Płyn płucny i neutrofil we krwi obwodowej Receptor powierzchniowy IL-5 u dzieci z astmą (NAIL-5)
Schemat zapalenia dolnych dróg oddechowych w astmie jest niejednorodny, ale u wielu pacjentów neutrofil wielojądrzasty (PMN) jest dominującym granulocytem naciekającym przestrzenie powietrzne. Chociaż wiadomo, że pełni ważną funkcję we wrodzonej obronie immunologicznej, rola PMN w astmie nie została dobrze wyjaśniona. W toku prac badacze zidentyfikowali receptor dla IL-5 na powierzchni PMN popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych (BAL) u podgrupy dzieci z ciężką, oporną na leczenie astmą, której cecha nie występuje w neutrofilach krwi obwodowej. Chociaż funkcja tego receptora IL-5 nie została jeszcze określona, wstępne dowody silnie potwierdzają mechanizm łączący zapalenie neutrofilowe z zapaleniem typu 2 w dolnych drogach oddechowych u dzieci chorych na astmę, odkrycie, które ma ekscytujący potencjał modyfikacji leczenia astmy.
Głównym celem tego przekrojowego badania obserwacyjnego jest sprawdzenie ogólnej hipotezy, że interwencja terapeutyczna skierowana przeciwko IL-5R na PMN płuc zmniejszy stan zapalny i poprawi wyniki kliniczne u pacjentów ze źle kontrolowaną astmą. Drugim celem badania jest wykazanie, że ekspresja IL-5R na PMN naciekających płuca jest funkcjonalna, aktywuje znane szlaki sygnałowe indukowane przez IL-5R i doprowadzi do zwiększonej aktywności prozapalnej PMN, w tym zwiększonej rekrutacji PMN, przedłużonego przeżycia, degranulacji i uwalnianie reaktywnych form tlenu.
Przegląd badań
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
Virginia
-
Charlottesville, Virginia, Stany Zjednoczone, 22908
- University of Virginia Health System
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Wiek 0-17 lat
- Oporne na leczenie, oporne objawy ze strony układu oddechowego
- Zaplanowany na kliniczną diagnostyczną bronchoskopię
Kryteria wyłączenia:
- Znana infekcja dolnych dróg oddechowych w ciągu 60 dni od zaplanowanej bronchoskopii
- Zaburzenia ogólnoustrojowe obejmujące serce, układ oddechowy, ośrodkowy układ nerwowy, nerki i układ hormonalny
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Astmatycy
0-5 lat: Przerywany kaszel, świszczący oddech, objawy ze strony klatki piersiowej ORAZ jedno lub więcej z następujących: Wyprysk Eozynofilia Podwyższone całkowite IgE Dodatni wywiad rodzinny Wiek 6-17 lat: Diagnoza lekarska Obecne leczenie jednym lub kilkoma lekami na astmę Nawracające epizody kaszlu, świszczącego oddechu, dyskomfortu w klatce piersiowej, bólu |
Diagnostyczna bronchoskopia zostanie przeprowadzona ze wskazań klinicznych u dzieci kierowanych do Szpitala Dziecięcego Uniwersytetu Wirginii w celu oceny objawów ze strony układu oddechowego
|
|
Grupa kontrolna bez astmy w podobnym wieku
Kontrole w podobnym wieku zostaną poddane diagnostycznej bronchoskopii ze wskazań klinicznych przy braku znanej astmy, w tym nawracającego zapalenia płuc, wrodzonych wad płuc, przedłużającego się kaszlu, podejrzeń nieprawidłowości krtani i podejrzeń zespołów aspiracyjnych.
Włączenie do ostatecznego zestawu do ustalenia po zabiegu na podstawie profili granulocytów BAL.
Aby zostać włączonym jako kontrola, uczestnicy muszą mieć liczbę BAL z niewielką liczbą ziarnistości (mniej niż 2% eozynofili i mniej niż 4% PMN), brak pozytywnego uczulenia na alergen i brak dodatnich wyników badań wirusowych lub bakteryjnych z analizy płynu BAL.
|
Diagnostyczna bronchoskopia zostanie przeprowadzona ze wskazań klinicznych u dzieci kierowanych do Szpitala Dziecięcego Uniwersytetu Wirginii w celu oceny objawów ze strony układu oddechowego
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Procent neutrofili niosących markery powierzchniowe dla receptora IL-5
Ramy czasowe: Ponad 6 miesięcy po bronchoskopii
|
Odsetek neutrofili, które niosą markery powierzchniowe dla IL5-R w płynie płucnym i krwi obwodowej, zostanie porównany u dzieci z różnymi fenotypami astmy
|
Ponad 6 miesięcy po bronchoskopii
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Analiza funkcji receptora IL-5 (IL-5 R) in vitro: Przekazywanie sygnałów przez IL-5 R wyświetlane na neutrofilach z BAL (i jeśli to konieczne, krwi obwodowej) po związaniu ligandu (IL-5)
Ramy czasowe: 48-72 godzin po bronchoskopii
|
Ta miara będzie oceniać fosforylację STAT 5 i jednoczesną fosforylację AKT (jako substytut aktywacji kinazy PI 3) po traktowaniu neutrofili IL-5 (tj.
zaangażowanie IL-5 R).
Zaangażowanie receptora GM-CSF na neutrofilach przez jego ligand będzie służyło jako kontrola zdolności neutrofili do ulegania transdukcji sygnału w odpowiedzi na ligandy.
Dodatkową kontrolą będzie aktywacja (fosforylacja) STAT 5 na eozynofilach odpowiadających na IL-5 (tj. zaangażowanie IL-5 R).
Ta analiza zostanie przeprowadzona przy użyciu cytometrii przepływowej w celu oceny fosforylacji wskazanych półproduktów sygnałowych.
Ta analiza pozwoli ustalić, czy IL-5 R na neutrofilach BAL jest funkcjonalny (tj.
zdolne do transdukcji sygnału po związaniu ligandu).
|
48-72 godzin po bronchoskopii
|
|
Pomiar degranulacji neutrofili i produkcji mediatora stanu zapalnego po związaniu IL-5 z jej receptorem na neutrofilach wyizolowanych z BAL
Ramy czasowe: 48-72 godzin po bronchoskopii
|
Aktywacja neutrofili pozwoli ocenić produkcję określonych cytokin (np.
TNFa) i chemokin (np.
CXCL 10) oraz uwalnianie zawartości granulek (np.
lizozym i proteazy) po zaangażowaniu IL-5R.
Funkcje te zostaną ocenione metodą ELISA.
Analiza tego parametru wyjaśni, czy przekazywanie sygnału przez IL-5R prowadzi do klasycznej aktywacji IL-5R-dodatnich neutrofili, czego wynikiem jest nasilone uszkodzenie i stan zapalny.
|
48-72 godzin po bronchoskopii
|
|
Produkcja reaktywnych form tlenu po zaangażowaniu IL-5 R
Ramy czasowe: 48-72 godzin po bronchoskopii
|
Reaktywne formy tlenu ocenią wytwarzanie RFT przez neutrofile po zaangażowaniu IL-5 R w neutrofile BAL (i, jeśli to właściwe, neutrofile wyizolowane z krwi obwodowej).
Ta analiza zostanie przeprowadzona przy użyciu analizy kolorymetrycznej zmiany koloru w neutrofilach wystawionych na działanie barwnika wrażliwego na ROS.
Ta analiza określi, czy ekspozycja na IL-5 powoduje wytwarzanie ROS przez neutrofile, aw konsekwencji możliwość zwiększonego uszkodzenia tkanki płuc.
|
48-72 godzin po bronchoskopii
|
|
Pomiar przeżywalności neutrofili w hodowli po zaangażowaniu IL-5R in vitro
Ramy czasowe: 48-72 godzin po bronchoskopii
|
Przeżywalność neutrofilów przeanalizuje przeżywalność w hodowli neutrofili wyizolowanych z BAL po ekspozycji na IL-5 in vitro.
Apoptoza neutrofili w czasie w hodowli zostanie oceniona za pomocą cytometrii przepływowej.
Ta analiza określi, czy ekspozycja neutrofili płucnych na IL-5 zwiększy ich przeżywalność, a zatem potencjał neutrofili aktywowanych w odpowiedzi na IL-5 w celu promowania nasilenia stanu zapalnego i uszkodzenia.
|
48-72 godzin po bronchoskopii
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: William G Teague, MD, University of Virginia
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Oszacować)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- NAIL-5
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .