Monitoraggio della nefrite da lupus attraverso le vescicole extracellulari urinarie

Introduzione: La nefrite da lupus (LN) è una grave manifestazione del lupus eritematoso sistemico (LES) che può portare a danni renali irreversibili se non rilevata e gestita tempestivamente. LN è classificato in base alle sue caratteristiche istopatologiche. La classificazione aiuta a determinare la gravità e le strategie di trattamento appropriate per la condizione e ad escludere altre condizioni che potrebbero simulare il quadro clinico della LN. Il sistema di classificazione più comunemente utilizzato è la classificazione della International Society of Nephrology/Renal Pathology Society (ISN/RPS), che divide la nefrite da lupus in sei classi: I) Cambiamento minimo, II) LN proliferativo mesangiale, III) LN proliferativo focale, IV) LN proliferativa diffusa, V) LN membranosa, VI) LN2 sclerosante avanzata. La classificazione richiede biopsie renali invasive, difficilmente accessibili e associate a potenziali complicanze e disagio per il paziente. Inoltre le biopsie renali rappresentano solo una piccola parte del rene. Ricerche recenti hanno suggerito le vescicole extracellulari urinarie (uEV) come potenziali biomarcatori non invasivi per le malattie renali, incluso LN4. Le uEVS sono piccole vescicole extracellulari di dimensioni nanometriche di origine endosomiale, che vengono secrete nelle urine attraverso la fusione dei corpi multivescicolari con la membrana plasmatica. Pertanto, potrebbero rappresentare una promettente biopsia liquida che riflette il modello e/o la gravità del danno istologico renale.

Ipotesi: L'obiettivo primario di questo studio prospettico è quello di indagare l'utilità degli esosomi urinari come biomarcatore non invasivo per monitorare l'attività e la progressione della nefrite da lupus nei pazienti affetti da LES.

Metodi: i pazienti affetti da LES, che soddisfano i criteri di classificazione EULAR/ACR 2019, riferiti alla biopsia renale, saranno reclutati dal Dipartimento di Reumatologia e dal Dipartimento di Nefrologia dell'Ospedale Universitario di Odense. Da ciascun paziente verranno raccolti dati demografici e clinici dettagliati tra cui età, sesso, etnia, farmaci, durata dell'attività del LES, danno del LES e risultati di laboratorio. L'attività del LES al momento della biopsia sarà valutata utilizzando l'indice di attività della malattia del LES 2000 (SLEDAI-2K). Il danno da SLE sarà valutato in base all'indice di danno SLICC. Verranno raccolti campioni di urina spot, ai quali verranno aggiunti inibitori della proteasi e congelati a -80 gradi. Gli UEV saranno isolati utilizzando la precipitazione di polietilenglicole (PEG), la concentrazione di uEV sarà determinata e le proteine ​​saranno analizzate utilizzando western blotting e/o PCR. Verranno isolati uEV glomerulari specifici e verranno applicati i test precedentemente sviluppati per rilevare il complesso di attacco di membrana (MAC)/complesso C5b-95. Gli uEV dal plasma/siero saranno isolati per testare la correlazione con gli uEV. Le biopsie renali saranno analizzate istologicamente presso il Dipartimento di Patologia da nefropatologi esperti secondo le linee guida cliniche esistenti. Le differenze nel carico uEV tra pazienti affetti da LES con e senza nefrite lupica saranno analizzate utilizzando appropriati test statistici. Le correlazioni tra biomarcatori esosomiali, differenze istologiche sulla biopsia renale e attività della malattia saranno valutate utilizzando l'analisi di correlazione di Pearsons.

Prospettiva: Questo studio prospettico mira a stabilire gli esosomi urinari come potenziali biomarcatori non invasivi per il monitoraggio della nefrite da lupus nei pazienti affetti da LES. I risultati di questa ricerca potrebbero portare allo sviluppo di approcci più efficienti e a misura di paziente per la gestione dei LN, consentendo interventi tempestivi e migliori esiti renali nei pazienti affetti da LES.