CHED - 先天性遗传性内皮营养不良：使用局部滴眼液治疗的新范式转变

介绍：

角膜内皮细胞丢失通常与致盲性角膜内皮营养不良有关：显性遗传 (5%) FECD（Fuchs 内皮角膜营养不良）和罕见的隐性 CHED1 相对常见。 SLC4A11 的突变是一种丰富的角膜溶质转运蛋白，会导致 CHED 和一些 FECD 病例。 SLC4A11 是 SLC4 碳酸氢盐转运蛋白家族的一个独特成员，位于角膜内皮细胞的基底外侧表面，有助于渗透驱​​动的水从基质到房水的通量，以维持角膜液体平衡 2。

虽然据报道功能性 SLC4A11 的突变和丧失与内皮细胞的退化和死亡有关，但 SLC4A11 的详细生理作用仍然未知。 78 种不同的突变，包括 42 种错义突变、9 种无义突变、4 种剪接位点突变和 23 种插入-缺失突变，散布在印度人群 CHED 家族中报道的基因中3。 目前的治疗手段包括穿透性角膜移植术、后弹力层剥离式自动角膜内皮移植术（DSAEK）和后弹力层膜内皮角膜移植术（DMEK）等，面临供体角膜短缺、手术过程复杂、移植物急慢性期失败率高等问题4、5。

在模型细胞中研究时，突变膜蛋白最常见的分子表型是轻度错误折叠。 这种生物合成缺陷使蛋白质无法从内质网 (ER) 合成位点转运到其正常细胞位置。 请注意，尚未检查 SLC4A11 在内皮营养不良患者角膜中的定位； ER 保留的结论目前依赖于细胞培养模型的数据。 纠正这种生物合成缺陷是一些影响膜蛋白的遗传疾病的有吸引力的治疗方法，药物 Lumacaftor 在挽救细胞表面错误折叠的囊性纤维化跨膜电导调节剂 (CFTR) 中的功效就是最好的例证，CFTR 是囊性纤维化的蛋白质产物纤维化（CF）基因。

因此，迫切需要寻找可靠、简单且负担得起的替代疗法。 现在人们对选择一种非侵入式方式而不是侵入式方式产生了很大兴趣。 在 SLC4A11 突变角膜营养不良中，一个有趣的话题是假设非甾体抗炎药 (NSAID) 作为角膜内皮营养不良的医学治疗的作用。

大多数 SLC4A11 突变导致生物合成缺陷，其标志是蛋白质在内质网中的积累，以及它们在到达质膜之前的降解。 这产生了增加的活性氧，从而使细胞更容易受到氧化和线粒体损伤，并且更容易发生凋亡。

一项小规模的药物筛选表明，一种废弃的非甾体抗炎药格拉芬宁能够将一些 SLC4A11 突变体转移到细胞表面，这表明其他非甾体抗炎药也可能具有治疗潜力。

此外，Alka 等人对表达 CHED 和 FECD 突变的 HEK293 细胞进行的研究研究了内质网中保留的蛋白质以及各种药物对其表面表达的影响。 他们在 30 个测试细胞中的 20 个中展示了双氯芬酸（扶他林眼科）和奈帕芬胺在移动内质网保留的错义突变体 SLC4A11 方面优于其他非甾体抗炎药的功效。 这显示了非甾体抗炎药在这些情况下的潜在作用。

因此，该项目旨在筛选可用作滴眼液的非甾体抗炎药，看它们是否具有纠正 SLC4A11 蛋白细胞表面运输的能力。

自首次引入眼科以来，非甾体抗炎药的使用呈指数级增长，从治疗应用包括治疗与眼科手术相关的疼痛和炎症，到预防和治疗与白内障手术相关的黄斑囊样水肿 (CME)，增强术中散瞳和多种炎症性眼科疾病，如季节性过敏性结膜炎、病毒性结膜炎、葡萄膜炎、巩膜外层炎和巩膜炎，以及视网膜和脉络膜疾病。

这样做的主要原因是它们 - (i) 易于处理 (ii) 非侵入性，(iii) 耐受性良好 (iv) 足够的眼部药物浓度，同时避免与口服给药相关的全身副作用。

然而，众所周知，传统局部制剂的眼部药物生物利用度很差，因为只有 1-5% 的药物施用于表面会穿透角膜。

除了这些眼部解剖学和生理学限制外，抗炎药或免疫抑制剂遇到的另一个限制因素是它们的水溶性差。

前药方法是一种增强药物渗透性的化学方法。 合成的无活性前药表现出更好的角膜渗透性，一旦就位，就会通过化学和/或酶促代谢变得活跃。 据研究，奈帕芬胺是氨芬酸的一种酰胺前药，属于芳基乙酸的药理学 NSAID 类，在体外表现出比双氯芬酸高近六倍的渗透系数。

在体内，奈帕芬胺在局部眼部给药后很容易穿过角膜和视网膜组织。

在此背景下，该研究旨在探索 NSAID 滴眼液（奈帕芬胺）作为治疗 CHED 儿童的一种有前途的新型治疗方法的具体应用。

尚无关于在先天性遗传性内皮营养不良病例中使用非甾体抗炎药滴眼液进行人体试验的已发表报告。

目标：

确定局部眼科非甾体抗炎药在逆转或延迟 CHED 儿童角膜混浊中的临床效用

研究区域/环境：角膜和眼前节服务，Kallam Anji Reddy 校区，L V Prasad，眼科研究所，海得拉巴

学习时间：2年：2020年12月15日至2022年12月15日

样本量：由于这是一项没有其他先前工作的新颖研究，因此人口规模至少为 30 只眼睛

研究人群：符合纳入标准的先天性遗传性内皮营养不良的诊断病例

研究设计：双盲、安慰剂对照、简单随机对照试验：双眼研究

统计方法：本研究的数据将使用 t 检验或 χ2 检验进行比较，具体取决于数据本质上是参数还是非参数

方法：

使用眼科 NSAIDs 制剂靶向 SLC4A11 突变：

试验药物是奈帕芬胺滴眼液 0.1%w/v。 以 4 滴的剂量滴入测试眼中，每天 4 次（每 4 小时一次）滴 1 滴。即在早上、下午、晚上和晚上。 这将持续 6 个月。

对照药物是0.5%w/v的羧甲基纤维素钠润滑剂滴眼液，剂量与试验滴眼液相同，但在对照眼中。

将通过简单随机化选择测试眼。 对于所有编号为偶数的案例，右眼将作为测试眼，对于编号为奇数的案例，左眼将成为测试眼。

为了确保患者和研究人员不知情，两种滴剂将被分配到相同的瓶子中，并重新贴上字母“R”和“L”的标签，表示患者将使用哪只眼睛。 这将在只有一名研究成员具有药物特性清单的情况下进行。 同一个人还将为患者提供适当标记的药物，并且不会参与临床评估和患者数据分析。

为检查患者的依从性，患者每次就诊时均须取回用过的瓶子，并提供新瓶子。 由于每瓶含有 5 毫升的溶液，因此每瓶可以使用 25-30 天，这也是我们对患者的随访时间表。