Klinické hodnocení a mikrobiologické hodnocení diodové laserové a chemické dezinfekce ve srovnání se selektivním odstraněním zubního kazu

IV. Popis výzkumné otázky (PICO Question nebo její modifikace)

Otázka PICO:

Ovlivní při léčbě pacientů s hlubokými kariézními lézemi na stálých zadních zubech použití diodového laseru s výstupním výkonem 0,5 W nebo chemická dezinfekce pomocí 2% chlorhexidinu vitalitu dřeně ve srovnání s konvenčním selektivním odstraňováním kazu bez dezinfekce?

Pacient/Problém Pacienti s hlubokými kariézními lézemi ve stálých zadních zubech

Zásah 1-Dodová laserová dezinfekce a 2- Chemická dezinfekce pomocí 2% Chlorhexidinu

Komparátor Selektivní konvenční odstranění zubního kazu bez dezinfekce

Výsledek Vitalita buničiny

Nastavení (kde bude studie provedena) Komplex zubních klinik, Misr International University a Research Unit Microbiology Lab Čas (období sledování) 3 měsíce a 6 měsíců

V. Cíl studie, výzkumné cíle a klinická relevance Cíl: cílem této studie je zhodnotit klinický výsledek (ve smyslu zachování vitality dřeně, hodnoceno testem studené pulpy, absence spontánní bolesti, citlivost na poklep, kontrola sinus nebo píštěl nebo otok a rentgenově pomocí kuželové počítačové tomografie) a antimikrobiální účinek diodového laseru a chemická dezinfekce ve srovnání s konvenčním selektivním odstraněním kazu bez dezinfekce při léčbě hlubokých kariézních lézí u stálých zadních zubů.

Výzkum nulové hypotézy:

Není žádný rozdíl mezi účinkem diodového laseru nebo chemické dezinfekce při zachování vitality dřeně ve srovnání se selektivním odstraněním zubního kazu při léčbě hlubokých kariézních lézí stálých zubů.

• Cíle studie:

  1. Porovnat účinek diodového laseru s konvenčním selektivním odstraňováním zubního kazu při zachování vitality dřeně vyjádřené jako binární proměnná (úspěch/neúspěch) a hodnocený testem studené pulpy, nepřítomností spontánní bolesti, citlivostí na poklep, prohlídkou sinusu nebo píštěle nebo otoku .
  2. Porovnat účinek chemické dezinfekce s konvenčním selektivním odstraňováním zubního kazu při zachování vitality dřeně vyjádřené jako binární proměnná (úspěch/neúspěch) a hodnocený testem studené dřeně, nepřítomností spontánní bolesti, citlivostí na poklep, prohlídkou sinusu nebo píštěle nebo otoku .
  3. Vyhodnotit tloušťku a hustotu dentinu měřenou pomocí počítačové tomografie s kuželovým svazkem (CBCT) s použitím jednotky Hounsfield, po umístění výplňového materiálu a po 6 měsících sledování.
  4. Vyhodnotit mikrobiologický počet ve všech studijních skupinách měřený počítačem kolonií za použití jednotky tvořící kolonie jako měřicí jednotky.

  5. • Klinický význam: Diodový laser by mohl přinést lepší klinické výsledky při léčbě hlubokých kariézních lézí, čímž by se minimalizovala potřeba ošetření kořenového kanálku. Tím by se snížil počet návštěv u ošetření, což by ušetřilo čas, úsilí a peníze jak pro pacienta, tak pro zubního lékaře.

     To také vede ke snížení ceny snížením počtu potřebných procedur a návštěv.

     VI. Návrh studie Pilotní klinická studie

     VII. Materiály/ Účastníci (předměty) a metody

• Studijní prostředí: Studie má být provedena v Dental Clinics Complex (MIU Dental Laser Center) na Misr International University, Egypt.

Pacienti mají být vybíráni z komplexu ambulancí zubních klinik Misr International University.

Mikrobiologické testování bude provedeno v bakteriologické laboratoři, výzkumná jednotka, MIU Typ vzorku:

Účelový vzorek

Metoda randomizace:

Počítačem generovaná randomizace pro sekvenci se bude konat při 1. návštěvě. Randomizace bude provedena pomocí počítačového softwaru (www.randomizer.org).

Číslo odpovídající každému léčebnému postupu bude zaznamenáno na kartách uložených v postupně očíslovaných, neprůhledných, zapečetěných obálkách.

• Výpočet velikosti vzorku: Vzhledem k nedostatku dostatečné literatury je toto podle našich znalostí první studie hodnotící primární výsledek (vitalitu dřeně) po použití dezinfekce diodovým laserem. Tato pilotní studie bude tedy provedena na 30 pacientech. Každá skupina tedy bude obsahovat 10 pacientů. Výkon velikosti vzorku bude vypočítán na základě výsledků této pilotní studie s použitím G*Power verze 3.1.9.2, aby byla zachována plná velikost vzorku.

1. Statistická analýza

1. Klinická, mikrobiologická a radiografická data budou shromažďována, tabulkována a statisticky analyzována za účelem porovnání mezi mírou úspěšnosti diodového laseru, chemické dezinfekce a selektivního odstranění zubního kazu pomocí pokročilé statistiky IBM SPSS (Statistical Package for Social Sciences), verze 21 (SPSS Inc. Chicago, IL). Numerická data budou popsána jako průměr a standardní odchylka, zatímco kvalitativní data budou popsána jako počet a procenta.
2. Srovnání mezi studijními skupinami bude provedeno pomocí vhodných parametrických a neparametrických testů významnosti v závislosti na distribuci shromážděných dat.

2. Intervence (metody, zaslepení)

I-) Operační postupy:

Postupy zahrnují provádění konzervativní péče o jeden zub na pacienta buď pomocí diodového laseru nebo 2% chlorhexidinu (chemický dezinfekční prostředek), nebo bez dezinfekce [24,32]. Pacienti budou náhodně rozděleni do jedné ze tří studijních skupin pomocí počítačového softwaru (www.randomization.com); skupina 1: Dezinfekce diodovým laserem s výstupním výkonem 0,5 wattu, skupina 2: Chemická dezinfekce pomocí 2% chlorhexidinu a skupina 3: konvenční selektivní odstranění zubního kazu bez dezinfekce (kontrolní skupina). Ve všech skupinách budou použity stejné finální výplňové materiály, takže výsledek bude odrážet pouze efekt techniky dezinfekce versus žádná dezinfekce. Každý pacient bude posouzen z hlediska způsobilosti, budou mu vysvětleny postupy a pokud souhlasí s účastí, podepíše formulář informovaného souhlasu.

• Hlavní zkoušející provede postupy u všech pacientů.
• Před zahájením výkonu bude provedeno předoperační klinické hodnocení a periapikální rentgenové snímky.
• Bude provedena lokální anestezie a zub bude izolován kofferdamem.
• Přístup k lézi bude zajištěn sterilní vysokorychlostní frézou nebo diamantovými frézami, aby se vytvořil obrys.
• Zubní kaz bude zcela odstraněn z okolních stěn dutiny.
• Povrchové nekrotické kazivé fragmenty budou odstraněny z podlahy pomocí ostrého sterilního rypadla, zatímco měkký dentin bude ponechán na podlaze, aby se zabránilo expozici pulpy.

Kolekce vzorků I-Dentinal:

- Od každého pacienta budou odebrány vzorky ze spodiny infikované dutiny pomocí sterilního lžícového bagru. Vzorek bude přenesen do sterilních zkumavek Eppendorf obsahujících 0,5 ml fyziologického roztoku s fosfátovým pufrem za aseptických opatření.

Skupina 1) (laserová dezinfekce intervenční diodou s výstupním výkonem 0,5 wattu):

Po odebrání prvního vzorku dentinu, jak je popsáno výše, bude dutina dezinfikována pomocí diodového laseru (EPIC™, BIOLASE) s 940 nm a výstupním výkonem 0,5 wattu (24). Neiniciovaný hrot o průměru 400 µm bude použit pro ozařování dutiny v bezkontaktním režimu (vzdálenost 2 mm), 5 s/mm2 v rozmítavém pohybu. 2. vzorek dentinu bude odebrán po dezinfekci diodovým laserem.

Skupina 2) (skupina pro zásahovou chemickou dezinfekci):

Po odebrání prvního vzorku dentinu bude dutina dezinfikována pomocí 2% chlorhexidinu (Consepsis®, Ultradent) po dobu 20 sekund (32). Poté bude odebrán 2. vzorek dentinu po chemické dezinfekci.

Skupina 3) Komparátor (kontrolní skupina):

Po odebrání prvního vzorku dentinu bude dutina obnovena.

• U všech skupin bude dutina vyplněna skloionomerním materiálem jako základním materiálem a poté bude obnovena výplní z pryskyřičného kompozitu.
• Pacienti obdrží pooperační pokyny a pokyny pro ústní hygienu, které by měly být dodržovány během období sledování.
• Pacienti budou po třech a šesti měsících odvoláni k následné návštěvě, aby se sledovala vitalita dřeně a stav obnovy.
• Hodnocení výsledku provedou zkoušející podle hodnotící tabulky.

II) Postřehy:

1. Klinické hodnocení:

   • Sledování s klinickým hodnocením bude provedeno po 3 a 6 měsících (T3 a T6).

   Po dokončení intervence bude pacient po 3 a 6 měsících odvolán k posouzení výsledku. K posouzení primárního výsledku (vitalita dřeně) používaly předchozí studie binární proměnnou (úspěch/neúspěch), která indikovala, zda si obnovený zub zachoval svou vitalitu v době vyšetření výsledku (28). Úspěch vyžadoval pozitivní výsledky ve všech čtyřech níže uvedených testech. V naší studii bude klinická úspěšnost hodnocena pomocí binárních proměnných kromě vizuální analogové škály pomocí:

   1.1. Testování studené buničiny: Pro tento test bude použita ledová tyč. Výsledky by měly být pozitivní nebo negativní.

   1.2. Absence spontánní bolesti: Pooperační bolest bude hodnocena pomocí vizuálního analogového škálového skóre (VAS), což je metoda měření subjektivních charakteristik bolesti. Respondenti specifikují míru svého souhlasu s tvrzením uvedením pozice podél 10 cm čáry mezi dvěma koncovými body, s termínem „žádná citlivost“ na jednom konci a „netolerovatelná citlivost“ na druhém konci. Udává se skóre od (0 do 10).

   1.3. Citlivost na perkuse: (pozitivní/negativní). 1.4. Kontrola sinusu/píštěle/otoku: pomocí vizuální kontroly (pozitivní/negativní).

2. Cone Beam Computed Tomography (CBT): CBT bude použita k indikaci přítomnosti nebo nepřítomnosti periapikálních radiolucencí (pozitivní/negativní), stejně jako k vyhodnocení tloušťky a relativní hustoty zbývajícího dentinu pod konečnou výplní. Použití nejmenšího dostupného zorného pole (5 cm x 5 cm).

   • Před zákrokem bude provedeno předoperační klinické vyšetření a rentgenové snímky a poté pacienti dostanou ošetření a finální výplně (T0).
   • V T0 a T6 bude provedena kuželová počítačová tomografie.
3. Mikrobiologické hodnocení:

Odebrané vzorky dentinu budou kultivovány na dvou typech selektivních médií; Agar Mitis salivurias bude použit jako selektivní médium pro Streptococcus mutans a agar Rogosa pro Lactobacilli(1).

Určení celkového počtu životaschopných:

1. Příprava sériových ředění: Šest z desetinásobných sériových ředění (od 10-1 do 10-6) se připraví jako pracovní roztoky následovně: i. 900 µl sterilního PBS nebo sterilního fyziologického roztoku + 100 µl odebraného vzorku pro přípravu 10-1 ředění (D1) ii. Po smíchání obsahu D1 přeneste 100 µl do druhé zkumavky obsahující 900 µl sterilního PBS nebo sterilního fyziologického roztoku pro přípravu ředění 10-2 (D2).

   iii. Takto pokračujte až do přípravy ředění 10-6 (D6). Faktor ředění zkumavky Ředění 1 10-1 1/10 2 10-2 1/100 3 10-3 1/1 000 4 10-4 1/10 000 5 10-5 1/100 000 6 10-6 1/1 000

2. Dispergujte 100 µl zředěného mikrobiálního roztoku na povrch destičky pro každé výše uvedené selektivní médium.
3. Všechny agarové plotny Rogosa budou kultivovány za anaerobních podmínek (směs anaerobních plynů, 80 % N2, 10 % CO2, 10 % H2), zatímco agarové plotny Mitis salivurias budou kultivovány za aerobních podmínek. Obě média budou inkubována při 37 °C od 24 do 48 hodin.
4. Počítání bakteriálních kolonií: Vyberte misky, které se zdají mít 30 - 300 kolonií v agaru a na agaru, protože to poskytuje nejlepší statistické vyjádření počtu bakterií. Celkový počet životaschopných bakterií se rovná počtu spočítaných kolonií děleno ředěním, například: počet kolonií÷ 1/1000 (10-3) = počet kolonií × 1000 • Zaslepení: Jedno zaslepení, protože hodnotitelé výsledků budou zaslepeni . Účastníci i hlavní řešitel nemohou být oslepeni díky použití dvou zjevně odlišných metod, laserové a chemické dezinfekce nebo žádné dezinfekce.