Fattibilità della microscopia laser confocale (CLM) nella biopsia con ago guidata da tomografia computerizzata di lesioni polmonari e mediastiniche

L'agobiopsia TC guidata (TTNB - transthoracic needle biopsy) delle lesioni polmonari è una tecnica diagnostica ben consolidata in pneumologia. È più adatto per lesioni polmonari periferiche con un diametro superiore a 2 cm e per la diagnosi di una massa mediastinica. In queste situazioni la resa della diagnosi può arrivare fino al 90%. Tuttavia in lesioni più piccole o "non omogenee" (come per l'imaging TC) la resa si riduce solo al 60%. Poiché di solito non esiste un esame patologico rapido del campione (ROSE) vengono eseguiti numerosi tentativi (passaggi) per ricevere un esame campione di buona qualità. Il tasso di complicanze del TTNB (pneumotorace o sanguinamento) è relativamente alto (rispettivamente fino al 15% e al 5%). La necrosi è una caratteristica comune dei tumori a crescita rapida e può compromettere in modo significativo la diagnosi istopatologica e quindi ridurre la resa di TTNB. L'ottimizzazione della posizione dell'ago in un'area di tessuto vitale della lesione è fondamentale per migliorare la resa della tecnica TTNB.

CLM è una tecnica emergente in cui un laser a bassa potenza eccita l'autofluorescenza o la fluorescenza indotta (per via endovenosa. somministrazione) di tessuti. . Il CLM è in grado di fornire all'esaminatore immagini tissutali di qualità quasi istopatologica che fungono da "biopsia ottica". La tecnica è ben consolidata in dermatologia e gastroenterologia (tramite endoscopi) e serve a distinguere le anomalie cellulari nei disturbi infiammatori, precancerosi e maligni. Recentemente sono state descritte applicazioni polmonari che consentono la visione alveolare in tempo reale (alveoscopia). Sebbene utilizzato attraverso il canale di lavoro di diversi endoscopi, è denominato sonda CLE (endomicroscopia laser confocale sonda).

L'endomicroscopia laser confocale basata su ago (nCLE) è stata studiata nella diagnostica delle masse pancreatiche e dei linfonodi celiaci/mediastinici. Una sonda CLE è stata introdotta attraverso una biopsia con ago 19 G mediante guida endoscopica nella lesione. L'imaging è iniziato dopo la somministrazione endovenosa di fluoresceina. I risultati preliminari hanno mostrato una buona qualità dell'imaging e anche un notevole valore predittivo positivo dei dettagli delle immagini nel tessuto normale rispetto a quello malato.

La sonda CLM ha un diametro di 0,85 mm e può essere introdotta attraverso un ago per biopsia trans toracica da 19 G sostituendo il mandrino. Il suo campo visivo è di 320 µm, risoluzione laterale 3,5 µm, profondità di 50 µm e lunghezza di 4 m. il TTNB sarà eseguito secondo il protocollo standard presso il Dipartimento di Radiologia Interventistica di Sheba, a seguito della somministrazione endovenosa di fluoresceina. Questo protocollo è descritto ulteriormente.

Dopo aver ricevuto il consenso, il paziente si sdraia sul tavolo CT e la pelle sopra la lesione toracica viene pulita e drappeggiata nel solito modo sterile. L'anestesia locale viene erogata con lidocaina al 2% sulla pelle e sulla pleura e un ago introduttore 19G viene fatto avanzare fino al bordo della lesione sotto visione TC. Tramite questo introduttore viene avanzato un ago per biopsia del nucleo da 20 G e vengono eseguite 3-6 biopsie. Dopo la procedura viene eseguita un'altra TAC per valutare eventuali complicazioni immediate e il paziente viene trasferito in una sala di risveglio per 2 ore di osservazione. Prima della dimissione viene eseguita una radiografia del torace per valutare un possibile pneumotorace o sanguinamento.

L'uso della fluoresceina in pneumologia è stato descritto in CLM tramite broncoscopio. Il protocollo consiste nell'iniezione di 10 ml di soluzione di fluoresceina sodica allo 0,25% attraverso un catetere venoso e risciacquo immediato con 10 ml di soluzione fisiologica allo 0,9%. Ciò differisce dai protocolli oftalmologici o gastroenterologici in quanto si utilizza una soluzione diluita. L'imaging può iniziare 1 minuto dopo l'iniezione e durare fino a 10 minuti. Ci aspettiamo effetti collaterali inferiori dall'uso di fluoresceina come quelli descritti nell'angiografia retinica. La fluoresceina colora la microvascolarizzazione, la matrice extracellulare e la componente citoplasmatica (ma non i nuclei cellulari) dell'epitelio e si diffonde attraverso i capillari negli spazi extravascolari. Il CLM con fluoresceina può essere utilizzato per diagnosticare la neoplasia presentando vasi anomali (aumento delle dimensioni e arborizzazione). Può anche essere diagnosticata una maggiore perdita dovuta a neovascolarizzazione. L'esame citologico rapido in loco (ROSE) sarà lo standard per la qualità della biopsia.