Povrchový receptor neutrofilů IL-5 v plicní tekutině a periferní krvi u dětí s astmatem (NAIL-5)
Vzor zánětu dolních cest dýchacích u astmatu je heterogenní, ale u mnoha pacientů je polymorfonukleární neutrofil (PMN) převládajícím granulocytem infiltrujícím vzdušné prostory. Ačkoli je známo, že má důležitou funkci v přirozené imunitní obraně, role PMN u astmatu nebyla dobře objasněna. V průběhu práce výzkumníci identifikovali receptor pro IL-5 na povrchu PMN bronchoalveolární laváže (BAL) u podskupiny dětí s těžkým astmatem rezistentním na léčbu, což je vlastnost, která se nenachází u neutrofilů periferní krve. Zatímco funkce tohoto receptoru IL-5 musí být ještě stanovena, předběžné důkazy silně podporují mechanismus spojující neutrofilní zánět se zánětem typu 2 v dolních cestách dýchacích dětí s astmatem, což je objev, který má vzrušující potenciál modifikovat léčbu astmatu.
Primárním cílem této observační průřezové studie je otestovat celkovou hypotézu, že terapeutická intervence zaměřená proti IL-5R na plicní PMN sníží zánět a zlepší klinické výsledky u pacientů se špatně kontrolovaným astmatem. Sekundárním cílem studie je prokázat, že exprese IL-5R na PMN infiltrujících do plic je funkční, bude aktivovat známé signální dráhy indukované IL-5R a povede ke zvýšené prozánětlivé aktivitě PMN včetně zvýšeného náboru PMN, prodlouženého přežití, degranulace a uvolňování reaktivních forem kyslíku.
Přehled studie
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
Virginia
-
Charlottesville, Virginia, Spojené státy, 22908
- University of Virginia Health System
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Věk 0-17
- Rezistentní na léčbu, rezistentní respirační příznaky
- Plánováno na klinickou diagnostickou bronchoskopii
Kritéria vyloučení:
- Známá infekce dolních cest dýchacích do 60 dnů od plánované bronchoskopie
- Systémové poruchy zahrnující srdce, dýchací systém, CNS, ledviny a endokrinní systém
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Astmatici
0-5 let: Intermitentní kašel, sípání, symptomy na hrudi A jeden nebo více z následujících: Ekzém Eozinofilie Zvýšené celkové IgE Pozitivní rodinná anamnéza 6-17 let: Diagnóza lékaře Současná léčba jedním nebo více léky na astma Opakované epizody kašle, sípání, nepříjemných pocitů na hrudi, bolesti |
Pro klinické indikace bude provedena diagnostická bronchoskopie u dětí odeslaných do Dětské nemocnice University of Virginia za účelem vyhodnocení respiračních symptomů.
|
|
Neastmatické kontroly podobné věku
Věkově podobné kontroly podstoupí diagnostickou bronchoskopii pro klinické indikace v nepřítomnosti známého astmatu, včetně rekurentní pneumonie, vrozených plicních anomálií, prodlouženého kašle, podezření na laryngeální abnormality a suspektní syndromy aspirace.
Zařazení do konečného souboru, který bude určen po proceduře na základě profilů granulocytů BAL.
Aby byli účastníci zahrnuti jako kontrola, musí mít počet pauci-granulárních BAL (méně než 2 procenta eozinofilů a méně než 4 procenta PMN), žádnou pozitivní senzibilizaci na alergeny a žádné pozitivní virové nebo bakteriální studie z analýzy tekutiny BAL.
|
Pro klinické indikace bude provedena diagnostická bronchoskopie u dětí odeslaných do Dětské nemocnice University of Virginia za účelem vyhodnocení respiračních symptomů.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Procento neutrofilů nesoucích povrchové markery pro IL-5 receptor
Časové okno: 6+ měsíců po bronchoskopii
|
Procento neutrofilů, které nesou povrchové markery pro IL5-R v plicní tekutině a periferní krvi, bude porovnáno u dětí s různými fenotypy astmatu.
|
6+ měsíců po bronchoskopii
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
In vitro analýza funkce IL-5 receptoru (IL-5 R): Signalizace prostřednictvím IL-5 R zobrazená na neutrofilech z BAL (a v případě potřeby periferní krve) po navázání ligandu (IL-5)
Časové okno: 48-72 hodin po bronchoskopii
|
Toto měření vyhodnotí fosforylaci STAT 5 a současně fosforylaci AKT (jako náhradu aktivace PI 3 kinázy) po ošetření neutrofilů IL-5 (tj.
zapojení IL-5 R).
Zapojení receptoru GM-CSF na neutrofily jeho ligandem bude sloužit jako kontrola schopnosti neutrofilů podstoupit přenos signálu v reakci na ligandy.
Další kontrolou bude aktivace (fosforylace) STAT 5 na eosinofilech reagujících na IL-5 (tj. zapojení IL-5 R).
Tato analýza bude provedena pomocí průtokové cytometrie pro vyhodnocení fosforylace uvedených signálních meziproduktů.
Tato analýza určí, zda je IL-5R na neutrofilech BAL funkční (tj.
schopné přenášet signál po navázání ligandu).
|
48-72 hodin po bronchoskopii
|
|
Měření degranulace neutrofilů a produkce zánětlivých mediátorů po vazbě IL-5 na jeho receptor na neutrofilech izolovaných z BAL
Časové okno: 48-72 hodin po bronchoskopii
|
Aktivace neutrofilů vyhodnotí produkci specifických cytokinů (např.
TNFa) a chemokiny (např.
CXCL 10), stejně jako uvolňování obsahu granulí (např.
lysozym a proteázy) po zapojení IL-5R.
Tyto funkce budou hodnoceny testem ELISA.
Analýza tohoto parametru objasní, zda signalizace prostřednictvím IL-5R vede ke klasické aktivaci IL-5R pozitivních neutrofilů, jejímž výsledkem je zesílené poškození a zánět.
|
48-72 hodin po bronchoskopii
|
|
Produkce druhů reaktivního kyslíku po zapojení IL-5 R
Časové okno: 48-72 hodin po bronchoskopii
|
Druhy reaktivního kyslíku vyhodnotí tvorbu ROS neutrofily po zapojení IL-5 R do neutrofilů BAL (a případně neutrofilů izolovaných z periferní krve).
Tato analýza bude provedena pomocí kolorimetrické analýzy změny barvy neutrofilů vystavených barvivu citlivému na ROS.
Tato analýza určí, zda expozice IL-5 vede k produkci ROS neutrofily a v důsledku toho k potenciálnímu zvýšenému poškození tkáně plic.
|
48-72 hodin po bronchoskopii
|
|
Měření přežití neutrofilů v kultuře po zapojení IL-5R in vitro
Časové okno: 48-72 hodin po bronchoskopii
|
Přežití neutrofilů bude analyzovat přežití v kultuře neutrofilů izolovaných z BAL po expozici IL-5 in vitro.
Apoptóza neutrofilů v průběhu času v kultuře bude hodnocena průtokovou cytometrií.
Tato analýza určí, zda expozice plicních neutrofilů IL-5 zvýší jejich přežití, a tedy potenciál neutrofilů aktivovaných v reakci na IL-5 podporovat zvýšený zánět a poranění.
|
48-72 hodin po bronchoskopii
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: William G Teague, MD, University of Virginia
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhad)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- NAIL-5
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .