Studie rozdělené kohorty srovnávající výsledky IVF po použití testikulárních vs. ejakulovaných spermií pro ICSI

Experimentální design pro tuto studii je následující:

1. Páry s mužskými partnery, kteří budou podstupovat TESA proceduru sekundárně kvůli zvýšené fragmentaci DNA (>25% DFI) jako součást jejich rutinní IVF léčby, budou kontaktováni pro možnou účast ve studii.
2. Bude získán informovaný souhlas
3. Primární vyšetřovatel bude informován o účasti páru.
4. Mužský partner kryokonzervuje vzorek ejakulovaného spermatu, pokud v inventáři není žádný kryokonzervovaný ejakulovaný vzorek. Mužský partner podstoupí chirurgický odběr spermatu (TESA) a vzorek bude zmražen podle běžného postupu.
5. Sérum bude odebráno od mužského partnera a uchováno pro budoucí analýzu.
6. Kryokonzervovaný ejakulát před TESA a vzorek TESA budou rozmraženy v den odběru oocytů podle protokolu. Po odebrání oocytů budou oocyty analyzovány podle rutiny a hodnocena zralost. Oocyty budou rozděleny do dvou skupin podle uvážení embryologa. Jedna skupina bude označena 'A' a druhá bude označena B.' Generátor náhodných písmen vytvoří seznam 'A' a 'B', které budou umístěny do postupně očíslovaných, zapečetěných obálek. Obálky se budou otevírat v pořadí podle registrace pacienta. První obálka, kterou embryolog otevře, odhalí písmeno skupiny oocytů, která bude inseminována testikulárním spermatem. Druhá skupina bude inseminována zmrazenými/rozmraženými ejakulovanými spermiemi. Polovina oocytů bude tedy inseminována pomocí intracytoplazmatické injekce spermie (ICSI) se spermiemi z varlat a druhá polovina bude inseminována pomocí ICSI s ejakulovanými spermiemi. Pokud je lichý počet oocytů, bude oocyt navíc pro jednoduchost vždy patřit do skupiny A.
7. Pokud dojde k oplodnění, skupina zygot vytvořená pomocí testikulárních spermií bude mít skupinové písmeno, které odpovídalo testikulárním spermiím. To bude platit i pro zygoty používající ejakulované spermie. Obě skupiny zygot budou kultivovány do stadia blastocysty za kultivačních podmínek podle standardních laboratorních postupů.
8. U každého pacienta bude zaznamenána míra oplodnění a blastulace dvou skupin.
9. Každá blastocysta bude rutinním způsobem biopsie pro komplexní chromozomový screening (CCS). Jakmile budou k dispozici výsledky komplexního chromozomálního screeningu, pokud je k dispozici alespoň jedno euploidní embryo, pacientky podstoupí transfer jednoho embrya v následujícím menstruačním cyklu.
10. Cykly přenosu zmrazeného embrya budou prováděny buď pomocí naprogramovaného cyklu (exogenní estradiol s následným progesteronem) nebo přirozeného cyklu k přípravě endometria na přenos embrya.
11. Pokud je k dispozici alespoň jedno euploidní embryo z každé skupiny, dojde k druhé randomizaci v době selekce embryí. Embryolog vybírající embryo k transferu otevře druhou zapečetěnou obálku, která obsahuje dopis skupiny, ze které má embryo k transferu pobývat. K transferu bude vybráno nejkvalitnější embryo (dle uvážení embryologa) ze skupiny odpovídající dopisu v této obálce. Embryolog, který embryo vybírá, bude zaslepen, jaká skupina embryí byla vytvořena s ejakulovaným spermatem versus testikulární spermie. Bude zaznamenána skupina, ze které bylo získáno embryo vybrané pro transfer.
12. Pacient i lékař provádějící transfer embrya budou zaslepeni s ohledem na skupinu, ze které pochází embryo vybrané pro transfer.
13. Těhotenský test a sledování budou probíhat jako obvykle.
14. Přibližně 8 týdnů po transferu bude každému účastníkovi přidělen výsledek cyklu (tj. žádné těhotenství, potrat, pokračující těhotenství). V té době mohou být účastníci studie informováni o tom, zda spermie použité pro ICSI byly získány z testikulárních spermií nebo ejakulovaných spermií. Tyto informace lze sdílet telefonicky nebo osobně.