MikroRNA jako diagnostické biomarkery u hepatocelulárního karcinomu u somálských pacientů

Hepatocelulární karcinom (HCC) je nejčastější primární rakovinou jater a je třetí hlavní příčinou rakoviny související s úmrtím na celém světě. Podle toho se zátěž rakoviny v ekonomicky rozvíjejících se zemích zvyšuje v důsledku stárnutí populace a růstu spolu s rostoucí adaptací na životní styl související s rakovinou, jako je fyzická inaktivace, kouření a západní diety. Rakovina jater u žen je sedmou nejčastější diagnostikovanou rakovinou a šestou nejčastější příčinou úmrtí na rakovinu, zatímco u mužů je pátou diagnostikovanou rakovinou a druhou příčinou úmrtí na rakovinu. V roce 2008 bylo na celém světě odhadováno 748 300 nových případů rakoviny jater a 695 900 případů úmrtí. Hlavními faktory primární rakoviny jater jsou virové hepatitidy, alkohol, plísňové toxiny (aflatoxiny), potravinářské přísady, toxiny produkované průmyslovými chemikáliemi a látky znečišťující vodu a ovzduší.

Ačkoli v současnosti většina lékařů a laboratoří HCC diagnostiky využívá lékařské zobrazování, jako je ultrazvuk, MRI, CT sken a laboratorní analýzy, testy na sérové ​​nádorové markery, jako je alfa-fetoprotein (AFP), které se vyznačují velmi nízkou citlivostí při detekci HCC. Poslední dvě desetiletí se vědci zaměřili na výzkum malých molekul nazývaných MicroRNA, které jsou produkovány lidskými buňkami a mohou se uvolňovat v krvi.

MikroRNA jsou třídou (20 - 25 nukleotidů na délku) nekódujících RNA a jejich vznikajícím neinvazivním diagnostickým biomarkerem pro diagnostiku rakoviny, screening, monitorování léčby a předpovídání prognózy. Řada studií odhalila abnormální expresi lidských sérových mikroRNA v mnoha nádorech, jako je karcinom jater, slinivky břišní a kolorektální karcinom. V poslední době hrají MicroRNA roli ve vývoji HCC, ale stále není známo, zda tyto malé molekuly budou použity jako biomarkery pro diagnostiku a přežití HCC.

Účel:

1. Rozpoznat sérové ​​mikroRNA jako diagnostický nebo predikční biomarker pro hepatocelulární karcinom.
2. Korelovat s hladinou exprese mikroRNA mezi pacienty s HCC, chronickým onemocněním jater a zdravými dobrovolníky.
3. Stanovit klinickou užitečnost MicroRNA jako diagnostického výrobce hepatocelulárního karcinomu porovnáním s alfa fetoproteinem aktuálním markerem (HCC).

Metody Návrh studie: Toto je observační studie (případová kontrolní studie). Celkem 126 subjektů ve věku nad 18 let; kteří budou rozděleni do tří skupin, budou zařazeni do této studie ve specializované nemocnici Dufle; tyto skupiny jsou skupina HCC, skupina chronického onemocnění jater a skupina dobrovolníků. Diagnostikovanými kritérii skupiny HCC jsou ultrazvuk, jehož uzliny jsou větší než 5 cm, jaterní testy, virové markery a AFP. U ostatních skupin (chronické onemocnění jater a zdraví), jejichž diagnózy budou založeny na laboratorních testech, jako jsou jaterní testy, virové markery, AFP, kompletní krevní obraz (CBC), funkce ledvin a další), budou shromažďovány údaje z klinických a laboratorních analýz vnímavě Vzorky krve budou odebrány najednou, poté budou vzorky krve separovány pomocí zkumavek pro separaci séra a poté odstředěny pro získání séra a budou skladovány při -20°C před převozem ze Somálska do Ruska.

Virový marker povrchový antigen hepatitidy B (HBsAg) a protilátka proti HCV (anti-HCV) budou zkontrolovány pomocí komerčně dostupných souprav pro imunosorbentní testy s enzymatickými vazbami pro každý subjekt z těchto tří skupin.

Exprese MicroRNA bude detekována kvantitativní reverzně-transkriptázovou polymerázovou řetězovou reakcí (qRT-PCR) s lidskými soupravami TaqMan MicroRNA Assay Kit (Applied Biosystems) těchto skupin buď skupina HCC, chronické onemocnění jater a zdraví dobrovolníci. Výzkumníci definují skupiny HCC, chronického onemocnění jater a zdravých dobrovolníků s vysokou nebo nízkou expresí na základě střední hodnoty exprese každé mikroRNA.

Všechny statistické analýzy budou prováděny pomocí Statistického balíčku pro společenské vědy (SPSS) verze 20. Exprese mikroRNA mezi různými skupinami (HCC, chronická onemocnění jater a zdraví dobrovolníci) budou analyzovány pomocí SPSS.