Monitoring van lupus-nefritis via extracellulaire blaasjes in de urine

Inleiding: Lupus nefritis (LN) is een ernstige manifestatie van systemische lupus erythematosus (SLE) die kan leiden tot onomkeerbare nierschade als deze niet onmiddellijk wordt ontdekt en behandeld. LN wordt geclassificeerd op basis van zijn histopathologische kenmerken. De classificatie helpt bij het bepalen van de ernst en geschikte behandelstrategieën voor de aandoening en bij het uitsluiten van andere aandoeningen die het klinische beeld van LN kunnen nabootsen. Het meest gebruikte classificatiesysteem is de classificatie van de International Society of Nephrology/Renal Pathology Society (ISN/RPS), die lupus nefritis in zes klassen verdeelt: I) Minimale verandering, II) Mesangiale proliferatieve LN, III) Focale proliferatieve LN, IV) Diffus proliferatieve LN, V) Membraneuze LN, VI) Geavanceerde scleroserende LN2. De classificatie vereist invasieve nierbiopten, die nauwelijks toegankelijk zijn en gepaard gaan met mogelijke complicaties en ongemak voor de patiënt. Bovendien vertegenwoordigen de nierbiopten slechts een klein deel van de nier. Recent onderzoek heeft gesuggereerd dat extracellulaire blaasjes (uEV's) in de urine potentiële niet-invasieve biomarkers zijn voor nierziekten, waaronder LN4. uEVS zijn kleine extracellulaire blaasjes van nanogrootte van endosomale oorsprong, die in de urine worden uitgescheiden door fusie van multivesiculaire lichaampjes met het plasmamembraan. Ze zouden dus een veelbelovende vloeibare biopsie kunnen vertegenwoordigen die het patroon en/of de ernst van histologisch nierletsel weerspiegelt.

Hypothese: Het primaire doel van deze prospectieve studie is het onderzoeken van de bruikbaarheid van urinaire exosomen als een niet-invasieve biomarker voor het monitoren van de activiteit en progressie van lupus nefritis bij SLE-patiënten.

Methoden: SLE-patiënten die voldoen aan de EULAR/ACR-classificatiecriteria van 2019, verwezen naar nierbiopsie, zullen worden gerekruteerd bij de afdeling Reumatologie en de afdeling Nefrologie van het Odense Universitair Ziekenhuis. Van elke patiënt worden gedetailleerde demografische en klinische gegevens verzameld, waaronder leeftijd, geslacht, etniciteit, geneeskunde, duur van de SLE-activiteit, SLE-schade en laboratoriumresultaten. De activiteit van SLE op het moment van de biopsie zal worden geëvalueerd met behulp van de SLE-ziekteactiviteitsindex 2000 (SLEDAI-2K). SLE-schade wordt beoordeeld volgens de SLICC-schade-index. Er worden spot-urinemonsters verzameld, proteaseremmers toegevoegd en ingevroren bij -80 graden. UEV's zullen worden geïsoleerd met behulp van polyethyleenglycol (PEG) precipitatie, de concentratie van uEV zal worden bepaald en eiwit zal worden ontsloten met behulp van Western blotting en/of PCR. Glomerulaire specifieke uEVs zullen worden geïsoleerd en eerder ontwikkelde tests zullen worden toegepast om het membraanaanvalcomplex (MAC)/C5b-9-complex5 te detecteren. uEV's uit plasma/serum zullen worden geïsoleerd om te testen op correlatie met uEV's. Nierbiopten zullen op de afdeling Pathologie histologisch worden geanalyseerd door ervaren nefropathologen volgens bestaande klinische richtlijnen. Verschillen in uEV-lading tussen SLE-patiënten met en zonder lupus nefritis zullen worden geanalyseerd met behulp van geschikte statistische tests. Correlaties tussen exosomale biomarkers, histologische verschillen op de nierbiopsie en ziekteactiviteit zullen worden geëvalueerd met behulp van Pearsons correlatieanalyse.

Perspectief: Deze prospectieve studie heeft tot doel urine-exosomen vast te stellen als potentiële niet-invasieve biomarkers voor het monitoren van lupus-nefritis bij SLE-patiënten. De bevindingen uit dit onderzoek kunnen leiden tot de ontwikkeling van efficiëntere en patiëntvriendelijkere benaderingen voor LN-management, waardoor tijdige interventies en verbeterde nierresultaten bij SLE-patiënten mogelijk worden.