二极管激光和化学消毒的临床评价和微生物学评价与选择性龋齿去除的比较

四、研究问题的描述（PICO 问题或其修改）

皮科问题：

在恒后牙深龋患者的治疗中，使用输出功率为0.5瓦的二极管激光或使用2%洗必太化学消毒，与传统选择性除龋不消毒相比，是否会影响牙髓活力？

患者/问题患者恒后牙深部龋损

干预 1-二极管激光消毒和 2- 使用 2% 氯己定的化学消毒

比较器 选择性常规除龋而不消毒

结果 牙髓活力

设置（研究将在哪里进行）牙科诊所综合体、Misr 国际大学和研究单位微生物学实验室时间（随访期）3 个月和 6 个月

V. 研究目的、研究目标和临床相关性 目的：本研究的目的是评估临床结果（在维持牙髓活力方面，通过冷髓测试评估、无自发性疼痛、对叩诊的敏感性、检查窦或瘘管或肿胀，并使用锥形束计算机断层扫描进行放射照相）和二极管激光和化学消毒的抗菌效果与传统的选择性龋齿去除相比，无需消毒处理恒后牙深龋病变。

研究零假设：

二极管激光或化学消毒在维持牙髓活力方面的效果与选择性龋齿去除在治疗恒牙深层龋损方面没有区别。

• 研究目标：

  1. 比较二极管激光与传统选择性龋齿去除在维持牙髓活力方面的效果，以二元变量（成功/失败）表示，并通过冷牙髓测试、无自发性疼痛、对叩诊的敏感性、检查窦或瘘管或肿胀进行评估.
  2. 比较化学消毒与传统选择性龋齿去除在维持牙髓活力方面的效果，以二元变量（成功/失败）表示，并通过冷牙髓测试、无自发性疼痛、对叩诊的敏感性、检查鼻窦或瘘管或肿胀进行评估.
  3. 在放置修复材料后和随访 6 个月时，使用 Hounsfield 装置通过锥形束计算机断层扫描 (CBCT) 测量牙本质厚度和密度。
  4. 以菌落形成单位为测量单位，通过菌落计数器测量评估所有研究组的微生物计数。

  5. • 临床相关性：二极管激光可以在治疗深部龋齿病变方面取得更好的临床效果，最大限度地减少根管治疗的需要。 这将减少就诊次数，为患者和牙医节省时间、精力和金钱。

     此外，这通过减少所需的程序和访问次数来降低价格。

     六。研究设计试点临床研究

     七。材料/参与者（受试者）和方法

• 研究环境：研究将在埃及米斯尔国际大学的牙科诊所大楼（MIU 牙科激光中心）进行。

患者将从 Misr 国际大学的门诊牙科综合诊所中挑选。

微生物测试将在细菌学实验室、研究单位、MIU 样品类型进行：

目的样本

随机化方法：

计算机生成的序列随机化将在第一次访问时进行。 将通过计算软件 (www.randomizer.org) 进行随机化。

每个治疗程序对应的编号将记录在卡片上，卡片保存在按顺序编号、不透明、密封的信封内。

• 样本量计算：由于缺乏足够的文献，这是我们所知的第一项评估使用二极管激光消毒后主要结果（牙髓活力）的研究。 因此，这项试点研究将在 30 名患者身上进行。 因此，每组将包括 10 名患者。 将使用 G*Power 版本 3.1.9.2 继续全样本量，根据本试验研究的结果计算样本量功效。

一、统计分析

1. 使用 IBM SPSS 高级统计（社会科学统计软件包）第 21 版（SPSS Inc ., 伊利诺伊州芝加哥)。 数值数据将描述为平均值和标准偏差，而定性数据将描述为数量和百分比。
2. 研究组之间的比较将根据所收集数据的分布使用适当的参数和非参数显着性检验进行。

2. 干预（方法、盲法）

I-) 操作程序：

该程序涉及对每位患者的一颗牙齿进行保守的龋齿管理，使用二极管激光或 2% 氯己定（化学消毒剂）或不进行消毒 (24,32)。 使用计算软件 (www.randomization.com) 将患者随机分配到三个研究组之一； 第 1 组：输出功率为 0.5 瓦的二极管激光消毒，第 2 组：使用 2% 氯己定进行化学消毒，第 3 组：常规选择性除龋而不消毒（对照组）。 所有组将使用相同的最终修复材料，因此结果将仅反映消毒技术与未消毒技术的效果。 将对每位患者进行资格评估，向他/她解释程序，如果他们同意参加，他们将签署知情同意书。

• 主要研究者将为所有患者执行程序。
• 在开始手术之前，将进行术前临床评估和根尖 X 光片检查。
• 将进行局部麻醉，并用橡皮障隔离牙齿。
• 将使用无菌高速车针或金刚石车针接近病灶，以建立轮廓形式。
• 龋齿将从周围的腔壁完全去除。
• 表面坏死的龋齿碎片将使用锋利的无菌挖掘机从地板上移除，而柔软的牙本质将留在地板上以避免牙髓暴露。

I-Dentinal 样本采集：

- 将使用无菌勺子挖掘机从每个患者的感染腔底部采集样本。 样品将被转移到含有 0.5 ml 磷酸盐缓冲盐水溶液的无菌 Eppendorf 管中，并采取无菌预防措施。

第1组）（输出功率0.5瓦组介入二极管激光消毒）：

如上所述收集第一份牙本质样本后，将使用波长为 940 nm 且输出功率为 0.5 瓦的二极管激光器（EPIC™，BIOLASE）对空腔进行消毒 (24)。 400 µm 非起爆尖端将用于空腔照射，采用非接触模式（2 毫米距离），扫动速度为 5 秒/平方毫米。 二极管激光消毒后将收集第二份牙本质样本。

2）组（干预化学消毒组）：

收集第一份牙本质样本后，将使用 2% 洗必泰（Consepsis®、Ultradent）对腔体进行消毒 20 秒 (32)。 然后在化学消毒后收集第二份牙本质样本。

第 3 组）比较器（对照组）：

收集第一份牙本质样本后，将修复蛀牙。

• 所有组别均以玻璃离聚物材料为基底填充洞腔，再以树脂复合修复体进行修复。
• 患者将收到在随访期间应遵循的术后指导和口腔卫生指南。
• 三个月和六个月后将召回患者进行随访，以跟进牙髓活力和恢复情况。
• 结局评价将由结局研究者根据评价图表进行。

II) 观察：

1. 临床评价：

   • 将在3 个月和6 个月（T3 和T6）后进行临床评估随访。

   完成干预后，将在 3 个月和 6 个月后召回患者以评估结果。 为评估主要结果（牙髓活力），之前的研究使用二元变量（成功/失败）来指示修复后的牙齿在结果调查时是否保持其活力 (28)。 成功需要在下面提到的所有四项测试中取得积极的结果。 在我们的研究中，除视觉模拟量表外，还将使用二元变量评估临床成功，方法是：

   1.1. 冷纸浆测试：冰棒将用于此测试。 结果应该是正面的或负面的。

   1.2. 没有自发性疼痛：术后疼痛将使用视觉模拟量表评分 (VAS) 进行评估，这是一种疼痛主观特征的测量方法。 受访者通过指示沿两个端点之间 10 厘米线的位置来指定他们对声明的同意程度，其中一端为“不敏感”，另一端为“无法忍受的敏感”。 分数从（0 到 10）给出。

   1.3. 对打击乐的敏感性：（正/负）。 1.4. 检查鼻窦/瘘管/肿胀：使用目视检查（阳性/阴性）。

2. 锥形束计算机断层扫描 (CBT)：CBT 将用于指示是否存在根尖周射线可透性（阳性/阴性），以及评估最终修复体下方剩余牙本质的厚度和相对密度。 使用可用的最小视野（5 厘米 x 5 厘米）。

   • 术前临床评估和 X 光片将在干预前进行，然后患者将接受治疗和最终修复体 (T0)。
   • 锥形束计算机断层扫描将在 T0 和 T6 进行。
3. 微生物评估：

收集的牙本质样本将在两种类型的选择性培养基上培养； Mitis salivurias 琼脂将用作变形链球菌的选择性培养基，Rogosa 琼脂培养基将用作乳杆菌 (1)。

总活菌数测定：

1. 系列稀释液的制备：六倍系列稀释液（从 10-1 到 10-6）将制备如下工作溶液： i． 900 µl 无菌 PBS 或无菌生理盐水 + 100 µl 收集样品以制备 10-1 稀释液 (D1) ii. 混合 D1 的内容物后，将 100 µl 转移到含有 900 µl 无菌 PBS 或无菌生理盐水的第二个管中，以制备 10-2 稀释液 (D2)。

   三. 继续这样直到准备 10-6 稀释 (D6)。 试管稀释系数 稀释 1 10-1 1/10 2 10-2 1/100 3 10-3 1/1,000 4 10-4 1/10,000 5 10-5 1/100,000 6 10-6 1/1,000,000

2. 将 100 µl 稀释的微生物溶液分散在平板表面，用于前面提到的每种选择性培养基。
3. 所有 Rogosa 琼脂平板都将在厌氧条件下培养（厌氧气体混合物、80% N2、10% CO2、10% H2），而 Mitis salivurias 琼脂平板将在有氧条件下培养。 两种培养基都将在 37°C 下孵育 24 至 48 小时。
4. 计数细菌菌落：选择在琼脂中和琼脂上似乎有 30 - 300 个菌落的平板，因为这给出了细菌数量的最佳统计表示。 活菌总数等于计数的菌落数除以稀释度，例如：菌落数÷ 1/1000 (10-3) = 菌落数× 1000 • 盲法：单盲，因为结果评估者将被盲化. 由于使用了两种明显不同的方法，激光和化学消毒，或不消毒，参与者和主要研究者都不能被蒙蔽。