Monitoramento da nefrite lúpica por meio de vesículas extracelulares urinárias

Introdução: A nefrite lúpica (NL) é uma manifestação grave do lúpus eritematoso sistêmico (LES) que pode levar a danos renais irreversíveis se não for detectada e tratada prontamente. O LN é classificado com base em suas características histopatológicas. A classificação auxilia na determinação da gravidade e estratégias de tratamento adequadas para a doença e na exclusão de outras condições que possam mimetizar o quadro clínico da NL. O sistema de classificação mais comumente utilizado é a classificação da Sociedade Internacional de Nefrologia/Sociedade de Patologia Renal (ISN/RPS), que divide a nefrite lúpica em seis classes: I) Alteração Mínima, II) LN Proliferativa Mesangial, III) LN Proliferativa Focal, IV) LN proliferativo difuso, V) LN membranoso, VI) LN2 esclerosante avançado. A classificação requer biópsias renais invasivas, de difícil acesso e associadas a potenciais complicações e desconforto ao paciente. Além disso, as biópsias renais representam apenas uma pequena parte do rim. Pesquisas recentes sugeriram vesículas extracelulares urinárias (uEVs) como potenciais biomarcadores não invasivos para doenças renais, incluindo LN4. As uEVS são pequenas vesículas extracelulares de origem endossomal, de tamanho nanométrico, que são secretadas na urina através da fusão de corpos multivesiculares com a membrana plasmática. Assim, poderiam representar uma biópsia líquida promissora que reflete o padrão e/ou gravidade da lesão histológica renal.

Hipótese: O objetivo principal deste estudo prospectivo é investigar a utilidade dos exossomos urinários como biomarcador não invasivo para monitorar a atividade e progressão da nefrite lúpica em pacientes com LES.

Métodos: Pacientes com LES, atendendo aos critérios de classificação EULAR/ACR 2019, encaminhados para biópsia renal, serão recrutados no Departamento de Reumatologia e Departamento de Nefrologia do Hospital Universitário de Odense. Dados demográficos e clínicos detalhados, incluindo idade, sexo, etnia, medicamento, duração da atividade do LES, danos ao LES e resultados laboratoriais serão coletados de cada paciente. A atividade do LES no momento da biópsia será avaliada usando o índice de atividade da doença do LES 2000 (SLEDAI-2K). Os danos do SLE serão avaliados de acordo com o índice de danos SLICC. Amostras de urina spot serão coletadas, adicionadas de inibidores de protease e congeladas a -80 graus. Os UEVs serão isolados por precipitação com polietilenoglicol (PEG), a concentração de uEV será determinada e a proteína acessada por western blotting e/ou PCR. uEVs específicos glomerulares serão isolados e testes previamente desenvolvidos serão aplicados para detecção do complexo de ataque à membrana (MAC)/complexo C5b-95. uEVs de plasma/soro serão isolados para testar a correlação com uEVs. As biópsias renais serão analisadas histologicamente no departamento de Patologia por nefropatologistas experientes de acordo com as diretrizes clínicas existentes. As diferenças na carga de uEV entre pacientes com LES com e sem nefrite lúpica serão analisadas por meio de testes estatísticos apropriados. Correlações entre biomarcadores exossômicos, diferenças histológicas na biópsia renal e atividade da doença serão avaliadas por meio da análise de correlação de Pearson.

Perspectiva: Este estudo prospectivo visa estabelecer exossomos urinários como potenciais biomarcadores não invasivos para monitoramento de nefrite lúpica em pacientes com LES. As descobertas desta pesquisa podem levar ao desenvolvimento de abordagens mais eficientes e amigáveis ​​ao paciente para o manejo da NL, permitindo intervenções oportunas e melhores resultados renais em pacientes com LES.