Účinky obezity na hladiny 8-hydroxy-deoxyguanosinu u pacientů s parodontálním onemocněním a bez něj

Účelem této studie bylo prozkoumat účinky obezity na hladiny 8-Hydroxy-deoxyguanosinu (8-OHdG) v tělesných tekutinách pacientů s onemocněním parodontu a bez něj a vyhodnotit změny po počáteční léčbě parodontu.

Diagnostikovaní jako obézní (n=45) a jedinci s normální hmotností (n=45) byli zařazeni do kategorií; chronická parodontitida (CP), gingivitida (G) a periodontálně zdravé kontroly (CTRL). Gingivální štěrbinová tekutina (GCF), plazma, vzorky slin a klinická měření byly získány na začátku a měsíc po počáteční periodontální léčbě.

Nestimulované vzorky slin byly odebrány pomocí standardních technik. Asi 2 ml celých slin byly shromážděny do zkumavek na jedno použití a okamžitě odstředěny, aby se odstranily zbytky buněk (10 000 g x 10 minut). Supernatanty (každý 50 ul) byly skladovány při -40 °C až do analýzy. Vzorky GCF byly odebrány z meziobukálního a distopalatálního místa každého zubu (stoličky, premoláry, špičáky/řezáky). Ve skupině CP byly vzorky získány od pacientů v oblastech s ≥5 mm CAL, ≥6 mm PD a ≥30% ztrátou kostní hmoty. Ve skupině s gingivitidou byly vzorky GCF získány ze zubů s BOP a bez CAL. Ve zdravé skupině byly vzorky GCF odebrány ze zubů vykazujících PD<3 mm bez CAL a BOP. Od každého pacienta bylo odebráno šest vzorků GCF. Oblast byla izolována bavlněnými smotky, byla zajištěna eliminace kontaminace slinami a mírně vysušena na vzduchu. GCF byl odebrán pomocí papírových proužků. Papírové proužky byly umístěny do štěrbiny, dokud nebyl pociťován mírný odpor (intrakrevikulární metoda) a ponechány v této poloze po dobu 30 sekund. Proužky kontaminované krví nebo slinami byly zlikvidovány. Každý vzorkovaný proužek byl umístěn do 400ul eppendorfovy centrifugační zkumavky a skladován při -40 °C až do analýzy.

Pět mililitrů žilní krve bylo odebráno z antekubitální žíly standardní metodou venepunkce. Získaný vzorek krve byl odebrán do zkumavek Vacutainer a antikoagulován EDTA. Vzorky krve pak byly skladovány při -40 °C, dokud nebyly nutné pro použití v testech ELISA.

Analýza síly ukázala, že 12 jedinců pro každou skupinu by stačilo k dosažení 80% síly k detekci rozdílu 0,05 mezi alternativní a nulovou hypotézou.

Test Shapiro Wilk byl použit ke zkoumání, zda data byla nebo nebyla normálně distribuována. Spojité proměnné s nestejnými rozptyly byly porovnány pomocí Welchova a Tamhaneova T2 post-hoc testu pro BMI, PD, CAL a hladiny 8-OHdG. Porovnání věku, GI, PI a BOP bylo analyzováno pomocí Kruskal-Wallisova neparametrického testu následovaného post hoc skupinovým srovnáním s Bonferroniho upraveným Mann-Whitney U testem. K porovnání měření ve dvou bodech (základní a po SRP) byl použit párový Studentův t-test nebo Wilcoxonův rank-sum test. Ke zjištění vztahu mezi biochemickými a klinickými nálezy byl také použit Spearmanův test korelace pořadí.