МикроРНК как диагностические биомаркеры при гепатоцеллюлярной карциноме у сомалийских пациентов

Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) является наиболее распространенным первичным раком печени и является третьей ведущей причиной смерти от рака во всем мире. Согласно данным, бремя рака в экономически развивающихся странах увеличивается в результате старения и роста населения в дополнение к увеличению адаптации образа жизни, связанного с раком, такого как физическая инактивация, курение и западная диета. Рак печени у женщин занимает седьмое место среди наиболее часто диагностируемых видов рака и шестое место среди причин смерти от рака, в то время как у мужчин пятое место среди диагностируемых видов рака и вторая причина смерти от рака. В 2008 году во всем мире было зарегистрировано 748 300 новых случаев рака печени, а 695 900 случаев смерти. Инфекции вирусного гепатита, алкоголь, грибковые токсины (афлатоксины), пищевые добавки, токсины промышленных химикатов и загрязнители воды и воздуха являются основными факторами первичного рака печени.

Хотя в настоящее время большинство врачей и лаборантов в основе диагностики ГЦР лежат медицинские методы визуализации, такие как УЗИ, МРТ, КТ и лабораторные анализы, тесты на сывороточные опухолевые маркеры, такие как альфа-фетопротеин (АФП), которые характеризуются очень низкой чувствительностью при выявлении ГЦК. Последние два десятилетия ученые были сосредоточены на исследованиях малых молекул, называемых микроРНК, которые вырабатываются клетками человека и могут выделяться в кровь.

МикроРНК представляют собой класс некодирующих РНК (длиной 20–25 нуклеотидов) и их новый неинвазивный диагностический биомаркер для диагностики рака, скрининга, мониторинга лечения и прогнозирования прогноза. Ряд исследований выявил аномальную экспрессию микроРНК человеческой сыворотки во многих опухолях, таких как рак печени, поджелудочной железы и колоректальный рак. В последнее время микроРНК играют роль в развитии ГЦК, но до сих пор неизвестно, будут ли эти небольшие молекулы использоваться в качестве биомаркеров для диагностики и выживания ГЦК.

Цель:

1. Распознать сывороточные микроРНК в качестве биомаркера диагностики или прогноза гепатоцеллюлярной карциномы.
2. Сопоставить уровень экспрессии микроРНК между пациентами с ГЦК, хроническими заболеваниями печени и здоровыми добровольцами.
3. Чтобы определить клиническую полезность микроРНК в качестве диагностического маркера гепатоцеллюлярной карциномы по сравнению с альфа-фетопротеином, текущим маркером (ГЦК).

Методы Дизайн исследования: Это обсервационное исследование (исследование случай-контроль). Всего 126 испытуемых в возрасте старше 18 лет; которые будут разделены на три группы, будут включены в это исследование в специализированной больнице Dufle; Этими группами являются группа ГЦК, группа хронических заболеваний печени и группа добровольцев. Критериями диагностики группы ГЦК являются ультразвуковое исследование, при котором узлы более 5 см, функциональные пробы печени, вирусные маркеры и АФП. Другие группы (хронические заболевания печени и здоровье) диагнозы будут основываться на лабораторных данных, таких как (тесты функции печени, вирусные маркеры, АФП, общий анализ крови (CBC), функции почек и другие) данные клинического и лабораторного анализа будут собраны Образцы крови будут собираться за один раз, после чего образцы крови будут разделены с помощью пробирок для разделения сыворотки, а затем центрифугированы для получения сыворотки и будут храниться при температуре -20°C перед транспортировкой из Сомали в Россию.

Вирусный маркер поверхностного антигена гепатита В (HBsAg) и антитела к ВГС (анти-ВГС) будут проверены с использованием имеющихся в продаже наборов для твердофазного иммуноферментного анализа у каждого субъекта из этих трех групп.

Экспрессия микроРНК будет определяться количественной полимеразной цепной реакцией с обратной транскриптазой (qRT-PCR) с наборами TaqMan для анализа микроРНК человека (Applied Biosystems) этих групп, либо группы HCC, хронического заболевания печени и здоровых добровольцев. Исследователи определят группы пациентов с ГЦК, хроническими заболеваниями печени и здоровых добровольцев с высокой или низкой экспрессией на основе среднего значения экспрессии каждой микроРНК.

Все статистические анализы будут проводиться с помощью Статистического пакета для социальных наук (SPSS) версии 20. Экспрессия микроРНК среди различных групп (ГЦК, хронические заболевания печени и здоровые добровольцы) будет проанализирована с помощью SPSS.