Estudo de coorte dividida comparando resultados de fertilização in vitro após o uso de esperma testicular versus ejaculado para ICSI

O desenho experimental para este estudo é o seguinte:

1. Casais com parceiros do sexo masculino que serão submetidos a um procedimento TESA secundário à elevada fragmentação do DNA (>25% DFI) como parte de seu tratamento de fertilização in vitro de rotina serão contatados para possível participação no estudo.
2. O consentimento informado será obtido
3. O investigador principal será notificado da participação do casal.
4. O parceiro masculino irá criopreservar uma amostra de sêmen ejaculado se não houver nenhum espécime ejaculado criopreservado no inventário. O parceiro masculino passará por uma recuperação cirúrgica de esperma (TESA) e a amostra será congelada de acordo com a rotina.
5. O soro será coletado do parceiro masculino e preservado para análises futuras.
6. O ejaculado pré-TESA criopreservado e a amostra de TESA serão descongelados no dia da coleta de oócitos de acordo com o protocolo. Após a coleta de oócitos, os oócitos serão analisados ​​por rotina e avaliados quanto à maturidade. Os ovócitos serão divididos em dois grupos a critério do embriologista. Um grupo será rotulado como 'A' e o outro será rotulado como B.' Um gerador de letras aleatório criará uma lista de 'A' e 'B's que serão colocadas em envelopes lacrados e numerados sequencialmente. Os envelopes serão abertos na sequência de acordo com a inscrição do paciente. O primeiro envelope aberto pelo embriologista revelará a letra do grupo de oócitos que será inseminado com espermatozoides testiculares. O outro grupo será inseminado com o esperma ejaculado congelado/descongelado. Portanto, metade dos ovócitos será inseminada por meio de injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) com espermatozoides testiculares e a outra metade será inseminada via ICSI com espermatozoides ejaculados. Se houver um número ímpar de oócitos, o oócito extra sempre pertencerá ao grupo A para simplificar.
7. Se fertilizado, o grupo de zigotos criado a partir do esperma testicular levará a letra do grupo correspondente ao esperma testicular. Isso também será verdade para os zigotos que usam esperma ejaculado. Ambos os grupos de zigotos serão cultivados até o estágio de blastocisto com condições de cultura de acordo com os procedimentos laboratoriais padrão.
8. As taxas de fertilização e blastulação dos dois grupos serão registradas para cada paciente.
9. Cada blastocisto será biopsiado para triagem cromossômica abrangente (CCS) de forma rotineira. Assim que os resultados abrangentes da triagem cromossômica estiverem disponíveis, se pelo menos um embrião euploide estiver disponível, as pacientes serão submetidas à transferência de um único embrião em um ciclo menstrual subsequente.
10. Os ciclos de transferência de embriões congelados serão realizados usando um ciclo programado (estradiol exógeno com progesterona subsequente) ou um ciclo natural para preparar o endométrio para a transferência de embriões.
11. Se pelo menos um embrião euploide estiver disponível de cada grupo, uma segunda randomização ocorrerá no momento da seleção do embrião. O embriologista que selecionar o embrião para transferência abrirá um segundo envelope lacrado, que contém a carta do grupo do qual o embrião para transferência deve residir. O embrião de melhor qualidade (a critério do embriologista) do grupo correspondente à letra deste envelope será selecionado para transferência. O embriologista que selecionar o embrião não saberá qual grupo de embriões foi criado com esperma ejaculado versus testicular. O grupo do qual o embrião selecionado para transferência foi derivado será registrado.
12. Tanto a paciente quanto o médico que realizará a transferência do embrião estarão cegos em relação ao grupo do qual o embrião selecionado para transferência derivou.
13. O teste de gravidez e o acompanhamento prosseguirão de acordo com a rotina.
14. Aproximadamente 8 semanas após a transferência, cada participante receberá um resultado do ciclo (ou seja, sem gravidez, aborto espontâneo, gravidez em andamento). Nesse momento, os participantes do estudo podem ser notificados se o esperma utilizado para ICSI foi derivado de esperma testicular ou esperma ejaculado. Essas informações podem ser compartilhadas por telefone ou pessoalmente.