微嵌合体和cfDNA作为器官移植后急性排斥反应生物标志物的临床研究 (CSMCDTITAROT)
微嵌合体和 cfDNA 作为器官移植后急性排斥反应的生物标志物
器官移植已成为目前终末期器官衰竭患者的有效治疗手段。 排斥反应仍然是器官移植后早期功能障碍的最常见原因。 大量的实验和临床数据都表明微嵌合体的形成可以在移植后成功实现供体特异性免疫耐受。 微嵌合体的形成可能是移植的长期存活机制之一，移植后微嵌合体的检测可以有效预测移植物的排斥反应。 美国斯坦福大学的科学家在2014年和2015年连续报道，利用新一代高通量测序技术（NGS）检测心肺移植后受者血浆中供体游离DNA水平。 研究人员发现，当发生急性或慢性排斥反应时，供体体内的游离DNA水平显着升高，可作为反映排斥反应或移植物损伤的标志物。
已有报道微嵌合化和供体游离DNA水平与器官移植后排斥反应相关，但这些研究大多基于少量病例，其结果是定性的，由于检测有限，无法提供具体的微嵌合率技巧。 因此，为阐明微嵌合体和供体游离DNA水平在器官移植耐受中的作用，需要采用新一代检测技术进行大样本多中心研究。
采用临床试验评价微嵌合率和供体cfDNA对器官移植后急性排斥反应的临床预测和诊断价值。
器官移植950例，其中肾移植600例，肝移植300例，肺移植50例8。 ml外周血采1管，EDTA抗凝。 采集时间如下：移植后接受常规治疗的患者，每1周采集一次，持续1个月，之后每3个月采集一次，直至1年。 发生急性排斥反应时，诊断当天补血一次，治疗缓解后补血一次。 检测了所有样品的微嵌合现象和 cfDNA。
研究概览
详细说明
器官移植已成为目前终末期器官衰竭患者的有效治疗手段。 自2010年开展公民死后自愿器官捐献试点以来，2015年自愿器官捐献成为器官移植的唯一合法来源，从依靠司法渠道获取器官向公民自愿捐献器官的转变取得了长足进步。在中国已成功实现，捐赠案例和数量逐年增加。 目前，我国每年器官移植量已超过1万例，其中肾移植和肝移植居首位，分别超过5000例和2000例。
排斥反应仍然是器官移植后早期功能障碍最常见的原因，而供受者的主要组织相容性抗原（MHC，human MHC，又称HLA）错配是移植后排斥反应的主要原因。 因此，配型在器官移植中的重要性已被广泛接受。 HLA 分型和 HLA 高分辨率分型越来越普遍。 同时，国际最新研究表明，低分辨率HLA分型在器官移植中也会引起明显的排斥反应，而HLA高分辨率分型是未来的趋势，可以提高整体存活率。 此外，NGS高通量测序将HLA高分辨率分类推向一个新的高度。
除了HLA匹配外，受者可以对供体移植物建立特异性免疫耐受，这将显着影响术后的长期生存。 大量实验和临床数据表明，微嵌合体的形成可以成功促进移植后供体特异性免疫耐受。 嵌合体是指在接受同种异体或异种移植后，供体细胞和受体细胞共存并相互移动的情况，即供体细胞存在于受体体内，受体细胞也存在于移植物中。 其中，微嵌合体是指移植受者外周血循环中供体细胞含量低（通常小于0.01%），常见于实体器官移植患者。 微嵌合的概念最早由匹兹堡大学医学院的Thomas Starzl于1990年代提出，指出微嵌合与移植免疫耐受之间可能存在因果关系。 微嵌合现象的长期存在会导致受体对供体器官的耐受性。 器官的过客细胞越多，移出的细胞就越多，越容易形成移植耐受，这就解释了肝移植后出现轻度排斥反应的现象。
目前已发现多种诱导微嵌合体的方法，包括供体特异性输血、供体骨髓细胞输注、供体白细胞输注、脾脏切片联合器官移植等。
微嵌合体的形成可能是移植物的长期存活机制之一，移植后微嵌合体的检测可以有效预测移植物的免疫耐受和排斥反应，目前还没有非常有效的定量方法。 此外，微嵌合体与免疫耐受之间的关系仍存在疑问，如临床微嵌合体形成到何种程度提示稳定的免疫耐受，是否可以通过检测微嵌合体来判断是否停用免疫抑制剂等，这些都存在争议。有哪些亟待解决和厘清的问题。 基于插入缺失（InDel）位点结合实时定量聚合酶链反应，检测灵敏度可达0.001%~0.01%，可准确量化微嵌合水平，动态监测移植后的微嵌合状态。
同时，美国斯坦福大学的科学家在2014年和2015年连续报道，利用新一代高通量测序技术（NGS）检测血液中供体来源的游离DNA（cf DNA）水平心脏和肺移植后接受者的血浆。 研究人员发现，当发生急性或慢性排斥反应时，供体来源的cf DNA水平显着升高，因此可以作为反映排斥反应或移植物损伤的标志物。
有报道指出，微嵌合化和供体cfDNA水平与器官移植后排斥反应相关，但这些研究大多基于少数病例，由于检测技术有限，其结果是定性的或分辨率值较低，因此无法不提供特定的微嵌合率。
因此，研究者需要利用新一代检测技术进行大样本多中心研究，阐明微嵌合体和供体来源的cf DNA水平在移植物损伤和移植后排斥反应中的作用。
本研究将招募和检测器官移植950例，其中肾移植600例，肝移植300例，肺移植50例。 8 ml 外周血将收集在 1 管中，用 EDTA 抗凝。 采集时间点如下：移植后常规治疗患者每周1次，持续1个月，移植后3、6、12个月。 如果是急性排斥反应，在确诊当天补血一次，治疗缓解7天后补血一次。 检测了所有样品的微嵌合现象和 cfDNA。
研究类型
注册 (预期的)
联系人和位置
学习地点
-
-
Fujian
-
Fuzhou、Fujian、中国、350025
- 招聘中
- Fuzhou General Hospital, Xiamen Univ Fuzhou, Fujian China
-
接触：
- Jian ming Tan
- 电话号码：86-13375918000
- 邮箱：tjming156@xmu.edu.cn
-
接触：
- Jun Lun
- 电话号码：86-13599091436
- 邮箱：junlu.heather@xmu.edu.cn
-
-
参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
有资格学习的性别
取样方法
研究人群
描述
纳入标准：
- 18岁以上单一器官移植受者 再次器官移植受者
- 无全身性急慢性感染、传染性疾病的接受者；
- 没有严重全身疾病和/或精神系统疾病的接受者
- 接受者或家属签署同意书。
排除标准：
- 供体为儿童（18岁以下）的器官移植受者
- 等待多器官移植的患者
- 无法或不愿意定期跟进
学习计划
研究是如何设计的？
设计细节
- 观测模型：队列
- 时间观点：预期
研究衡量的是什么？
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
|---|---|---|
|
接受者中供体微嵌合体的量化每周进行一次，持续 1 个月，然后在移植后 3、6 和 12 个月进行。
大体时间：2017.4.1-2021.4.31
|
采集约8mL外周全血，提取血细胞中的DNA用于qPCR分析。
在此期间扩增了30个目标基因组基因，供体微嵌合率通过先前区分供体和受体之间的InDel位点来量化。
|
2017.4.1-2021.4.31
|
次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
|---|---|---|
|
在移植后 3、6 和 12 个月，每周一次，持续 1 个月，然后在接受者中对供体来源的 cfDNA 率进行量化。
大体时间：2017.4.1-2021.4.31
|
采集约8mL外周全血，分离血浆，用于Illumina系统（美国）进行二代测序。
捐赠者和接受者的基因分型
|
2017.4.1-2021.4.31
|
合作者和调查者
合作者
出版物和有用的链接
一般刊物
- De Vlaminck I, Martin L, Kertesz M, Patel K, Kowarsky M, Strehl C, Cohen G, Luikart H, Neff NF, Okamoto J, Nicolls MR, Cornfield D, Weill D, Valantine H, Khush KK, Quake SR. Noninvasive monitoring of infection and rejection after lung transplantation. Proc Natl Acad Sci U S A. 2015 Oct 27;112(43):13336-41. doi: 10.1073/pnas.1517494112. Epub 2015 Oct 12.
- De Vlaminck I, Valantine HA, Snyder TM, Strehl C, Cohen G, Luikart H, Neff NF, Okamoto J, Bernstein D, Weisshaar D, Quake SR, Khush KK. Circulating cell-free DNA enables noninvasive diagnosis of heart transplant rejection. Sci Transl Med. 2014 Jun 18;6(241):241ra77. doi: 10.1126/scitranslmed.3007803.
- Gielis EM, Ledeganck KJ, De Winter BY, Del Favero J, Bosmans JL, Claas FH, Abramowicz D, Eikmans M. Cell-Free DNA: An Upcoming Biomarker in Transplantation. Am J Transplant. 2015 Oct;15(10):2541-51. doi: 10.1111/ajt.13387. Epub 2015 Jul 16.
- Adams KM, Nelson JL. Microchimerism: an investigative frontier in autoimmunity and transplantation. JAMA. 2004 Mar 3;291(9):1127-31. doi: 10.1001/jama.291.9.1127.
- Akamatsu Y, Ohkohchi N, Seya K, Satomi S. Analysis of bilirubin fraction in the bile for early diagnosis of acute rejection in living related liver transplantation. Tohoku J Exp Med. 1997 Jan;181(1):145-54. doi: 10.1620/tjem.181.145.
- Aljurf M, Abalkhail H, Alseraihy A, Mohamed SY, Ayas M, Alsharif F, Alzahrani H, Al-Jefri A, Aldawsari G, Al-Ahmari A, Belgaumi AF, Walter CU, El-Solh H, Rasheed W, Albitar M. Chimerism Analysis of Cell-Free DNA in Patients Treated with Hematopoietic Stem Cell Transplantation May Predict Early Relapse in Patients with Hematologic Malignancies. Biotechnol Res Int. 2016;2016:8589270. doi: 10.1155/2016/8589270. Epub 2016 Feb 23.
- Ascher NL. Microchimerism in organ transplantation. Liver Transpl Surg. 1995 Jan;1(1):43-6. doi: 10.1002/lt.500010109. No abstract available.
- Avolio AW, Gozzo ML, Forni L, Agnes S, Colacicco L, Barbaresi G, Magalini SC, Castagneto M. Mitochondrial/cytoplasmic enzyme ratio for the diagnosis of acute rejection after liver transplantation: sensitivity and specificity. Transplant Proc. 1992 Dec;24(6):2572-3. No abstract available.
- Bakr MA, Nagib AM, Donia AF. Induction immunosuppressive therapy in kidney transplantation. Exp Clin Transplant. 2014 Mar;12 Suppl 1:60-9. doi: 10.6002/ect.25liver.l58.
- Bamgbola O. Metabolic consequences of modern immunosuppressive agents in solid organ transplantation. Ther Adv Endocrinol Metab. 2016 Jun;7(3):110-27. doi: 10.1177/2042018816641580. Epub 2016 Mar 30.
- Beck J, Oellerich M, Schulz U, Schauerte V, Reinhard L, Fuchs U, Knabbe C, Zittermann A, Olbricht C, Gummert JF, Shipkova M, Birschmann I, Wieland E, Schutz E. Donor-Derived Cell-Free DNA Is a Novel Universal Biomarker for Allograft Rejection in Solid Organ Transplantation. Transplant Proc. 2015 Oct;47(8):2400-3. doi: 10.1016/j.transproceed.2015.08.035.
- Biancofiore G, Pucci L, Cerutti E, Penno G, Pardini E, Esposito M, Bindi L, Pelati E, Romanelli A, Triscornia S, Salvadorini MP, Stratta C, Lanfranco G, Pellegrini G, Del Prato S, Salizzoni M, Mosca F, Filipponi F. Cystatin C as a marker of renal function immediately after liver transplantation. Liver Transpl. 2006 Feb;12(2):285-91. doi: 10.1002/lt.20657.
- Capron A, Haufroid V, Wallemacq P. Intra-cellular immunosuppressive drugs monitoring: A step forward towards better therapeutic efficacy after organ transplantation? Pharmacol Res. 2016 Sep;111:610-618. doi: 10.1016/j.phrs.2016.07.027. Epub 2016 Jul 25.
- Chen Y, Tai Q, Hong S, Kong Y, Shang Y, Liang W, Guo Z, He X. Pretransplantation soluble CD30 level as a predictor of acute rejection in kidney transplantation: a meta-analysis. Transplantation. 2012 Nov 15;94(9):911-8. doi: 10.1097/TP.0b013e31826784ad.
- Delville M, Charreau B, Rabant M, Legendre C, Anglicheau D. Pathogenesis of non-HLA antibodies in solid organ transplantation: Where do we stand? Hum Immunol. 2016 Nov;77(11):1055-1062. doi: 10.1016/j.humimm.2016.05.021. Epub 2016 May 26.
- Deschaseaux F, Delgado D, Pistoia V, Giuliani M, Morandi F, Durrbach A. HLA-G in organ transplantation: towards clinical applications. Cell Mol Life Sci. 2011 Feb;68(3):397-404. doi: 10.1007/s00018-010-0581-6. Epub 2010 Nov 20. Erratum In: Cell Mol Life Sci. 2011 Feb;68(3):405.
- Dragun D, Catar R, Philippe A. Non-HLA antibodies in solid organ transplantation: recent concepts and clinical relevance. Curr Opin Organ Transplant. 2013 Aug;18(4):430-5. doi: 10.1097/MOT.0b013e3283636e55.
- Dragun D, Hegner B. Non-HLA antibodies post-transplantation: clinical relevance and treatment in solid organ transplantation. Contrib Nephrol. 2009;162:129-39. doi: 10.1159/000170845. Epub 2008 Oct 31.
- Duan Z, Zhang Y, Pan F, Zhang T, Zeng Z, Wang S, Li G, Shen B, Gao J. Association between CTLA4 gene polymorphisms and acute rejection of kidney transplantation: a meta-analysis. J Nephrol. 2012 Nov-Dec;25(6):996-1002. doi: 10.5301/jn.5000082.
- Eigler J. [The acute rejection reaction following kidney transplantation. Diagnostic and therapeutic aspects]. Med Klin. 1978 Dec 1;73(48):1682-9. No abstract available. German.
- Eikmans M, van Halteren AG, van Besien K, van Rood JJ, Drabbels JJ, Claas FH. Naturally acquired microchimerism: implications for transplantation outcome and novel methodologies for detection. Chimerism. 2014;5(2):24-39. doi: 10.4161/chim.28908.
- Elahimehr R, Scheinok AT, McKay DB. Hematopoietic stem cells and solid organ transplantation. Transplant Rev (Orlando). 2016 Oct;30(4):227-34. doi: 10.1016/j.trre.2016.07.005. Epub 2016 Aug 3.
- Espinel CH, Mendez-Picon G, Currier C, Novello A, Helfrich GB, Lee HM. FE Na effective in early diagnosis of acute rejection after kidney transplantation. Proc Clin Dial Transplant Forum. 1979;9:256-9. No abstract available.
- Gambato M, Lens S, Fernandez-Carrillo C, Alfaro I, Forns X. Viral hepatitis and liver transplantation: pathogenesis, prevention and therapy of recurrent disease. Dig Dis. 2014;32(5):538-44. doi: 10.1159/000360831. Epub 2014 Jul 14.
- Garcia Moreira V, Prieto Garcia B, Baltar Martin JM, Ortega Suarez F, Alvarez FV. Cell-free DNA as a noninvasive acute rejection marker in renal transplantation. Clin Chem. 2009 Nov;55(11):1958-66. doi: 10.1373/clinchem.2009.129072. Epub 2009 Sep 3.
- Germani G, Rodriguez-Castro K, Russo FP, Senzolo M, Zanetto A, Ferrarese A, Burra P. Markers of acute rejection and graft acceptance in liver transplantation. World J Gastroenterol. 2015 Jan 28;21(4):1061-8. doi: 10.3748/wjg.v21.i4.1061.
- Gierej B, Kobryn K, Gierej P, Gornicka B. C4d in acute rejection after liver transplantation and its usefulness in differential diagnosis between acute liver rejection and hepatitis C recurrence. Ann Transplant. 2014 Aug 1;19:373-81. doi: 10.12659/AOT.890234.
- Gozzo ML, Avolio AW, Colacicco L, Agnes S, Forni F, Barbaresi G, Castagneto M. Mitochondrial liver enzymes and the ratio between mitochondrial and cytoplasmic enzymes in the differential diagnosis of acute rejection after liver transplantation. Transplant Proc. 1993 Apr;25(2):1760-1. No abstract available.
研究记录日期
研究主要日期
学习开始 (实际的)
初级完成 (预期的)
研究完成 (预期的)
研究注册日期
首次提交
首先提交符合 QC 标准的
首次发布 (实际的)
研究记录更新
最后更新发布 (实际的)
上次提交的符合 QC 标准的更新
最后验证
更多信息
此信息直接从 clinicaltrials.gov 网站检索，没有任何更改。如果您有任何更改、删除或更新研究详细信息的请求，请联系 register@clinicaltrials.gov. clinicaltrials.gov 上实施更改，我们的网站上也会自动更新.
没有干预的临床试验
-
Institute of Liver and Biliary Sciences, India招聘中
-
Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc.Celerion完全的
-
University of SalernoAzienda Ospedaliera OO.RR. S. Giovanni di Dio e Ruggi D'Aragona招聘中