PREVENPANC-projektet: en spansk multicenterstudie för förebyggande av pankreascancer (PREVENPANC)

Germline genetisk testning: Germline genetisk testning kommer att utföras på alla patienter med pankreascancer (PC) med hjälp av en anpassad multigenpanel. Denna panel inkluderar 25 genetiska kandidatvarianter av intresse och 13 kliniskt erkända gener associerade med en högre risk för PC.

DNA-extraktion: Germline DNA kommer att extraheras från perifera blodprover med hjälp av QIAamp DNA Blood Kit (Qiagen, Redwood City, CA, USA) enligt tillverkarens instruktioner. Koncentrationen av dubbelsträngat DNA kommer att mätas med en fluorometrisk metod (Qubit, Thermo Fisher Scientific).

Generering av 3D pankreatiska organoider för kompletterande analyser:

3D pankreatiska organoider kommer att genereras för kompletterande analyser som involverar funktionella studier in vitro för att utvärdera patogeniciteten hos nya gener (valda baserat på resultaten från multigenpanelen). Dessa organoider kommer att utvecklas från kirurgiska prover från fem patienter som genomgår operation som en del av den kliniska vården.

1. Karakterisering av misstänkta bukspottkörtelcancerskador:

   Karakterisering av misstänkta bukspottkörtelcancer (PC) lesioner identifierade av endoskopiskt ultraljud (EUS) och/eller magnetisk resonanstomografi (MRT) hos patienter som genomgår screening sedan 2014. Detta inkluderar lesionstyp (fast eller cystisk), snabb cystatillväxt som överstiger 4 mm per år, plats, storlek, potentiell bedömning av resectability, lobulocentrisk parenkymalatrofi och Wirsung-kanalutvidgning. Kliniskt relevanta misstänkta lesioner kommer att definieras som solida lesioner, intraduktala papillära mucinösa neoplasmer (IPMN), cystiska lesioner ≥10 mm och cystiska lesioner med mural noduler.

2. Bestämning av CA 19-9 och glykerat hemoglobin:

Mätning av CA 19-9-nivåer och glykerat hemoglobin (HbA1c) som en del av diagnostik- och övervakningsprocessen.

• Blodprov
• RMN
• Ecoendoscopia biliopancreática

Analys av miRNA-uttryck i plasma:

Uttrycket av cirkulerande miRNA (i plasma) kommer att analyseras med hjälp av kvantitativ omvänd transkriptionspolymeraskedjereaktion (qRT-PCR). Signaturen inkluderar två miRNA (miR-33a-3p och miR-320a) kombinerade med CA 19-9.

*Kliniskt protokoll:

- Identifiera faktorer och riskgrupper globalt associerade med pankreascancer (PC).

*Kliniskt protokoll:

- Bestäm prevalensen av genetiska mutationer i könsceller hos individer som diagnostiserats med PC inom den populationsbaserade kohorten under ett år.

*Översättningsprotokoll:

- Upptäck och validera nya ärftliga gener associerade med en ökad risk för PC genom riktad sekvensering med hjälp av en multigenpanel.

*Kliniskt protokoll:

-Identifiera specifika riskfaktorer associerade med pankreascancer (PC) i familjer med familjär pankreascancer (FPC) eller ärftlig pankreascancer (HPC).

*Kliniskt protokoll:

-Fastställ förekomsten av PC i familjer med diagnosen FPC och HPC i vår miljö.

*Kliniskt protokoll:

- Bedöma effektiviteten av PC-screeningstrategier i dessa högriskgrupper (FPC och HPC).

*Översättningsprotokoll:

-Utvärdera det icke-invasiva diagnostiska utbytet av utvalda nämnda miRNA som biomarkörer för PC-screening och tidig diagnos i FPC- och HPC-grupper med hjälp av qRT-PCR.

*Kliniskt protokoll:

- Etablera den mest effektiva strategin för att identifiera individer med en ärftlig predisposition för PC.

*Översättningsprotokoll:

- Utvärdera patogeniciteten hos identifierade genetiska varianter genom in vitro funktionella studier med användning av generering och modifiering av 3D pankreatiska organoider.

Skapa en kohort med klinisk information och biologiska prover:

Etablera en kohort bestående av individer med och utan pankreaspatologi som kontrollgrupp för framtida projekt inom PREVENPANC-nätverket.