Markery aterotrombózy u diabetiků (MADI)

Aterotrombotické plaky u pacientů s diabetem 2. typu jsou charakterizovány zvýšenou neovaskularizací a souvisejícím intraplakálním krvácením ve srovnání s nediabetickými pacienty, což by mohlo být příčinou velkého výskytu klinických komplikací. Paralelně se pacienti s diabetem typu 2 vyznačují zvýšeným intracelulárním oxidačním stresem v cirkulujících PMN, což vede k primárnímu fenotypu. Primární aktivace PMN by mohla být spuštěna prostřednictvím jejich receptoru pro pokročilé konečné produkty glykace. Glykovaný albumin může zejména aktivovat NADPH oxidázu a tak podporovat produkci reaktivních forem kyslíku. Při silné aktivaci bylo popsáno, že PMN uvolňují NET, které jsou tvořeny externalizovanými nukleozomy sdružujícími DNA, histony a enzymy původně přítomné v granulích (jako je myeloperoxidáza, matrix metaloproteináza 9 nebo elastáza). Naší hypotézou je, že u diabetických stavů by mohly být PMN aktivovány v aterotrombotických plátech a představovat tak spouštěč ruptury plátu. V této studii budeme hodnotit aktivaci PMN v karotických plakech diabetických vs nediabetických pacientů a také ve vzorcích plazmy stejných pacientů. Za tímto účelem budou do naší studie zařazeni všichni pacienti, kteří podstoupí operaci karotidy endarterektomií, a den před operací budou odebrány vzorky krve pro přípravu plazmy a séra. Odebere se vzorek z endarterektomie, vyřízne se do oblasti viníka plaku (CP) a přilehlého nekomplikovaného plaku (NCP), inkubuje se odděleně v kultivačním médiu po dobu 24 hodin při 37 °C. Výsledné upravené médium bude rozděleno na alikvoty a skladováno při -80 °C pro různá hodnocení. Reprezentativní část CP bude uložena v okamžiku disekce pro histologické hodnocení (přítomnost novotvarů/intraplakové krvácení, kalcifikace, lipidy atd.). Markery aktivace neutrofilů, intraplakového krvácení, glykace a oxidačního stresu budou kvantifikovány jak v kondicionovaném médiu, tak v plazmě.