Efectos del genotipo de la apolipoproteína E (APOE) sobre los triglicéridos y el flujo sanguíneo en el cerebro humano

Descripción general: el propósito del estudio es inscribir a 90 adultos mayores, la mitad de los cuales serán portadores de E4, para evaluar si el estado de E4 afecta el cambio en el flujo sanguíneo cerebral global (∆CBF) en respuesta a una bebida rica en grasas. La visita de selección incluye el consentimiento informado, la extracción de sangre inicial, la prueba de tolerancia a los triglicéridos orales (OTTT) y la absorciometría de rayos X de energía dual (DEXA). La visita del estudio consiste en evaluar el flujo sanguíneo cerebral mediante resonancia magnética con marcaje de espín arterial (ASL), al inicio del estudio y 2 horas después de beber crema espesa. La visita de estudio también incluirá 6 extracciones de sangre y una batería cognitiva de 30 minutos.

Procedimientos de la visita de selección (en el campus de Seattle South Lake Union): antes de la visita de selección, los participantes recibirán una copia del formulario de consentimiento por correo, así como un cuestionario de historial médico para completar. Se recomendará a los participantes que ayunen la noche anterior a la visita de selección (se requiere un mínimo de 8 horas). Después de un proceso de consentimiento informado, el personal del estudio controlará los signos vitales, incluida la circunferencia de la cintura, la altura y el peso para calcular el índice de masa corporal (IMC). El enfermero del estudio colocará una vía intravenosa y enviará sangre para un hemograma completo, chem20 (incluida la evaluación de la función hepática y renal), hemoglobina glucosilada (hemoglobina A1C), panel de lípidos y una muestra de sangre para la determinación del genotipo APOE (lípidos del noroeste utilizando cadena de polimerasa). metodología de reacción (PCR)). Las muestras de sangre, excepto APOE, se enviarán al laboratorio certificado por la Enmienda de Mejora de Laboratorio Clínico (CLIA) de la Universidad de Washington (UW), y los participantes recibirán una copia de los resultados por correo. Después de la extracción de sangre, los participantes se someterán a una prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT): 6 puntos de tiempo (0, 15, 30, 45, 60,120 min) que incluirán una extracción de sangre para plasma para medir la insulina y el péptido C (en lotes por los lípidos del Noroeste (NW)). En el tiempo 0 y 120 minutos, el personal del estudio también evaluará los signos vitales y la glucosa en un punto de atención con un glucómetro. El OGTT será la bebida de glucosa estándar de 75 gramos del suministro central. Después de completar la OGTT de 2 horas, los pacientes se someterán a una exploración DEXA. Tenga en cuenta que DEXA se puede realizar antes de OGTT si es necesario para el flujo del estudio. Se proporcionará estacionamiento y se pagará a los participantes con una tarjeta de regalo.

Día de la muestra de la visita de selección:

8 am: Ingreso a la clínica 8-8:30: consentimiento informado en una habitación privada, repasar el historial médico 8:30-9: Insertar IV, completar depresión, examen de ansiedad, extraer sangre de referencia 9-11 am: OGTT ( Durante las brechas en OGTT, realice la evaluación cognitiva de Montreal (MoCA)) 11-11:25 a. m.: DEXA 11:25-11:30: retire la vía IV, distribuya la tarjeta de regalo y la validación de estacionamiento Tiempo: 3,5 horas, sangre total extraída 40 ml

Procedimientos de la visita de estudio (en el campus principal de la Universidad de Washington): los participantes llegarán a la Unidad de Investigación Traslacional (TRU) de la UW después de un ayuno nocturno (se requiere un mínimo de 8 horas). La enfermera del estudio colocará una vía intravenosa y controlará los signos vitales, incluidos la presión arterial, la frecuencia cardíaca, la temperatura y el peso. Luego, el participante será acompañado al escáner de resonancia magnética y se someterá al protocolo de imágenes en ayunas. El participante regresará a la TRU y comenzará la prueba de tolerancia oral a los triglicéridos (OTTT). Tiempo 0: se extrae sangre y se documenta el tiempo. Luego, el participante beberá el producto lácteo: 100 ml de crema espesa (poco menos de media taza) que contiene 370 calorías, 40,4 gramos de grasa total, 23,6 gramos de grasa saturada. Se alentará al participante a beber el producto durante 5 minutos según los protocolos OTTT publicados. Se tomarán muestras de sangre para la medición de glucosa, insulina, lípidos y hormonas del apetito (30, 120, 180, 240 min). Se realizará una resonancia magnética posterior a los lípidos en el punto de tiempo de 2 horas, y la evaluación cognitiva de la caja de herramientas NIH se realizará en el punto de tiempo de 3 horas. La batería NIH tarda aproximadamente 30 minutos en administrarse y se realizará en una tableta portátil.

Día de muestra de la visita de estudio:

8 am: Regístrese en UW TRU, pregunte sobre nuevos medicamentos, coloque IV 8:15: Acompañamiento hasta el área de MRI, obtenga pre-MRI 8:45: Regreso a TRU: T0 extracción de sangre 8:45-8:50: Beba lípidos 9:20: T30 min extracción de sangre 9:50: T60 min extracción de sangre 10:50: T120 min (2 horas) extracción de sangre

**Regrese al escáner de resonancia magnética para la resonancia magnética de 2 horas** (será ~2 horas y 10 minutos después de beber) 11:50: T180 min (3 horas) extracción de sangre **Haga la prueba de la caja de herramientas NIH ahora: demora aproximadamente 30 minutos* * 12:50: T240 min (4 horas) extracción de sangre 12:50-13:00: extracción de IV, recepción de tarjeta de regalo, salida del participante. Tiempo: 5 horas, total de sangre extraída: 80 ml (13 por extracción de sangre x 6 puntos de tiempo)

Protocolo de resonancia magnética: el investigador utilizará el marcaje de espín arterial pseudocontinuo para medir el flujo sanguíneo cerebral (FSC) en ml/100 g/min como marcador de perfusión para mejorar la calidad de la señal. En este enfoque, el agua de la sangre arterial marcada magnéticamente sirve como contraste endógeno. Las imágenes de resonancia magnética se almacenarán en un disco duro externo con cifrado y se cargarán en One Drive u otro sistema compatible con HIPAA para su posterior procesamiento y análisis.

Experimento: según las recomendaciones de consenso, el investigador utilizará una secuencia (5,5 minutos) con una duración de etiqueta larga = 1,8 s, un retraso posterior al etiquetado prolongado = 2 s, con un desplazamiento de etiquetado = 25-30 mm, cortes = 20, resolución espacial = 3,5×3,5×5 mm3, campo de visión = 240×240×100 mm3, factor SENSE = 2, tiempo de repetición/tiempo de eco (TR/TE)= 5000/18 ms. Se aplicarán pulsos de supresión de fondo adiabáticos duales para minimizar la contaminación del tejido de materia gris y blanca en el retraso de inversión (TI) = 2,05 y 3,25 s. Finalmente, el investigador adquirirá una exploración de magnetización de equilibrio (M0, 1 minuto), idéntica a la exploración anterior, pero con TR = 10 000 ms y sin etiquetado ni supresión de fondo.

Análisis: en primer lugar, se aplicará la corrección de movimiento a las imágenes de etiquetado de espín arterial mediante la corrección de movimiento (FSL-MCFLIRT), y se registrarán en la imagen M0. Luego, el investigador realizará una resta por pares entre las imágenes de control y nula y aplicará un modelo de dos compartimentos para cuantificar el FSC. El mapa CBF resultante se registrará conjuntamente con la exploración T1 seguida de una transformación al espacio del Instituto Neurológico de Montreal (MNI). identificarse utilizando el atlas cortical y subcortical estándar de Harvard-Oxford. Los valores de CBF se compararán en estas regiones entre los grupos. El enfoque de la región de interés puede diluir efectos que son más pequeños que el tamaño de la región de interés. Por lo tanto, el investigador también realizará pruebas de permutaciones en FSL para evaluar las diferencias de CBF en cuanto a vóxeles entre los grupos. Para garantizar que los resultados de los vóxeles no sean mera casualidad, el investigador impondrá una estricta corrección de errores familiar para las comparaciones múltiples.

Datos recopilados para este estudio:

Datos recopilados por teléfono y en el formulario de historial médico (consentimiento verbal otorgado, previo consentimiento informado):

Historial médico, incluso si los participantes conocen su genotipo APOE Revisión específica de los sistemas Edad de la menopausia (para mujeres) Medicamentos Uso de drogas, tabaco y alcohol Alergias a medicamentos Alergias/intolerancias alimentarias Debilidad en las manos Historial laboral y educativo del participante Nivel de educación de la madre (si se conoce) ) Nivel de educación del padre (si se conoce) Lista de verificación de resonancia magnética: cirugías, metal en el cuerpo

Datos recopilados en la visita de selección:

Cómo se identifica el paciente en cuanto a raza/etnicidad Vitales: altura, peso, medidas de la circunferencia de la cintura Cuestionario de salud física-9 (PHQ9, una prueba de detección de depresión) Evaluación del trastorno de ansiedad generalizada-7 (GAD-7, una prueba de ansiedad) Evaluación cognitiva: MoCA versión 8.2 Versión en inglés Análisis de sangre de detección: química, función hepática, panel de lípidos, hemoglobina A1C, conteo sanguíneo completo (CBC), genotipo APOE (frotis de mejilla y análisis de sangre) Ayuno y glucosa en el punto de atención de 2 horas (usando un glucómetro) Ayuno y corazón de 2 horas índice, presión arterial Seis extracciones de sangre OGTT: tubo con tapa de lavanda de 4 ml para medir la glucosa, insulina (enviada al laboratorio en lotes) Exploración DEXA para medidas estándar de composición corporal (es decir, masa grasa, masa libre de grasa)

Datos recopilados en la visita de estudio:

Signos vitales: frecuencia cardíaca (FC), presión arterial, frecuencia respiratoria (RR), temperatura en todos los puntos de tiempo Seis extracciones de sangre: recolección de suero y plasma para glucosa, insulina, lípidos y hormonas del apetito Datos cognitivos de la caja de herramientas de NIH Datos de IRM ASL: ASL total y regional imágenes (no incluye una lectura de resonancia magnética clínica)