Lupus-nefriitin seuranta virtsan ekstrasellulaaristen rakkuloiden kautta

Johdanto: Lupus nefriitti (LN) on vakava systeemisen lupus erythematosuksen (SLE) ilmentymä, joka voi johtaa peruuttamattomiin munuaisvaurioihin, jos sitä ei havaita ja hoideta nopeasti. LN luokitellaan sen histopatologisten ominaisuuksien perusteella. Luokittelu auttaa määrittämään tilan vakavuuden ja asianmukaiset hoitostrategiat sekä sulkemaan pois muut tilat, jotka voivat jäljitellä LN:n kliinistä kuvaa. Yleisimmin käytetty luokitusjärjestelmä on International Society of Nephrology/Renal Pathology Society (ISN/RPS) luokitus, joka jakaa lupusnefriitti kuuteen luokkaan: I) Minimal Change, II) Mesangial Proliferative LN, III) Focal Proliferative LN, IV) Diffus proliferatiivinen LN, V) Membranous LN, VI) Pitkälle edennyt sklerosoiva LN2. Luokittelu edellyttää invasiivisia munuaisbiopsioita, joihin on vaikea päästä käsiksi ja joihin liittyy mahdollisia komplikaatioita ja potilaan epämukavuutta. Lisäksi munuaisbiopsiat edustavat vain pientä osaa munuaisesta. Viimeaikaiset tutkimukset ovat ehdottaneet virtsan ekstrasellulaarisia rakkuloita (uEV) mahdollisiksi ei-invasiivisiksi biomarkkereiksi munuaissairauksille, mukaan lukien LN4. uEVS ovat pieniä, nanokokoisia, endosomaalista alkuperää olevia solunulkoisia rakkuloita, jotka erittyvät virtsaan monivesikulaaristen kappaleiden fuusioitumisen kautta plasmakalvoon. Siten ne voisivat edustaa lupaavaa nestemäistä biopsiaa, joka heijastaa munuaisten histologisen vaurion mallia ja/tai vakavuutta.

Hypoteesi: Tämän prospektiivisen tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on tutkia virtsan eksosomien käyttökelpoisuutta ei-invasiivisena biomarkkerina lupus nefriitin aktiivisuuden ja etenemisen seurannassa SLE-potilailla.

Menetelmät: SLE-potilaat, jotka täyttävät vuoden 2019 EULAR/ACR-luokituskriteerit, joihin viitataan munuaisbiopsiaan, rekrytoidaan Odensen yliopistollisen sairaalan reumatologian ja nefrologian osastolta. Jokaiselta potilaalta kerätään yksityiskohtaiset demografiset ja kliiniset tiedot, mukaan lukien ikä, sukupuoli, etnisyys, lääketiede, SLE-toiminnan kesto, SLE-vauriot ja laboratoriotulokset. SLE:n aktiivisuus biopsian aikana arvioidaan käyttämällä SLE-taudin aktiivisuusindeksiä 2000 (SLEDAI-2K). SLE-vauriot arvioidaan SLICC-vaurioindeksin mukaisesti. Pistevirtsanäytteet otetaan, lisätään proteaasi-inhibiittoreita ja pakastetaan -80 asteeseen. UEV:t eristetään käyttämällä polyetyleeniglykolisaostusta (PEG), uEV:n pitoisuus määritetään ja proteiiniin päästään Western blot -menetelmällä ja/tai PCR:llä. Glomerulaariset spesifiset uEV:t eristetään ja aiemmin kehitettyjä testejä sovelletaan kalvohyökkäyskompleksin (MAC)/C5b-9-kompleksin5 havaitsemiseen. uEV:t plasmasta/seerumista eristetään korrelaation testaamiseksi uEV:iden kanssa. Kokeneet nefropatologit analysoivat munuaisbiopsiat histologisesti patologian osastolla olemassa olevien kliinisten ohjeiden mukaisesti. Erot uEV-lastissa SLE-potilaiden välillä, joilla on lupus nefriitti ja ilman niitä, analysoidaan asianmukaisilla tilastollisilla testeillä. Eksosomaalisten biomarkkerien välisiä korrelaatioita, munuaisbiopsian histologisia eroja ja sairauden aktiivisuutta arvioidaan Pearsons-korrelaatioanalyysillä.

Perspektiivi: Tämän prospektiivisen tutkimuksen tavoitteena on vahvistaa virtsan eksosomit mahdollisiksi ei-invasiivisiksi biomarkkereiksi lupusnefriitin seurantaan SLE-potilailla. Tämän tutkimuksen tulokset voivat johtaa tehokkaampien ja potilasystävällisempien lähestymistapojen kehittämiseen LN:n hallintaan, mikä mahdollistaa oikea-aikaiset toimenpiteet ja parantaa munuaistuloksia SLE-potilailla.