Легочная жидкость и поверхностный рецептор нейтрофильного IL-5 периферической крови у детей с астмой (NAIL-5)
Характер воспаления нижних дыхательных путей при астме неоднороден, но у многих пациентов полиморфно-ядерные нейтрофилы (ПЯН) являются преобладающими гранулоцитами, инфильтрирующими дыхательные пути. Хотя известно, что он играет важную роль во врожденной иммунной защите, роль PMN в развитии астмы изучена недостаточно. В ходе работы исследователи идентифицировали рецептор ИЛ-5 на поверхности ПЯЛ бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) у детей с тяжелой, резистентной к лечению астмой, которая не обнаруживается в нейтрофилах периферической крови. Хотя функцию этого рецептора IL-5 еще предстоит определить, предварительные данные убедительно подтверждают механизм, связывающий нейтрофильное воспаление с типом 2 в нижних дыхательных путях у детей с астмой, открытие, которое может изменить лечение астмы.
Основная цель этого обсервационного перекрестного исследования состоит в том, чтобы проверить общую гипотезу о том, что терапевтическое вмешательство, направленное против IL-5R на PMN легких, уменьшит воспаление и улучшит клинические исходы у пациентов с плохо контролируемой астмой. Вторичная цель исследования состоит в том, чтобы продемонстрировать, что экспрессия IL-5R на ПЯЛ, инфильтрирующих легкие, является функциональной, будет активировать известные сигнальные пути, индуцированные IL-5R, и приведет к усилению провоспалительной активности ПЯН, включая усиленное рекрутирование ПЯЛ, пролонгированное выживание, дегрануляцию. , и высвобождение активных форм кислорода.
Обзор исследования
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
Virginia
-
Charlottesville, Virginia, Соединенные Штаты, 22908
- University of Virginia Health System
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Возраст 0–17 лет
- Резистентные к лечению, рефрактерные респираторные симптомы
- Назначена клиническая диагностическая бронхоскопия.
Критерий исключения:
- Известные инфекции нижних дыхательных путей в течение 60 дней после запланированной бронхоскопии
- Системные нарушения, вовлекающие сердце, дыхательную систему, ЦНС, почечную и эндокринную системы.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Астматики
0–5 лет: периодический кашель, хрипы, симптомы со стороны грудной клетки И один или несколько из следующих признаков: экзема, эозинофилия, повышенный уровень общего IgE, положительный семейный анамнез. 6–17 лет: диагноз врача Текущее лечение одним или несколькими препаратами от астмы Повторяющиеся эпизоды кашля, хрипов, дискомфорта в груди, боли |
Диагностическая бронхоскопия будет проводиться по клиническим показаниям у детей, направленных в Детскую больницу Университета Вирджинии для оценки респираторных симптомов.
|
|
Возрастные неастматические контроли
Контрольная группа того же возраста будет подвергнута диагностической бронхоскопии по клиническим показаниям при отсутствии известной астмы, включая рецидивирующую пневмонию, врожденные аномалии легких, длительный кашель, подозрение на аномалии гортани и подозрение на аспирационные синдромы.
Включение в окончательный набор будет определено после процедуры на основе профилей гранулоцитов БАЛ.
Чтобы быть включенными в качестве контроля, участники должны иметь малозернистый подсчет БАЛ (менее 2 процентов эозинофилов и менее 4 процентов ПЯЛ), отсутствие положительной сенсибилизации аллергенами и отсутствие положительных результатов вирусных или бактериальных исследований при анализе жидкости БАЛ.
|
Диагностическая бронхоскопия будет проводиться по клиническим показаниям у детей, направленных в Детскую больницу Университета Вирджинии для оценки респираторных симптомов.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Процент нейтрофилов, несущих поверхностные маркеры для рецептора IL-5
Временное ограничение: 6+ месяцев после бронхоскопии
|
Процент нейтрофилов, несущих поверхностные маркеры IL5-R, в легочной жидкости и периферической крови будет сравниваться у детей с различными фенотипами астмы.
|
6+ месяцев после бронхоскопии
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Анализ in vitro функции рецептора IL-5 (IL-5 R): передача сигналов через IL-5 R, отображаемый на нейтрофилах из БАЛ (и, при необходимости, в периферической крови) после связывания лиганда (IL-5).
Временное ограничение: 48-72 часа после бронхоскопии
|
Эта мера позволит оценить фосфорилирование STAT 5 и одновременное фосфорилирование AKT (как заменитель активации киназы PI 3) после обработки нейтрофилов IL-5 (т.е.
помолвка Ил-5 Р).
Взаимодействие рецептора GM-CSF с нейтрофилами его лигандом будет служить контролем способности нейтрофилов подвергаться передаче сигнала в ответ на лиганды.
Дополнительным контролем будет активация (фосфорилирование) STAT 5 на эозинофилах, отвечающих на IL-5 (т.е. участие IL-5 R).
Этот анализ будет проводиться с использованием проточной цитометрии для оценки фосфорилирования указанных сигнальных промежуточных соединений.
Этот анализ установит, является ли IL-5 R на нейтрофилах БАЛ функциональным (т.е.
способны передавать сигнал после связывания лиганда).
|
48-72 часа после бронхоскопии
|
|
Измерение дегрануляции нейтрофилов и продукции медиатора воспаления после связывания ИЛ-5 с его рецептором на нейтрофилах, выделенных из БАЛ
Временное ограничение: 48-72 часа после бронхоскопии
|
Активация нейтрофилов будет оценивать выработку специфических цитокинов (например,
TNFa) и хемокины (например,
CXCL 10), а также высвобождение содержимого гранул (например,
лизоцим и протеазы) после вовлечения IL-5 R.
Эти функции будут оцениваться с помощью ELISA.
Анализ этого параметра позволит выяснить, приводит ли передача сигналов через IL-5R к классической активации IL-5R-положительных нейтрофилов, результатом чего является усиленное повреждение и воспаление.
|
48-72 часа после бронхоскопии
|
|
Производство активных форм кислорода после включения Ил-5 Р
Временное ограничение: 48-72 часа после бронхоскопии
|
Метод реактивных форм кислорода позволит оценить образование АФК нейтрофилами после взаимодействия IL-5 R с нейтрофилами БАЛ (и, при необходимости, с нейтрофилами, выделенными из периферической крови).
Этот анализ будет проводиться с использованием колориметрического анализа изменения цвета нейтрофилов, подвергшихся воздействию красителя, чувствительного к АФК.
Этот анализ определит, приводит ли воздействие IL-5 к продукции АФК нейтрофилами и, как следствие, к увеличению повреждения тканей легких.
|
48-72 часа после бронхоскопии
|
|
Измерение выживаемости нейтрофилов в культуре при вовлечении IL-5 R in vitro
Временное ограничение: 48-72 часа после бронхоскопии
|
Выживаемость нейтрофилов будет анализировать выживаемость в культуре нейтрофилов, выделенных из БАЛ, после воздействия ИЛ-5 in vitro.
Апоптоз нейтрофилов с течением времени в культуре будет оцениваться с помощью проточной цитометрии.
Этот анализ определит, будет ли воздействие ИЛ-5 на нейтрофилы легких повышать их выживаемость и, следовательно, потенциал нейтрофилов, активированных в ответ на ИЛ-5, способствовать усилению воспаления и повреждения.
|
48-72 часа после бронхоскопии
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: William G Teague, MD, University of Virginia
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- NAIL-5
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .