Prevence glukokortikoidy indukovaného poškození kostního metabolismu

Inzercí v novinách, v obchodech, klubech zdraví, na veřejných místech a na platformách sociálních médií a kontaktováním zainteresovaných osob (e-mailem a telefonicky) identifikovaných veřejně dostupných webových stránek (např. www.ratsit.se), K účasti ve studii bude přijato 46 mladých, zdravých mužů a žen. Studijní subjekty budou telefonicky kontaktovány a obdrží další informace týkající se studie a projdou předběžným hodnocením způsobilosti k účasti. Podrobné informace o studiu budou studijním předmětům zaslány poštou. Při screeningové návštěvě účastníci obdrží informace o studii ústně, a pokud účastníci podepíší formulář informovaného souhlasu, podstoupí účastníci test glykémie nalačno, HbA1c a orální glukózový toleranční test (OGTT). Ke sběru informací při screeningové návštěvě bude použit standardizovaný dotazník s vlastními údaji o kuřáckých návycích, příjmu vápníku, anamnéze, lécích, předchozích zlomeninách, fyzické aktivitě a stravovacích návycích. Způsobilí účastníci jsou poté pozváni na randomizační návštěvu. Při randomizační návštěvě budou subjekty studie požádány, aby se zdržely fyzického cvičení, jiného než chůze, a dodržovaly nezměněnou normální stravu od 14. dne studie. Randomizaci provede dodavatel LR (BioGaiaAB). Vyšetřovatelé nebudou mít přístup k randomizačnímu kódu a zaslepení bude zachováno až do konce studie a uzamčení databáze. Po randomizaci budou účastníci studie konzumovat buď LR nebo placebo po dobu 30 dnů. Po 14denním zaváděcím období začnou všichni účastníci užívat 25 mg perorálního prednisolonu každé ráno po dobu 7 dnů. Při 14denní návštěvě bude zahájeno 24hodinové monitorování glukózy na následujících 10 dní. Při další návštěvě v den 16 budou ráno (7-9 hodin ráno) odebrány vzorky krve nalačno, dodány vzorky stolice (do 24 hodin od odběru) a účastníci zahájí orální léčbu GC při této návštěvě poté, co byly odebrány vzorky krve. nakreslený. Při 19-, 23- a 30denních návštěvách budou vzorky krve odebírány ráno (7-9 hodin pro všechny návštěvy, před podáním dávky GC). Při těchto návštěvách budou také odebrány vzorky trusu. Zahrnutí účastníci budou požádáni, aby přišli na kliniku a nahlásili dodržování a možné nežádoucí účinky během trvání studie a při všech návštěvách.

Analýzy.

Dotazníky:

Ke sběru informací při screeningové návštěvě bude použit standardizovaný dotazník o kuřáckých zvycích, příjmu vápníku, anamnéze (např. mrtvice, revmatoidní artritida a diabetes), léky a předchozí zlomeniny. Současná fyzická aktivita a stravovací návyky budou na začátku hodnoceny pomocí dotazníků (IPAQ a FFQ). Denní příjem vápníku bude vypočítán z dotazníků o potravinách obsahujících vápník (např. mléčné výrobky, zelenina atd.). Gastrointestinální symptomy budou analyzovány pomocí dotazníku GSRS.

Analýza séra, plazmy a stolice:

Sérum a plazma se odeberou ráno (nalačno), zmrazí se a skladují při -80 °C do dalších analýz. Vzorky ze dne 16 budou odebrány před zahájením orální GC léčby. Při každé návštěvě bude odebráno maximálně 30 ml krve. Glykémie nalačno bude analyzována pomocí čerstvé krve při screeningu (s přidáním HbA1c při screeningu) a ve dnech 16 (začátek GC), 19, 23 a 30. Vzorky séra a plazmy budou okamžitě zmrazeny a uchovávány až do analýzy. Analýzy sérových nebo plazmatických a kostních markerů (osteokalcin, P1NP a CTX) budou prováděny pomocí komerčně dostupných imunosorbentních testů. Vzorky stolice budou odebrány do 24 hodin od výroby a uskladněny při -80oC až do další analýzy.

Orální glukózový toleranční test (OGTT):

Při screeningové návštěvě bude změřena ranní glykémie nalačno a následně požití 24 cl glukózového sirupu obsahujícího 75 gramů cukru. Po 2 hodinách bude provedeno další měření glykémie. Zařazení do studie bude záviset na normální glykémii nalačno (≤6 mmol/l) a OGTT (<7,8 mmol/l).

Markery střevní propustnosti a střevního zánětu:

Analýzy markerů střevní permeability (analýza endotoxinů, PyroGeneTM Recombinant Factor C Endpoint Fluorescent Assay) budou provedeny pomocí fluorescenčního testu v den 16, den 19 a den 23. Markery střevního zánětu (lipokalin-2 a kalprotektin) budou také analyzovány ve stolici a séru.

Analýzy střevní mikroflóry - průzkumné analýzy:

DNA ze vzorků stolice bude izolována pomocí dobře validovaného protokolu a provede se PCR pro amplifikaci variabilních oblastí (V4) bakteriálního genu 16S rRNA pomocí primerů s čárovým kódem. Rovněž budou provedeny metagenomové analýzy všech vzorků.

Nepřetržité monitorování glukózy:

V den studie 14 bude zahájeno kontinuální monitorování glukózy (CGM), které umožní 48hodinové období pozorování před zahájením orálního dávkování prednisolonu. CGM se bude používat od 14. dne do ukončení léčby prednisolonem 23. dne. Systém Dexcom G6 bude použit pro CGM u všech účastníků.