Überwachung von Lupusnephritis durch extrazelluläre Vesikel im Urin

Einleitung: Lupusnephritis (LN) ist eine schwere Manifestation des systemischen Lupus erythematodes (SLE), die zu irreversiblen Nierenschäden führen kann, wenn sie nicht rechtzeitig erkannt und behandelt wird. LN wird anhand seiner histopathologischen Merkmale klassifiziert. Die Klassifizierung hilft dabei, den Schweregrad und geeignete Behandlungsstrategien für die Erkrankung zu bestimmen und andere Erkrankungen auszuschließen, die das klinische Bild von LN imitieren könnten. Das am häufigsten verwendete Klassifizierungssystem ist die Klassifizierung der International Society of Nephrology/Renal Pathology Society (ISN/RPS), die Lupusnephritis in sechs Klassen einteilt: I) Minimal Change, II) Mesangial Proliferative LN, III) Focal Proliferative LN, IV) Diffus proliferativer LN, V) Membranöser LN, VI) Fortgeschrittener sklerosierender LN2. Die Klassifizierung erfordert invasive Nierenbiopsien, die kaum zugänglich sind und mit potenziellen Komplikationen und Unbehagen für den Patienten verbunden sind. Darüber hinaus stellen die Nierenbiopsien nur einen kleinen Teil der Niere dar. Jüngste Forschungsergebnisse deuten darauf hin, dass extrazelluläre Vesikel (uEVs) im Urin potenzielle nicht-invasive Biomarker für Nierenerkrankungen, einschließlich LN4, sind. uEVS sind kleine extrazelluläre Vesikel in Nanogröße endosomalen Ursprungs, die durch Fusion multivesikulärer Körper mit der Plasmamembran in den Urin ausgeschieden werden. Somit könnten sie eine vielversprechende Flüssigkeitsbiopsie darstellen, die das Muster und/oder die Schwere der histologischen Nierenschädigung widerspiegelt.

Hypothese: Das Hauptziel dieser prospektiven Studie ist die Untersuchung des Nutzens von Harn-Exosomen als nicht-invasiver Biomarker zur Überwachung der Aktivität und des Fortschreitens von Lupusnephritis bei SLE-Patienten.

Methoden: SLE-Patienten, die die EULAR/ACR-Klassifizierungskriterien 2019 erfüllen und sich auf eine Nierenbiopsie beziehen, werden aus der Abteilung für Rheumatologie und der Abteilung für Nephrologie des Universitätsklinikums Odense rekrutiert. Von jedem Patienten werden detaillierte demografische und klinische Daten wie Alter, Geschlecht, ethnische Zugehörigkeit, Medizin, Dauer der SLE-Aktivität, SLE-Schaden und Laborergebnisse erhoben. Die SLE-Aktivität zum Zeitpunkt der Biopsie wird anhand des SLE-Krankheitsaktivitätsindex 2000 (SLEDAI-2K) bewertet. Der SLE-Schaden wird gemäß dem SLICC-Schadensindex bewertet. Es werden punktuell Urinproben entnommen, mit Proteaseinhibitoren versetzt und bei -80 Grad eingefroren. UEVs werden mittels Fällung mit Polyethylenglykol (PEG) isoliert, die Konzentration von uEV wird bestimmt und der Zugriff auf Proteine ​​erfolgt mittels Western Blot und/oder PCR. Glomeruläre spezifische uEVs werden isoliert und zuvor entwickelte Tests werden angewendet, um den Membranangriffskomplex (MAC)/C5b-9-Komplex5 zu erkennen. uEVs aus Plasma/Serum werden isoliert, um die Korrelation mit uEVs zu testen. Nierenbiopsien werden in der Abteilung für Pathologie von erfahrenen Nephropathologen gemäß den bestehenden klinischen Richtlinien histologisch analysiert. Unterschiede in der uEV-Fracht zwischen SLE-Patienten mit und ohne Lupusnephritis werden mithilfe geeigneter statistischer Tests analysiert. Korrelationen zwischen exosomalen Biomarkern, histologischen Unterschieden bei der Nierenbiopsie und Krankheitsaktivität werden mithilfe der Pearsons-Korrelationsanalyse ausgewertet.

Perspektive: Diese prospektive Studie zielt darauf ab, Harn-Exosomen als potenzielle nicht-invasive Biomarker für die Überwachung von Lupusnephritis bei SLE-Patienten zu etablieren. Die Erkenntnisse aus dieser Forschung können zur Entwicklung effizienterer und patientenfreundlicherer Ansätze für das LN-Management führen, die zeitnahe Interventionen und verbesserte Nierenergebnisse bei SLE-Patienten ermöglichen.