MikroRNA jako biomarkery diagnostyczne w raku wątrobowokomórkowym wśród somalijskich pacjentów

Rak wątrobowokomórkowy (HCC) jest najczęstszym pierwotnym nowotworem wątroby i trzecią najczęstszą przyczyną nowotworów, które wiązały się ze zgonem na świecie. Zgodnie z tym obciążenie rakiem w krajach rozwijających się gospodarczo rośnie w wyniku starzenia się i wzrostu populacji, a także coraz większej adaptacji wyborów stylu życia związanych z rakiem, takich jak inaktywacje fizyczne, palenie i zachodnia dieta. Rak wątroby u kobiet jest siódmym najczęściej diagnozowanym rakiem i szóstą przyczyną zgonów z powodu raka, podczas gdy u mężczyzn jest piątym wykrywanym nowotworem i drugą przyczyną zgonów z powodu raka. W 2008 roku na całym świecie odnotowano 748 300 nowych przypadków raka wątroby i 695 900 zgonów. Wirusowe zapalenie wątroby, alkohol, toksyny grzybowe (aflatoksyny), dodatki do żywności, toksyny wytwarzane przez chemikalia przemysłowe oraz zanieczyszczenia wody i powietrza są głównymi czynnikami pierwotnego raka wątroby.

Chociaż obecnie większość lekarzy i laborantów baz diagnostycznych HCC to badania obrazowe medyczne takie jak USG, MRI, tomografia komputerowa oraz analizy laboratoryjne dla surowiczych markerów nowotworowych, takich jak alfa-fetoproteina (AFP), które charakteryzują się bardzo małą czułością w wykrywaniu HCC. W ciągu ostatnich dwóch dekad naukowcy koncentrowali się na badaniach nad małymi cząsteczkami zwanymi mikroRNA, które są wytwarzane przez ludzkie komórki i mogą być uwalniane do krwi.

MikroRNA to klasa (o długości 20-25 nukleotydów) niekodujących RNA i ich wyłaniający się nieinwazyjny biomarker diagnostyczny do diagnozowania raka, badań przesiewowych, monitorowania leczenia i przewidywania rokowania. Szereg badań ujawniło nieprawidłową ekspresję mikroRNA ludzkiej surowicy w wielu nowotworach, takich jak rak wątroby, trzustki i jelita grubego. Ostatnio mikroRNA odgrywają rolę w rozwoju HCC, ale nadal nie wiadomo, czy te małe cząsteczki zostaną wykorzystane jako biomarkery do diagnozy i przeżycia HCC.

Zamiar:

1. Rozpoznawanie mikroRNA w surowicy jako biomarkera diagnostycznego lub prognozującego raka wątrobowokomórkowego.
2. Aby skorelować z poziomem ekspresji mikroRNA między pacjentami z HCC, przewlekłą chorobą wątroby i zdrowymi ochotnikami.
3. Określenie przydatności klinicznej mikroRNA jako narzędzia diagnostycznego raka wątrobowokomórkowego w porównaniu z alfa-fetoproteiną, obecnym markerem (HCC).

Metody Projekt badania: Jest to badanie obserwacyjne (badanie kontrolne przypadku). Łącznie 126 osób w wieku powyżej 18 lat; którzy podzieleni na trzy grupy zostaną włączeni do tego badania w Szpitalu Specjalistycznym Dufle; te grupy to grupa HCC, grupa przewlekłych chorób wątroby i grupa ochotników zdrowotnych. Rozpoznanymi kryteriami grupy HCC są ultrasonografia z obecnością guzków powyżej 5 cm, próby wątrobowe, markery wirusowe i AFP. Inne grupy (przewlekłe choroby wątroby i zdrowie) diagnozy będą oparte na badaniach laboratoryjnych, takich jak (testy czynnościowe wątroby, markery wirusowe, AFP, pełna morfologia krwi (CBC), funkcje nerek i inne) dane kliniczne i analizy laboratoryjne zostaną zebrane spostrzegawczo Próbki krwi zostaną pobrane jednorazowo, następnie próbki krwi zostaną rozdzielone za pomocą probówek do oddzielania surowicy, a następnie wirówki w celu uzyskania surowicy i będą przechowywane w temperaturze -20°C przed przeniesieniem z Somalii do Rosji.

Marker wirusowy Antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg) i przeciwciało przeciwko HCV (anty-HCV) zostaną sprawdzone przy użyciu dostępnych w handlu zestawów testów immunoenzymatycznych dla każdego pacjenta z tych trzech grup.

Ekspresja mikroRNA zostanie wykryta za pomocą ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (qRT-PCR) przy użyciu zestawów TaqMan MicroRNA Assay Kits (Applied Biosystems) z tych grup, albo grupa HCC, przewlekła choroba wątroby i zdrowi ochotnicy. Badacze określą grupy HCC, przewlekłą chorobę wątroby i zdrowych ochotników z wysoką lub niską ekspresją w oparciu o medianę wartości ekspresji każdego mikroRNA.

Wszystkie analizy statystyczne będą wykonywane za pomocą Pakietu Statystycznego dla Nauk Społecznych (SPSS) wersja 20. Ekspresja mikroRNA wśród różnych grup (HCC, przewlekła choroba wątroby i zdrowi ochotnicy) zostanie przeanalizowana przez SPSS.