar otras afecciones que puedan imitar el cuadro clínico de NL. El sistema de clasificación más comúnmente utilizado es la clasificación de la Sociedad Internacional de Nefrología/Sociedad de Patología Renal (ISN/RPS), que divide la nefritis lúpica en seis clases: I) Cambio Mínimo, II) NL Proliferativa Mesangial, III) NL Proliferativa Focal, IV) LN proliferativa difusa, V) LN membranosa, VI) LN2 esclerosante avanzada. La clasificación requiere biopsias renales invasivas, que son de difícil acceso y están asociadas con posibles complicaciones y malestar del paciente. Además, las biopsias de riñón sólo representan una pequeña parte del riñón. Investigaciones recientes han sugerido que las vesículas extracelulares urinarias (uEV) son posibles biomarcadores no invasivos de enfermedades renales, incluida la LN4. Los uEVS son pequeñas vesículas extracelulares de tamaño nanométrico de origen endosómico, que se secretan en la orina mediante la fusión de cuerpos multivesiculares con la membrana plasmática. Por lo tanto, podrían representar una biopsia líquida prometedora que refleje el patrón y/o la gravedad de la lesión histológica renal.

Hipótesis: El objetivo principal de este estudio prospectivo es investigar la utilidad de los exosomas urinarios como biomarcador no invasivo para monitorear la actividad y progresión de la nefritis lúpica en pacientes con LES.

Métodos: Los pacientes con LES que cumplan con los criterios de clasificación EULAR/ACR de 2019, referidos a biopsia de riñón, serán reclutados del Departamento de Reumatología y del Departamento de Nefrología del Hospital Universitario de Odense. Se recopilarán de cada paciente datos demográficos y clínicos detallados que incluyen edad, sexo, origen étnico, medicamento, duración de la actividad del LES, daño del LES y resultados de laboratorio. La actividad del LES en el momento de la biopsia se evaluará utilizando el índice de actividad de la enfermedad del LES 2000 (SLEDAI-2K). Los daños del SLE se evaluarán de acuerdo con el índice de daños SLICC. Se recolectarán muestras de orina puntuales, se les agregarán inhibidores de proteasa y se congelarán a -80 grados. Los UEV se aislarán mediante precipitación con polietilenglicol (PEG), se determinará la concentración de uEV y se accederá a la proteína mediante transferencia Western y/o PCR. Se aislarán uEV glomerulares específicos y se aplicarán pruebas previamente desarrolladas para detectar el complejo de ataque de membrana (MAC)/complejo C5b-95. Se aislarán los uEV del plasma/suero para probar la correlación con los uEV. Las biopsias de riñón serán analizadas histológicamente en el departamento de Patología por nefropatólogos experimentados de acuerdo con las directrices clínicas existentes. Se analizarán las diferencias en la carga de uEV entre pacientes con LES con y sin nefritis lúpica mediante pruebas estadísticas apropiadas. Las correlaciones entre biomarcadores exosomales, diferencias histológicas en la biopsia de riñón y la actividad de la enfermedad se evaluarán mediante el análisis de correlación de Pearson.

Perspectiva: Este estudio prospectivo tiene como objetivo establecer los exosomas urinarios como posibles biomarcadores no invasivos para el seguimiento de la nefritis lúpica en pacientes con LES. Los hallazgos de esta investigación pueden conducir al desarrollo de enfoques más eficientes y amigables para el paciente para el manejo de la NL, permitiendo intervenciones oportunas y mejores resultados renales en pacientes con LES.