Projeto PREVENPANC: um estudo multicêntrico espanhol para prevenção do câncer de pâncreas (PREVENPANC)

Teste genético da linha germinativa: O teste genético da linha germinativa será realizado em todos os pacientes com câncer de pâncreas (PC) usando um painel multigênico personalizado. Este painel inclui 25 variantes genéticas candidatas de interesse e 13 genes clinicamente reconhecidos associados a um maior risco de PC.

Extração de DNA: O DNA da linha germinativa será extraído de amostras de sangue periférico usando o QIAamp DNA Blood Kit (Qiagen, Redwood City, CA, EUA) seguindo as instruções do fabricante. A concentração de DNA de fita dupla será medida usando um método fluorométrico (Qubit, Thermo Fisher Scientific).

Geração de Organoides Pancreáticos 3D para Análises Complementares:

Organóides pancreáticos 3D serão gerados para análises complementares envolvendo estudos funcionais in vitro para avaliar a patogenicidade de novos genes (selecionados com base nos resultados do painel multigênico). Esses organoides serão desenvolvidos a partir de amostras cirúrgicas obtidas de cinco pacientes submetidos à cirurgia como parte do atendimento clínico.

1. Caracterização de suspeitas de lesões de câncer de pâncreas:

   Caracterização de lesões suspeitas de câncer de pâncreas (CP) identificadas por ultrassonografia endoscópica (USE) e/ou ressonância magnética (RM) em pacientes em rastreamento desde 2014. Isso inclui tipo de lesão (sólida ou cística), crescimento rápido do cisto superior a 4 mm por ano, localização, tamanho, avaliação potencial de ressecabilidade, atrofia parenquimatosa lobulocêntrica e dilatação do ducto de Wirsung. Lesões suspeitas clinicamente relevantes serão definidas como lesões sólidas, neoplasias mucinosas papilares intraductais (IPMN), lesões císticas ≥10 mm e lesões císticas com nódulos murais.

2. Determinação de CA 19-9 e Hemoglobina Glicada:

Medição dos níveis de CA 19-9 e hemoglobina glicada (HbA1c) como parte do processo de diagnóstico e monitoramento.

• Teste de sangue
• RMN
• Ecoendoscopia biliopancreática

Análise da expressão de miRNA no plasma:

A expressão de miRNAs circulantes (no plasma) será analisada por meio de reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa quantitativa (qRT-PCR). A assinatura inclui dois miRNAs (miR-33a-3p e miR-320a) combinados com CA 19-9.

*Protocolo Clínico:

- Identificar os factores e grupos de risco globalmente associados ao cancro do pâncreas (CP).

*Protocolo Clínico:

- Determinar a prevalência de mutações genéticas germinativas em indivíduos com diagnóstico de PC na coorte de base populacional ao longo de um ano.

*Protocolo de Tradução:

- Descobrir e validar novos genes hereditários associados a um risco aumentado de PC através de sequenciação direcionada utilizando um painel multigénico.

*Protocolo Clínico:

-Identificar fatores de risco específicos associados ao câncer de pâncreas (PC) em famílias com câncer de pâncreas familiar (FPC) ou câncer de pâncreas hereditário (HPC).

*Protocolo Clínico:

-Determinar a prevalência de PC em famílias com diagnóstico de FPC e HPC em nosso meio.

*Protocolo Clínico:

- Avaliar a eficácia das estratégias de rastreio de CP nestes grupos de alto risco (FPC e HPC).

*Protocolo de Tradução:

-Avaliar o rendimento diagnóstico não invasivo de miRNAs mencionados selecionados como biomarcadores para triagem de PC e diagnóstico precoce em grupos FPC e HPC usando qRT-PCR.

*Protocolo Clínico:

- Estabelecer a estratégia mais eficaz para identificar indivíduos com predisposição hereditária ao CP.

*Protocolo de Tradução:

- Avaliar a patogenicidade de variantes genéticas identificadas através de estudos funcionais in vitro utilizando a geração e modificação de organoides pancreáticos 3D.

Crie uma coorte com informações clínicas e amostras biológicas:

Estabelecer uma coorte composta por indivíduos com e sem patologia pancreática como grupo de controle para projetos futuros dentro da rede PREVENPANC.