MicroRNAs como biomarcadores diagnósticos em carcinoma hepatocelular entre pacientes da Somália

O carcinoma hepatocelular (CHC) é o câncer hepático primário mais comum e é a terceira causa de câncer que causa morte no mundo. De acordo com a carga de câncer em países economicamente em desenvolvimento está aumentando em resultado do envelhecimento e crescimento da população, além de aumentar a adaptação de escolhas de estilo de vida relacionadas ao câncer, como inatividade física, tabagismo e dietas ocidentais. O câncer de fígado em mulheres é o sétimo câncer diagnosticado mais comum e a sexta causa de morte por câncer, enquanto nos homens é o quinto câncer diagnosticado e a segunda causa de morte por câncer. Em 2008, foram estimados 748.300 novos casos de câncer de fígado e 695.900 mortes em todo o mundo. Infecções por hepatite viral, álcool, toxinas fúngicas (aflatoxinas), aditivos alimentares, toxinas produzidas por produtos químicos industriais e poluentes da água e do ar são os principais fatores de câncer hepático primário.

Embora, atualmente, a maioria dos médicos e laboratórios de diagnósticos de CHC sejam baseados em imagens médicas, como ultrassonografia, ressonância magnética, tomografia computadorizada e exames laboratoriais para marcadores tumorais séricos, como a alfa-fetoproteína (AFP), que se caracteriza por uma sensibilidade muito baixa na detecção de CHC. Nas últimas duas décadas, os cientistas se concentraram em pesquisas de pequenas moléculas chamadas MicroRNAs, que são produzidas por células humanas e podem ser liberadas no sangue.

MicroRNAs são uma classe de (20 - 25 nucleotídeos de comprimento) RNAs não codificantes e seu biomarcador de diagnóstico não invasivo emergente para diagnóstico de câncer, triagem, monitoramento de tratamento e previsão de prognóstico. Vários estudos expuseram uma expressão anormal de MicroRNAs séricos humanos em muitos tumores, como fígado, pâncreas e carcinoma colorretal. Recentemente, os MicroRNAs têm um papel no desenvolvimento do CHC, mas ainda não se sabe se essas pequenas moléculas serão usadas como biomarcadores para diagnóstico e sobrevida do CHC.

Propósito:

1. Reconhecer microRNAs séricos como um biomarcador de diagnóstico ou predição para carcinoma hepatocelular.
2. Correlacionar com o nível de expressão de microRNAs entre pacientes com CHC, doença hepática crônica e voluntários da saúde.
3. Determinar a utilidade clínica de MicroRNAs como um marcador de diagnóstico de carcinoma hepatocelular comparando com alfa fetoproteína o marcador atual de (HCC).

Métodos Desenho do estudo: Este é um estudo observacional (estudo de controle de caso). Um total de 126 indivíduos com idade superior a 18 anos; que divididos em três grupos serão inscritos neste estudo no Dufle Specialist Hospital; esses grupos são grupo HCC, grupo de doença hepática crônica e grupo de voluntários de saúde. Os critérios diagnosticados do grupo CHC são ultrassonografia com nódulos maiores que 5cm, testes de função hepática, marcadores virais e AFP. Nos demais grupos (doença hepática crônica e saúde) os diagnósticos serão baseados em exames laboratoriais como (testes de função hepática, marcadores virais, AFP, hemograma completo (hemograma), funções renais e outros) serão coletados os dados de análises clínicas e laboratoriais perceptivamente As amostras de sangue serão coletadas de uma só vez, depois disso as amostras de sangue serão separadas usando tubos de separação de soro e depois centrifugadas para obter o soro e serão armazenadas a -20°C antes de serem transferidas da Somália para a Rússia.

Marcador viral O antígeno de superfície da hepatite B (HBsAg) e o anticorpo para HCV (anti-HCV) serão verificados usando kits de ensaio imunoenzimático disponíveis comercialmente para cada indivíduo desses três grupos.

A expressão de MicroRNAs será detectada por reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR) com TaqMan MicroRNA Assay Kits humanos (Applied Biosystems) desses grupos, seja grupo HCC, doença hepática crônica e voluntários saudáveis. Os investigadores definirão os grupos de HCC, doença hepática crônica e voluntários saudáveis ​​com alta ou baixa expressão com base no valor de expressão mediana de cada microRNA.

Todas as análises estatísticas serão realizadas com o Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) versão 20. Expressões de microRNAs entre diferentes grupos (HCC, hepatopatas crônicos e voluntários saudáveis) serão analisadas pelo SPSS.