Tüdőfolyadék és perifériás vér Neutrophil IL-5 felszíni receptor asztmás gyermekeknél (NAIL-5)
Asztmában az alsó légúti gyulladás mintázata heterogén, de sok betegnél a polimorfonukleáris neutrofil (PMN) a domináns granulocita, amely beszivárog a légterekbe. Bár ismert, hogy fontos szerepe van a veleszületett immunvédelemben, a PMN szerepe az asztmában nem teljesen tisztázott. Folyamatban lévő munka során a kutatók azonosították az IL-5 receptort a bronchoalveolaris lavage (BAL) PMN-ek felszínén súlyos, kezelésre rezisztens asztmában szenvedő gyermekek egy részében, amely jellemző nem található meg a perifériás vér neutrofiljeiben. Noha ennek az IL-5-receptornak a funkcióját még nem határozták meg, az előzetes bizonyítékok erősen alátámasztják azt a mechanizmust, amely összekapcsolja a neutrofil és a 2-es típusú gyulladást az asztmában szenvedő gyermekek alsó légutaiban, ez a felfedezés izgalmas lehetőségeket rejt magában az asztma kezelésének módosításában.
Ennek a megfigyeléses keresztmetszeti vizsgálatnak az elsődleges célja annak az általános hipotézisnek a tesztelése, hogy az IL-5R elleni terápiás beavatkozás a tüdő PMN-eken csökkenti a gyulladást és javítja a klinikai eredményeket rosszul kontrollált asztmában szenvedő betegeknél. A másodlagos vizsgálat célja annak bemutatása, hogy az IL-5R expressziója a tüdőbe infiltráló PMN-eken működőképes, aktiválja az ismert IL-5R által indukált jelátviteli útvonalakat, és fokozott PMN pro-inflammatorikus aktivitáshoz vezet, beleértve a fokozott PMN-rekrutációt, meghosszabbított túlélést és degranulációt. és reaktív oxigénfajták felszabadulását.
A tanulmány áttekintése
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
Virginia
-
Charlottesville, Virginia, Egyesült Államok, 22908
- University of Virginia Health System
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Mintavételi módszer
Tanulmányi populáció
Leírás
Bevételi kritériumok:
- 0-17 éves korig
- Kezelésnek ellenálló, refrakter légúti tünetek
- Klinikai diagnosztikai bronchoszkópia tervezett
Kizárási kritériumok:
- Ismert alsó légúti fertőzés a tervezett bronchoszkópia után 60 napon belül
- Szisztémás rendellenességek, amelyek a szívet, a légzőrendszert, a központi idegrendszert, a vesét és az endokrin rendszert érintik
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Asztmások
0-5 éves korig: időszakos köhögés, zihálás, mellkasi tünetek ÉS egy vagy több az alábbiak közül: Ekcéma Eosinophilia Emelkedett össz-IgE pozitív családi anamnézis 6-17 éves korig: Orvosi diagnózis Jelenlegi kezelés egy vagy több asztmagyógyszerrel Ismétlődő köhögés, zihálás, mellkasi kellemetlen érzés, fájdalom |
Diagnosztikai bronchoszkópiát végeznek klinikai indikációk miatt azoknál a gyermekeknél, akiket a Virginiai Egyetem Gyermekkórházába utalnak a légúti tünetek értékelésére.
|
|
Életkorhoz hasonló, nem asztmás kontrollok
Az életkorhoz hasonló kontrollokon diagnosztikus bronchoszkópiát végeznek klinikai indikációkra, ismert asztma hiányában, beleértve a visszatérő tüdőgyulladást, veleszületett tüdőrendellenességeket, elhúzódó köhögést, feltételezett gégerendellenességeket és feltételezett aspirációs szindrómákat.
Bevétel a végső készletbe, amelyet az eljárás után határoznak meg a BAL granulocita profilok alapján.
Ahhoz, hogy kontrollként szerepelhessenek, a résztvevőknek pauci-granuláris BAL-számmal kell rendelkezniük (kevesebb, mint 2 százalék eozinofil és kevesebb, mint 4 százalék PMN), nem kell pozitív allergén szenzibilizációt okozni, és nem kell pozitív vírus- vagy bakteriális vizsgálatot végezniük a BAL-folyadék elemzéséből.
|
Diagnosztikai bronchoszkópiát végeznek klinikai indikációk miatt azoknál a gyermekeknél, akiket a Virginiai Egyetem Gyermekkórházába utalnak a légúti tünetek értékelésére.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Az IL-5 receptor felszíni markereit hordozó neutrofilek százaléka
Időkeret: 6+ hónappal a bronchoszkópia után
|
A tüdőfolyadékban és a perifériás vérben az IL5-R felszíni markereit hordozó neutrofilek százalékos arányát összehasonlítják különböző asztma fenotípusú gyermekeknél
|
6+ hónappal a bronchoszkópia után
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Az IL-5 receptor (IL-5 R) funkciójának in vitro analízise: A ligandum (IL-5) kötődését követően a BAL-ból (és szükség esetén a perifériás vérből) származó neutrofileken megjelenő IL-5 R-en keresztül történő jelzés
Időkeret: 48-72 órával a bronchoszkópia után
|
Ez az intézkedés értékeli a STAT 5 foszforilációját és egyidejűleg az AKT foszforilációját (mint a PI 3 kináz aktiválásának helyettesítője) a neutrofilek IL-5-tel történő kezelését követően (azaz.
IL-5 R kapcsolat).
A neutrofilek GM-CSF receptorának liganduma általi bekapcsolása a neutrofilek azon képességét szabályozza, hogy ligandumokra adott válaszként jelátvitelt végezzenek.
További szabályozás a STAT 5 aktiválása (foszforilációja) az IL-5-re reagáló eozinofileken (vagyis az IL-5 R kapcsolódás).
Ezt az elemzést áramlási citometriával kell elvégezni a jelzett jelátviteli intermedierek foszforilációjának értékelésére.
Ez az elemzés megállapítja, hogy a BAL neutrofileken lévő IL-5 R működőképes-e (pl.
képes jelátvitelre a ligandumkötést követően).
|
48-72 órával a bronchoszkópia után
|
|
A neutrofil degranuláció és a gyulladásos mediátor termelés mérése az IL-5 receptorához való kötődését követően a BAL-ból izolált neutrofileken
Időkeret: 48-72 órával a bronchoszkópia után
|
A neutrofilek aktiválása felméri a specifikus citokinek termelését (pl.
TNFa) és kemokinek (pl.
CXCL 10), valamint a granulátum tartalmának felszabadítása (pl.
lizozim és proteázok) az IL-5 R kapcsolódást követően.
Ezeket a funkciókat ELISA-val értékeljük.
Ennek a paraméternek az elemzése megvilágítja, hogy az IL-5 R-en keresztüli jelátvitel az IL-5 R pozitív neutrofilek klasszikus aktiválását eredményezi-e, ami fokozott sérülést és gyulladást eredményez.
|
48-72 órával a bronchoszkópia után
|
|
Reaktív oxigénfajták előállítása az IL-5 R bekapcsolását követően
Időkeret: 48-72 órával a bronchoszkópia után
|
A reaktív oxigénfajok értékelik a neutrofilek ROS-termelését az IL-5 R BAL-neutrofilekben (és adott esetben a perifériás vérből izolált neutrofilekben) való részvételét követően.
Ezt az elemzést a ROS-érzékeny festéknek kitett neutrofilek színváltozásának kolorimetriás elemzésével végezzük.
Ez az elemzés meghatározza, hogy az IL-5-nek való kitettség a neutrofilek ROS-termelését eredményezi-e, és ennek következtében a tüdő fokozott szövetkárosodásának lehetőségét.
|
48-72 órával a bronchoszkópia után
|
|
A neutrofil túlélés mérése tenyészetben IL-5 R kötődés hatására in vitro
Időkeret: 48-72 órával a bronchoszkópia után
|
A neutrofil túlélés elemzi a BAL-ból izolált neutrofilek tenyészetében való túlélését az IL-5-tel való in vitro expozíciót követően.
A neutrofilek apoptózisát idővel a tenyészetben áramlási citometriával értékeljük.
Ez az elemzés meghatározza, hogy a tüdő neutrofilek IL-5-nek való kitettsége fokozza-e túlélésüket, és ezáltal az IL-5 hatására aktiválódó neutrofilek azon képességét, hogy elősegítsék a fokozott gyulladást és sérülést.
|
48-72 órával a bronchoszkópia után
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: William G Teague, MD, University of Virginia
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Becslés)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- NAIL-5
Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)
Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .