Genotyp apolipoprotein E (APOE) Účinky na triglyceridy a průtok krve v lidském mozku

Přehled: Účelem studie je zapsat 90 starších dospělých, z nichž polovina bude mít status přenašeče E4, aby bylo možné posoudit, zda status E4 ovlivňuje změnu globálního průtoku krve mozkem (∆CBF) v reakci na nápoj s vysokým obsahem tuku. Screeningová návštěva zahrnuje informovaný souhlas, základní odběr krve, orální triglyceridový toleranční test (OTTT) a rentgenovou absorpciometrii s duální energií (DEXA). Studijní návštěva zahrnuje hodnocení průtoku krve mozkem pomocí MRI značení arteriální rotací (ASL) - na začátku a 2 hodiny po požití silné smetany. Studijní návštěva bude zahrnovat také 6 odběrů krve a 30minutovou kognitivní baterii.

Postupy screeningové návštěvy (v kampusu Seattle South Lake Union): Před screeningovou návštěvou obdrží účastníci poštou kopii formuláře souhlasu a také dotazník o anamnéze k vyplnění. Účastníkům bude doporučeno, aby se noc před návštěvou promítání postili (požadováno minimálně 8 hodin). Po procesu informovaného souhlasu personál studie zkontroluje vitální funkce, včetně obvodu pasu, výšky a hmotnosti pro výpočet indexu tělesné hmotnosti (BMI). Studovaná sestra zavede IV a krev odešle na kompletní krevní obraz, chem20 (včetně hodnocení funkce jater a ledvin), glykovaný hemoglobin (hemoglobin A1C), lipidový panel a vzorek krve pro genotypizaci APOE (Northwest Lipids pomocí polymerázového řetězce reakční (PCR) metodologie). Krevní vzorky kromě APOE budou zaslány do laboratoře certifikované CLIA (Clinical Laboratory Improvement dodatek) na University of Washington (UW) a účastníci obdrží kopii výsledků poštou. Po odběru krve pak účastníci podstoupí orální glukózový toleranční test (OGTT): 6 časových bodů (0, 15, 30, 45, 60, 120 min), který bude zahrnovat odběr krve pro plazmu pro měření inzulínu a C peptidu (v dávkách). severozápadními (SZ) lipidy). V čase 0 a 120 minut personál studie také vyhodnotí vitální funkce a glykémii v místě péče pomocí glukometru. OGTT bude standardní 75g glukózový nápoj z centrálního zásobování. Po dokončení 2hodinového OGTT pacienti podstoupí sken DEXA. Poznámka: DEXA lze provést před OGTT, pokud je to nutné pro průběh studie. Parkování bude zajištěno a účastníci budou placeni dárkovou kartou.

Ukázkový den screeningové návštěvy:

8:00: Příjezd na kliniku 8-8:30: informovaný souhlas na soukromém pokoji, projděte si anamnézu 8:30-9: Zaveďte IV, vyplňte depresi, úzkost, odeberte základní krev 9-11: OGTT ( Během mezer v OGTT proveďte Montreal Cognitive Assessment (MoCA)) 11-11:25: DEXA 11:25-11:30: Odeberte IV, rozdejte dárkovou kartu a parkovací ověření Čas: 3,5 hodiny, celkový odběr krve 40 ml

Postup při studijní návštěvě (v hlavním kampusu University of Washington): Účastníci dorazí do UW Translational Research Unit (TRU) po celonočním půstu (požadováno minimálně 8 hodin). Studijní sestra zavede IV a zkontroluje vitální funkce včetně krevního tlaku, srdeční frekvence, teploty a hmotnosti. Poté bude účastník eskortován ke skeneru MRI a podstoupí zobrazovací protokol nalačno. Účastník se vrátí zpět do TRU a zahájí orální test tolerance triglyceridů (OTTT). Čas 0 je odebrána krev a čas dokumentován. Poté účastník vypije mléčný výrobek – 100 ml husté smetany (necelých půl šálku), která obsahuje 370 kalorií, 40,4 gramů celkového tuku, 23,6 gramů nasycených tuků. Účastník bude vyzván, aby pil produkt po dobu 5 minut podle zveřejněných protokolů OTTT. Budou se odebírat vzorky krve pro měření glukózy, inzulínu, lipidů a hormonů chuti k jídlu (30, 120, 180, 240 minut). Post-lipidová MRI bude provedena v časovém bodě 2 hodiny a kognitivní hodnocení sady nástrojů NIH bude provedeno v časovém bodě 3 hodiny. Správa baterie NIH trvá přibližně 30 minut a bude provedena na přenosném tabletu.

Ukázkový den studijní návštěvy:

8:00: Přihlaste se na UW TRU, zeptejte se na nové léky, umístěte IV 8:15: Doprovod dolů do oblasti MRI, absolvujte MRI 8:45: Zpět na TRU: T0 odběr krve 8:45-8:50: Pijte lipidů 9:20: T30 min odběr krve 9:50: T60 min odběr krve 10:50: T120 min (2 hodiny) odběr krve

**Vraťte se ke skeneru MRI na 2 hodiny MRI** (bude to trvat ~2 hodiny a 10 minut po pití) 11:50: T180 min (3 hodiny) odběr krve **Proveďte nyní testování sady nástrojů NIH – trvá asi 30 minut* * 12:50: T240 min (4 hodiny) odběr krve 12:50-13:00: Odebrání IV, převzetí dárkové karty, odhlášení účastníka. Čas: 5 hodin, celkový odběr krve: 80 ml (13 na odběr krve x 6 časových bodů)

Protokol MRI: Zkoušející použije pseudokontinuální značení arteriální rotací k měření průtoku krve mozkem (CBF) v ml/100 g/min jako markeru perfuze pro zlepšení kvality signálu. V tomto přístupu slouží magneticky značená arteriální krevní voda jako endogenní kontrast. Snímky MRI budou uloženy na externí pevný disk se šifrováním a budou nahrány na One Drive nebo jiný systém kompatibilní s HIPAA pro další zpracování a analýzu.

Experiment: Podle konsenzuálních doporučení výzkumník použije sekvenci (5,5 minuty) s dlouhým trváním označení = 1,8 s, dlouhým zpožděním po označení = 2 s, s posunem označení = 25-30 mm, řezy = 20, prostorové rozlišení = 3,5×3,5×5 mm3, zorné pole = 240×240×100 mm3, SENSE-factor = 2, doba opakování/doba ozvěny (TR/TE)= 5000/18 ms. Budou aplikovány duální adiabatické supresivní pulzy pozadí, aby se minimalizovala kontaminace tkání šedou a bílou hmotou při zpoždění inverze (TI) = 2,05 a 3,25 s. Nakonec výzkumník získá sken rovnovážné magnetizace (M0, 1 minuta), identický s výše uvedeným skenem, ale s TR = 10 000 ms a bez značení nebo potlačení pozadí.

Analýza: Nejprve bude na snímky označující arteriální spin pomocí korekce pohybu (FSL-MCFLIRT) aplikována korekce pohybu a tyto budou zaregistrovány do snímku M0. Poté výzkumník provede párové odečítání mezi kontrolním a nulovým obrazem a použije dvoukompartmentový model pro kvantifikaci CBF. Výsledná mapa CBF bude registrována na skenování T1 s následnou transformací do prostoru Montrealského neurologického institutu (MNI). Časové oblasti, jako je entorinální kortex, temporální lalok, hipokampus, stejně jako zadní cingulát a laterální parietální laloky budou být identifikován pomocí standardního Harvard-Oxford kortikálního a subkortikálního atlasu. Hodnoty CBF budou porovnány v těchto oblastech mezi skupinami. Přístup oblasti zájmu může rozmělnit účinky, které jsou menší než velikost oblasti zájmu. Zkoušející proto také provede testování permutací ve FSL, aby vyhodnotil voxelové rozdíly CBF mezi skupinami. Aby bylo zajištěno, že voxelové výsledky nejsou pouhou náhodou, zavede vyšetřovatel přísnou rodinnou korekci chyb pro vícenásobná srovnání.

Údaje shromážděné pro tuto studii:

Údaje shromážděné po telefonu a na formuláři anamnézy (ústní souhlas udělen, před informovaným souhlasem):

Zdravotní anamnéza, včetně toho, zda účastníci znají svůj genotyp APOE Cílený přehled systémů Věk menopauzy (u žen) Léky Užívání drog, tabáku a alkoholu Drogové alergie Potravinové alergie/nesnášenlivost Ruce Práce a vzdělání Anamnéza účastníka Úroveň vzdělání matky (pokud je známa ) Úroveň vzdělání otce (pokud je známa) Kontrolní seznam MRI: operace, kov v těle

Údaje shromážděné při screeningové návštěvě:

Jak se pacient identifikuje podle rasy/etnického původu Vitaly: Výška, váha, měření obvodu pasu Dotazník fyzického zdraví-9 (PHQ9, obrazovka deprese) Hodnocení generalizované úzkostné poruchy-7 (GAD-7, obrazovka úzkosti) Kognitivní hodnocení: MoCA verze 8.2 Česká verze Screening krevního obrazu: chemie, jaterní funkce, lipidový panel, hemoglobin A1C, kompletní krevní obraz (CBC), genotyp APOE (výtěr z tváře a krevní test) Nalačno a glukóza na 2 hodiny (pomocí glukometru) Nalačno a 2 hodiny srdce frekvence, krevní tlak Šest odběrů krve OGTT: 4 ml levandulová horní zkumavka pro měření glukózy, inzulín (zasílán do laboratoře v dávkách) DEXA sken pro standardní měření složení těla (tj. tuková hmota, hmota bez tuku)

Údaje shromážděné při studijní návštěvě:

Vitaly: Srdeční frekvence (HR), TK, Respirační frekvence (RR), teplota ve všech časových bodech Šest odběrů krve: odběr séra a plazmy na glukózu, inzulín, lipidy a hormony chuti k jídlu Sada nástrojů NIH kognitivní data MRI Údaje ASL: Celková a regionální ASL obrázky (nezahrnuje klinické čtení z MRI)