Proveditelnost konfokální laserové mikroskopie (CLM) v jehlové biopsii plicních a mediastinálních lézí řízené počítačovou tomografií

CT navigovaná jehlová biopsie (TTNB – trans thoracic needle biopsie) plicních lézí je dobře zavedenou diagnostickou technikou v pulmonologii. Je nejvhodnější pro periferní plicní léze o průměru větším než 2 cm a pro diagnostiku mediastinálního útvaru. V těchto situacích může výtěžnost diagnózy dosáhnout až 90 %. Avšak u menších nebo „nehomogenních“ lézí (jako u CT zobrazení) se výtěžnost snižuje na pouhých 60 %. Protože obvykle neexistuje rychlé patologické vyšetření vzorku na místě (ROSE), je prováděna řada pokusů (průchodů), aby bylo možné získat kvalitní vzorek. Míra komplikací TTNB (pneumotorax nebo krvácení) je relativně vysoká (až 15 %, resp. 5 %). Nekróza je běžným rysem rychle rostoucích nádorů a může významně zhoršit histopatologickou diagnózu a tím snížit výtěžnost TTNB. Optimalizace polohy jehly do oblasti životaschopné tkáně léze je nezbytná pro zlepšení výtěžnosti techniky TTNB.

CLM je emergentní technika, při které nízkovýkonový laser excituje autofluorescenci nebo indukovanou fluorescenci (intravenózně. podávání) tkání. . CLM je schopna poskytnout vyšetřujícímu zobrazení tkáně blízké histopatologické kvalitě sloužící jako „optická biopsie“. Tato technika je dobře zavedená v dermatologii a gastroenterologii (prostřednictvím endoskopů) a slouží k rozlišení buněčných abnormalit u zánětlivých, premaligních a maligních poruch. Nedávno byly popsány plicní aplikace umožňující alveolární vidění v reálném čase (alveoskopie). Při použití přes pracovní kanál různých endoskopů se nazývá sonda CLE (probe konfokální laserová endomikroskopie).

V diagnostice pankreatických mas a celiakálních/mediastinálních lymfatických uzlin byla studována jehlová konfokální laserová endomikroskopie (nCLE). Zobrazování začalo po intravenózním podání fluoresceinu. Předběžné výsledky ukázaly dobrou kvalitu zobrazení a také pozoruhodnou pozitivní prediktivní hodnotu detailů snímků v normální versus nemocné tkáni.

Sonda CLM má průměr 0,85 mm a může být zavedena přes 19G transthorakální bioptickou jehlu výměnou styletu. Jeho zorné pole je 320 µm, boční rozlišení 3,5 µm, hloubka 50 µm a délka 4 m. TTNB bude provedeno dle standardního protokolu na oddělení intervenční radiologie v Shebě po nitrožilní aplikaci fluoresceinu. Tento protokol je popsán dále.

Po obdržení souhlasu pacient leží na CT stole a kůže nad hrudní lézí se vyčistí a zakryje obvyklým sterilním způsobem. Lokální anestezie se aplikuje lidokainem 2% do kůže a pohrudnice a zaváděcí jehla 19G se posune k hranici léze pod CT viděním. Prostřednictvím tohoto zavaděče se posune 20G jádrová bioptická jehla a provede se 3–6 biopsií. Po zákroku se provede další CT sken, aby se vyhodnotily případné bezprostřední komplikace a pacient je převezen do zotavovací místnosti na 2 hodiny pozorování. Před propuštěním se provede rentgen hrudníku, aby se vyhodnotil možný pneumotorax nebo krvácení.

Využití fluoresceinu v plicní medicíně bylo popsáno v CLM pomocí bronchoskopu. Protokol spočívá v injekci 10 ml 0,25% roztoku fluoresceinu sodného žilním katetrem a okamžitém propláchnutí 10 ml 0,9% fyziologického roztoku. To se liší od oftalmologických nebo gastroenterologických protokolů jako použití zředěného roztoku. Zobrazování může začít 1 minutu po injekci a trvat až 10 minut. Od použití fluoresceinu očekáváme nižší vedlejší účinky, než jaké jsou popsány u retinální angiografie. Fluorescein barví mikrovaskulaturu, extracelulární matrix a cytoplazmatickou složku (ale ne buněčná jádra) epitelu a difunduje přes kapiláry do extravaskulárních prostor. CLM s fluoresceinem lze použít k diagnostice neoplazie tím, že se objeví abnormální cévy (zvýšená velikost a arborizace). Může být také diagnostikován zvýšený únik v důsledku neovaskularizace. Rychlé cytologické vyšetření na místě (ROSE) bude standardem kvality biopsie.