Keuhkoneste ja ääreisveren neutrofiili-IL-5-pintareseptori astmaa sairastavilla lapsilla (NAIL-5)
Astman alempien hengitysteiden tulehduksen malli on heterogeeninen, mutta monilla potilailla polymorfonukleaarinen neutrofiili (PMN) on hallitseva granulosyytti, joka tunkeutuu ilmatiloihin. Vaikka sillä tiedetään olevan tärkeä tehtävä synnynnäisessä immuunipuolustuksessa, PMN:n roolia astmassa ei ole hyvin selvitetty. Meneillään olevat tutkijat ovat tunnistaneet IL-5-reseptorin bronkoalveolaarisen huuhtelun (BAL) PMN:n pinnalta lapsilla, joilla on vaikea, hoidolle vastustuskykyinen astma, ominaisuus, jota ei löydy ääreisveren neutrofiileistä. Vaikka tämän IL-5-reseptorin toimintaa ei ole vielä määritetty, alustavat todisteet tukevat vahvasti mekanismia, joka yhdistää neutrofiilisen ja tyypin 2 tulehduksen astmaa sairastavien lasten alempien hengitysteihin, löytöllä, jolla on jännittäviä mahdollisuuksia muuttaa astman hoitoa.
Tämän havainnollisen poikkileikkaustutkimuksen ensisijainen tavoite on testata yleishypoteesia, että IL-5R:ää vastaan suunnattu terapeuttinen interventio keuhkojen PMN-soluissa vähentää tulehdusta ja parantaa kliinisiä tuloksia potilailla, joilla on huonosti hallinnassa oleva astma. Toissijaisena tutkimuksen tavoitteena on osoittaa, että IL-5R:n ilmentyminen keuhkoihin infiltroivissa PMN:issä on toimivaa, aktivoi tunnettuja IL-5R:n indusoimia signalointireittejä ja johtaa lisääntyneeseen PMN:n pro-inflammatoriseen aktiivisuuteen, mukaan lukien lisääntynyt PMN:n rekrytointi, pidempi eloonjääminen, degranulaatio. ja reaktiivisten happilajien vapautuminen.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Virginia
-
Charlottesville, Virginia, Yhdysvallat, 22908
- University of Virginia Health System
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Ikäraja 0-17
- Hoitoresistentit, tulenkestävät hengitystieoireet
- Suunniteltu kliiniseen diagnostiseen bronkoskopiaan
Poissulkemiskriteerit:
- Tunnettu alempien hengitysteiden infektio 60 päivän kuluessa suunnitellusta bronkoskopiasta
- Systeemiset häiriöt, jotka koskevat sydäntä, hengityselimiä, keskushermostoa, munuaisia ja hormonitoimintaa
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Astmaatikko
0-5-vuotiaat: ajoittainen yskä, hengityksen vinkuminen, rintaoireet JA yksi tai useampi seuraavista: Ekseema Eosinofilia Kohonnut kokonais-IgE-positiivinen sukuhistoria 6-17-vuotiaat: Lääkärin diagnoosi Nykyinen hoito yhdellä tai useammalla astmalääkkeellä Toistuvat yskä, hengityksen vinkuminen, rintakipu, kipu |
Diagnostinen bronkoskoopia tehdään kliinisiä indikaatioita varten lapsille, jotka lähetetään Virginian yliopiston lastensairaalaan hengitystieoireiden arvioimiseksi
|
|
Ikäkohtaiset Ei-astmaattiset kontrollit
Ikäkohtaisille kontrolleille tehdään diagnostinen bronkoskopia kliinisten indikaatioiden varalta, jos astmaa ei ole tiedossa, mukaan lukien toistuva keuhkokuume, synnynnäiset keuhkohäiriöt, pitkittynyt yskä, epäillyt kurkunpään poikkeavuudet ja epäillyt aspiraatiooireyhtymät.
Sisällytys lopulliseen sarjaan, joka määritetään toimenpiteen jälkeen BAL-granulosyyttiprofiilien perusteella.
Jotta osallistujat voidaan sisällyttää kontrolliksi, heillä on oltava vähärakeiset BAL-määrät (alle 2 prosenttia eosinofiilejä ja alle 4 prosenttia PMN:tä), ei positiivista allergeeniherkistystä eikä positiivisia virus- tai bakteeritutkimuksia BAL-nesteen analyysistä.
|
Diagnostinen bronkoskoopia tehdään kliinisiä indikaatioita varten lapsille, jotka lähetetään Virginian yliopiston lastensairaalaan hengitystieoireiden arvioimiseksi
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Neutrofiilien prosenttiosuus, joissa on pintamarkkereita IL-5-reseptorille
Aikaikkuna: 6+ kuukautta bronkoskopian jälkeen
|
Niiden neutrofiilien prosenttiosuutta, joissa on pintamarkkereita IL5-R:lle keuhkosesteessä ja ääreisveressä, verrataan lapsilla, joilla on erilaisia astmafenotyyppejä.
|
6+ kuukautta bronkoskopian jälkeen
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
IL-5-reseptorin (IL-5 R) toiminnan in vitro -analyysi: Signalointi IL-5 R:n kautta, joka näkyy neutrofiileissä BAL:sta (ja tarvittaessa perifeerisestä verestä) ligandin (IL-5) sitoutumisen jälkeen
Aikaikkuna: 48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
Tämä mittaus arvioi STAT 5:n fosforylaation ja samanaikaisesti AKT:n fosforylaation (korvikkeena PI3-kinaasin aktivaatiolle) sen jälkeen, kun neutrofiilejä on käsitelty IL-5:llä (ts.
IL-5 R sitoutuminen).
GM-CSF-reseptorin sitoutuminen neutrofiileihin sen ligandin toimesta toimii kontrollina neutrofiilien kyvylle käydä läpi signaalin transduktio vasteena ligandeille.
Lisäkontrollina on STAT 5:n aktivointi (fosforylaatio) eosinofiileillä, jotka reagoivat IL-5:een (eli IL-5 R:n sitoutuminen).
Tämä analyysi suoritetaan käyttämällä virtaussytometriaa osoitettujen signalointivälituotteiden fosforylaation arvioimiseksi.
Tämä analyysi määrittää, onko BAL-neutrofiilien IL-5 R toimiva (ts.
kykenevä välittämään signaalin ligandin sitoutumisen jälkeen).
|
48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
|
Neutrofiilien degranulaation ja tulehduksellisen välittäjän tuotannon mittaus sen jälkeen, kun IL-5 on sitoutunut reseptoriinsa BAL:sta eristetyissä neutrofiileissä
Aikaikkuna: 48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
Neutrofiilien aktivaatio arvioi spesifisten sytokiinien tuotannon (esim.
TNFa) ja kemokiinit (esim.
CXCL 10) sekä rakeiden sisällön vapautuminen (esim.
lysotsyymi ja proteaasit) IL-5 R:n sitoutumisen jälkeen.
Nämä toiminnot arvioidaan ELISA:lla.
Tämän parametrin analyysi selvittää, johtaako IL-5R:n kautta tapahtuva signalointi IL-5R-positiivisten neutrofiilien klassiseen aktivaatioon, jonka seurauksena on lisääntynyt vaurio ja tulehdus.
|
48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
|
Reaktiivisten happilajien tuotanto IL-5 R:n kytkemisen jälkeen
Aikaikkuna: 48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
Reaktiiviset happilajit arvioivat neutrofiilien ROS-muodostuksen sen jälkeen, kun IL-5 R on sitoutunut BAL-neutrofiileihin (ja tarvittaessa perifeerisestä verestä eristettyihin neutrofiileihin).
Tämä analyysi suoritetaan käyttämällä ROS-herkälle väriaineelle altistuneiden neutrofiilien värinmuutoksen kolorimetristä analyysiä.
Tämä analyysi määrittää, johtaako altistuminen IL-5:lle neutrofiilien ROS-tuotantoon ja sen seurauksena mahdolliseen lisääntyneeseen kudosvaurioon keuhkoissa.
|
48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
|
Neutrofiilien eloonjäämisen mittaaminen viljelmässä IL-5 R:n sitoutuessa in vitro
Aikaikkuna: 48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
Neutrofiilien eloonjääminen analysoi BAL:sta eristettyjen neutrofiilien eloonjäämisen viljelmässä IL-5:lle altistuksen jälkeen in vitro.
Neutrofiilien apoptoosi ajan kuluessa viljelmässä arvioidaan virtaussytometrialla.
Tämä analyysi määrittää, parantaako keuhkojen neutrofiilien altistuminen IL-5:lle niiden eloonjäämistä ja siten IL-5:lle vasteena aktivoitujen neutrofiilien potentiaalia edistää lisääntynyttä tulehdusta ja vauriota.
|
48-72 tuntia bronkoskopian jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: William G Teague, MD, University of Virginia
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- NAIL-5
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .