Marcadores de aterotrombose em diabéticos (MADI)

As placas aterotrombóticas de pacientes diabéticos tipo 2 são caracterizadas por neovascularização aumentada e hemorragia intraplaca associada em relação a pacientes não diabéticos, o que pode ser responsável por uma grande incidência de complicações clínicas. Paralelamente, os pacientes diabéticos tipo 2 são caracterizados por um aumento do estresse oxidativo intracelular nos PMNs circulantes, levando a um fenótipo primário. O priming de PMN pode ser acionado por meio de seu receptor para produtos finais de glicação avançada. Em particular, a albumina glicada pode ativar a NADPH oxidase e assim promover a produção de espécies reativas de oxigênio. Sob forte ativação, os PMNs têm sido descritos como liberando NETs que são constituídos por nucleossomos externalizados associando DNA, histonas e enzimas inicialmente presentes nos grânulos (como mieloperoxidase, metaloproteinase 9 de matriz ou elastase). Nossa hipótese é que em condições diabéticas, os PMNs poderiam ser ativados dentro das placas aterotrombóticas e, assim, representar um gatilho para a ruptura da placa. No presente estudo, avaliaremos a ativação de PMN em placas carotídeas de pacientes diabéticos vs não diabéticos, bem como em amostras de plasma dos mesmos pacientes. Para tanto, todos os pacientes que serão submetidos à cirurgia carotídea por endarterectomia serão incluídos em nosso estudo e amostras de sangue serão coletadas no dia anterior à cirurgia para preparo de plasma e soro. A amostra da endarterectomia será coletada, dissecada em área culpada da placa (CP) e placa não complicada adjacente (NCP), incubadas separadamente em meio de cultura por 24h a 37°C. O meio condicionado resultante será aliquotado e armazenado a -80°C para as diferentes avaliações. Um corte representativo do CP será guardado no momento da dissecção para avaliação histológica (presença de neovasos/hemorragia intraplaca, calcificações, lipídios, etc). Marcadores de ativação de neutrófilos, de hemorragia intraplaca, de glicação e de estresse oxidativo serão quantificados em meio condicionado e plasma.