ILERVAS 项目：评估亚临床血管疾病和隐匿性肾脏疾病的患病率 (ILERVAS)

研究设计和人群：

随机干预研究。 从 2015 年到 2018 年，16,660 名参与者（干预组 8,330 人（移动单元随访组）和无干预组（电子病史随访组）8,330 人）年龄在 45 至 70 岁之间，既往没有心血管病史疾病和至少一种心血管危险因素将在西班牙莱里达省随机选择。 位于莱里达（西班牙）的大学医院 Arnau de Vilanova 的伦理委员会批准了该协议。 所有患者均签署知情同意书。 该研究是根据赫尔辛基宣言的原则进行的。

信息来源和数据收集工具：

在移动单元 (MU) 中，将记录临床、社会人口学和人体测量数据。 将通过动脉超声（颈动脉、股动脉、经颅和腹主动脉）、踝肱指数、脉搏波速度、肺活量测定、晚期糖基化终末产物的测定、心房颤动筛查、干血斑试验和尿液分析对患者进行评估。 此外，DNA、RNA、唾液、血液和尿液样本将被收集并储存在生物库中，以通过组学研究识别新的生物标志物。 此外，整个莱里达省的气候、空气污染物和空气中的花粉数据都将被登记。 此外，还将收集体育锻炼、饮食和白天等变量。

在无干预组（电子病历随访组）中，将通过电子病历跟踪参与者。 社会人口统计学（年龄、性别、种族、婚姻状况、教育和劳动状况）、临床和人体测量数据将以电子方式收集。

参与者选择：

从 e-CAP（2014 年 10 月 24 日）中具有开放历史的总共 410,246 人中，将确定符合纳入标准的研究人群。 其中，将通过基本医疗保健区、初级保健 (PC) 中心或医生办公室定义的集群，通过简单随机化无替换地选择总共 16,660 人（干预组 8,330 人，无干预组 8,330 人），在根据一年期间可在 MU 访问的总人数。 选定干预组的参与者将被告知研究目标和诊断测试。

随访期：

已确定至少 10 年的随访期以观察 CV 事件的发生。 在流动单位后续小组中，将在招募四年后进行第二次访问。

心血管事件和 CKD 进展：

CV事件的发生将根据第10版国际疾病统计分类（ICD-10）进行记录，包括：心绞痛、心肌梗塞、短暂性脑缺血发作、脑血管意外、心力衰竭、心律失常、外周动脉任何动脉区域的疾病、主动脉瘤、血运重建和血管成形术。 同样，患者的死因，无论是 CV 起源（心肌梗塞、心律失常、心力衰竭、脑血管意外、主动脉瘤、肠系膜梗塞或猝死）还是非 CV 起源（感染、癌症、事故或肾病）都将被记录下来。 用于识别 CV 事件的信息来源将是：审查医疗记录（通过 e-CAP）和咨询加泰罗尼亚死亡率登记处。 CKD 进展定义为肌酐翻倍或进入肾脏替代治疗，也将通过 e-CAP 收集。

临床和生化数据：

将记录以下变量：体重、身高、腰围和颈围、以 kg/m2 为单位的体重指数、禁食时间、收缩压、舒张压和脉压 (mmHg)。 血压将以 2 分钟的间隔测量 3 次（欧姆龙 6®），并收集最后 2 次的平均值。 干毛细血管血液测试（指尖穿刺）将用于确定肌酐、尿酸和总胆固醇，使用 reflotron® Plus 系统（罗氏）。 在总胆固醇大于 200 mg/dl 的情况下，将使用 Roche 的 Cobas B 101® 系统确定完整的脂质谱（HDL 胆固醇、LDL 胆固醇和甘油三酯）。 还将测定非 HDL 胆固醇水平、糖化血红蛋白（Cobas B 101 系统，Roche）、CKD-EPI 肾小球滤过率。 使用 Clinitek Microalbumin 2 Reagent Strips 和 Siemens Clinitek Status® 分析仪在 MU 中收集的自发排尿尿样中测定白蛋白尿和白蛋白/肌酐比率。

动脉超声：

检查和阅读将由 2 名专门从事血管成像诊断的护士按照标准化协议进行，患者处于仰卧位。 将使用 VIVID I 版 BT12 超声系统（GE Healthcare）。 该系统有一个 12L-RS/4-13 MHz 线性探头（颈动脉和股动脉），一个 4C-RS/1.5-6 MHz 凸面探头（腹主动脉）和 3SRS/1.5-2.5 MHz 扇形探头（经颅）。 它还具有用于测量内膜中层厚度和脉冲多普勒超声的模块，以评估存在动脉粥样硬化斑块时的血液动力学异常，并分析颅内循环。 DICOM 网络连接系统将用于在 e-CAP 中在线记录结果和超声图像。

颈动脉：总共将分析 8 个血管区域（颈总动脉、分叉或球部、颈内动脉和颈外动脉），检查时患者处于仰卧位，头部向对侧转动 45º。

股动脉：患者仰卧位，检查股总动脉（分叉近端 1 cm）和两侧股浅动脉是否存在斑块。 斑块定义遵循相同的先前标准。

腹主动脉：60 岁及以上的男性。 对于仰卧位的患者，将从胸骨底部到髂动脉分叉处的腹部中线检查腹主动脉。 在轴向截面中，在观察到较大直径的点处，将捕获主动脉的 2 张图像，并进行 2 次测量（前-后和侧-侧）。 当直径大于 3 厘米时，将被认为存在主动脉瘤。

经颅超声：Willis 环的动脉及其分支将通过经颞和经椎间孔的声窗进行声波照射。 每个颅内动脉的多普勒频谱将使用颜色编码信号来确定。 将确定流向、收缩期峰值速度、平均流速和舒张期流速。 颅内颈动脉、M1 和 M2 段的大脑内侧动脉、大脑前动脉（A1 段）和 P1 和 P2 段的大脑后动脉将通过经颞声窗进行研究。 将通过经椎间孔声窗研究椎动脉和基底动脉的 V4 段。 在每位患者中，将记录狭窄的数量、位置和严重程度。 Baumgartner 的标准将用于根据峰值收缩波速度确定狭窄的严重程度（中度至严重狭窄，如果大脑内侧动脉≥155/220 cm/s，大脑内侧动脉≤120/≥155 cm/s大脑前动脉，大脑后动脉和基底动脉≥100/≥145 cm/s，椎动脉≥90/≥120 cm/s）。

踝臂指数：

将使用连续多普勒 (Hadecco ES100X MiniDop®)、血压计和血压袖带 (Riester minimus III®)。 将测量双肢的肱动脉、胫后动脉和足背动脉的收缩压。 将计算每条腿的胫骨和踏板收缩压与较高的肱动脉血压之间的比率。 每个肢体的最终值将是胫骨和足部血压之间获得的较低值。 踝臂指数值<0.9将被认为提示狭窄；值 <0.7 将被认为是狭窄，值 ≥1.4 将被认为提示动脉僵硬。

肺量计：

肺量计将用于评估肺活量。 它将由测量用力肺活量 (FVC) 的同一位护士执行；一秒钟用力呼气量 (FEV1)； FEV1 和 FVC 与正常下限之间的比率，以百分比表示。

高级糖化终末产物的测定：

它们将使用 AGE Reader 系统®（Diagnostics，荷兰）在前臂中使用皮肤自发荧光 (SAF) 进行测量。 SAF 是使用分光光度法测量的，分光光度法计算为反射光强度与折射光强度的关系。 获得的结果将根据年龄和性别分为 4 个 CV 风险组。

房颤筛查：

房颤的存在将在 MU 中使用 SRA 设备® (EVINA Health Solutions) 评估一小时。

脉冲波速度：

脉搏波速度 (PWV) 将用作动脉硬度的指标。 它将根据标准协议用颈动脉到股骨 PWV (cfPWV) 进行非侵入性测量。

生物样本采集：

将收集来自手或前臂外周静脉的血样以获得血清、血浆、DNA 和 RNA。 此外，还将收集唾液样本。这些样本将按照标准化方案等分制备，并冷冻（干冰）至中央生物库（IRBLleida Biobank，西班牙）进行处理和储存，用于后续的 CV、炎症和矿物质代谢生物标志物和遗传多态性。 尿液样本将被冷冻并储存在生物库中，用于后续的生物标志物研究。

统计分析：

描述性分析将包括定性变量的绝对和相对频率、服从正态分布的连续变量的均值和标准差，以及不服从正态分布的情况下的中位数和四分位数范围。 对于定性变量，将使用卡方检验分析它们的分布，对于具有正态分布的定量变量，将使用 Student's t 检验或 ANOVA 进行分析，否则，将使用非参数 Mann-Whitney U 或 Kruskal-Wallis 检验将用于那些没有正态分布的人。 定量变量之间的相关性将根据分布使用 Pearson 或 Spearman 检验进行分析。 将分析2个变量之间是否存在共线性，将能更好地预测结果变量的变量输入多元模型中。 如果因变量是定性的，则将使用逻辑回归进行多变量分析；如果是定量的，则使用线性回归。 Beta 回归系数、比值比 (OR) 及其各自的 95% 置信区间将被估计为关联度量。 在纵向研究中，将根据 MU 中使用的诊断测试和使用 Cox 回归研究的生物标志物，分析 CV 发病率和死亡率的发生率以及任何原因引起的死亡率。 统计显着性将设置为 p 值 < 0.05。