MikroRNS-ek mint diagnosztikai biomarkerek hepatocelluláris karcinómában szomáliai betegek körében

A hepatocelluláris karcinóma (HCC) a leggyakoribb elsődleges májrák, és a halállal összefüggő daganatok harmadik vezető oka a világon. A gazdaságilag fejlődő országokban a rák okozta terhek a népesség elöregedése és növekedése következtében növekszik, valamint a rákkal kapcsolatos életmód-választások – például a fizikai inaktiválás, a dohányzás és a nyugati étrendek – alkalmazkodásának fokozódása miatt. A nőknél a májrák a hetedik leggyakrabban diagnosztizált rák, és a hatodik a rákos halálozási okok között, míg a férfiaknál az ötödik diagnosztizált rák és a második a rákos halálozás oka. 2008-ban világszerte 748 300 új májrákos esetet, 695 900 halálesetet becsültek. A vírusos hepatitis fertőzések, az alkohol, a gombamérgek (aflatoxinok), az élelmiszer-adalékanyagok, a méreganyagok által előállított ipari vegyszerek, valamint a víz- és levegőszennyező anyagok az elsődleges májrák fő tényezői.

Bár jelenleg a legtöbb orvos és laboráns a HCC diagnózisának alapja az orvosi képalkotás, például az ultrahang, az MRI, a CT-vizsgálat és a szérumtumormarkerek, például az alfa-fetoprotein (AFP) laboratóriumi analízise, ​​amelyet nagyon alacsony érzékenységgel jellemeznek a daganatok kimutatásában. HCC. Az elmúlt két évtizedben a tudósok az emberi sejtek által termelt és a vérben felszabaduló kis molekulák, az úgynevezett mikroRNS-ek kutatására összpontosítottak.

A mikroRNS-ek a (20-25 nukleotid hosszúságú) nem kódoló RNS-ek osztályai, és ezek feltörekvő, nem invazív diagnosztikai biomarkerei a rák diagnosztizálására, szűrésére, a kezelés monitorozására és a prognózis előrejelzésére. Számos tanulmány kimutatta a humán szérum mikroRNS-ek abnormális expresszióját számos daganatban, például máj-, hasnyálmirigy- és vastagbélrákban. Az utóbbi időben a MicroRNS-ek szerepet játszanak a HCC kialakulásában, de még mindig nem ismert, hogy ezeket a kis molekulákat biomarkerként használják-e a HCC diagnosztizálására és túlélésére.

Célja:

1. A szérum mikroRNS-ek felismerése a hepatocelluláris karcinóma diagnózisa vagy előrejelzési biomarkereként.
2. Korrelálni a mikroRNS-ek expressziós szintjével HCC-s betegek, krónikus májbetegség és egészségügyi önkéntes alanyok között.
3. Meghatározni a MicroRNS-ek klinikai alkalmazhatóságát a hepatocelluláris karcinóma diagnosztikai előállítójaként, összehasonlítva a (HCC) jelenlegi markerével az alfa-fetoproteinnel.

Módszerek A vizsgálat tervezése: Ez egy megfigyeléses vizsgálat (Case Control Study). Összesen 126 alany 18 év felett; akik három csoportra osztva vesznek részt ebben a vizsgálatban a Dufle Specialist Hospital-ban; ezek a csoportok a HCC csoport, a krónikus májbetegségek csoportja és az egészségügyi önkéntesek csoportja. A HCC csoport diagnosztizált kritériumai az ultrahang, amelynek csomói 5 cm-nél nagyobbak, májfunkciós tesztek, vírusmarkerek és AFP. A többi csoport (krónikus májbetegség és egészségi állapot) a diagnózisok laboratóriumi vizsgálatokon alapulnak, mint például (májfunkciós tesztek, vírusmarkerek, AFP, teljes vérkép (CBC), vesefunkciók és mások), a klinikai és laboratóriumi elemzési adatokat gyűjtik. érzékletesen A vérmintákat egy időben gyűjtik, majd a vérmintákat szérumleválasztó csövekkel, majd centrifugákkal szétválasztják, hogy megkapják a szérumot, és -20°C-on tárolják, mielőtt Szomáliából Oroszországba szállítanák.

A vírus marker A hepatitis B felszíni antigén (HBsAg) és a HCV elleni antitest (anti-HCV) a kereskedelemben kapható enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati készletek segítségével e három csoport minden alanyánál ellenőrzésre kerül.

A MicroRNS-ek expresszióját kvantitatív reverz transzkriptáz polimeráz láncreakcióval (qRT-PCR) mutatjuk ki humán TaqMan MicroRNA Assay Kit-ekkel (Applied Biosystems) ezekből a csoportokból HCC csoport, krónikus májbetegség és egészséges önkéntesek. A kutatók az egyes mikroRNS-ek medián expressziós értéke alapján meghatározzák a HCC, a krónikus májbetegség és az egészséges önkéntesek csoportjait, akiknek magas vagy alacsony expressziója van.

Minden statisztikai elemzés a Társadalomtudományi Statisztikai Csomag (SPSS) 20-as verziójával történik. A különböző csoportok (HCC, krónikus májbetegségek és egészséges önkéntesek) közötti mikroRNS-ek expresszióját az SPSS elemzi.