Prevenção do comprometimento do metabolismo ósseo induzido por glicocorticóides

Ao anunciar em jornais, em lojas, academias de ginástica, em locais públicos e em plataformas de mídia social, e entrando em contato com pessoas interessadas (por correio e telefone) sites publicamente disponíveis identificados (por exemplo, www.ratsit.se), Serão recrutados 46 homens e mulheres jovens e saudáveis ​​para participar do estudo. Os sujeitos do estudo serão contatados por telefone e receberão mais informações sobre o estudo e passarão por uma avaliação preliminar sobre a elegibilidade para participar. Informações detalhadas sobre o estudo serão enviadas por correio aos participantes do estudo. Na visita de triagem, os participantes receberão informações sobre o estudo verbalmente e, se assinarem o termo de consentimento informado, os participantes serão submetidos a um teste de glicemia de jejum, HbA1c e um teste oral de tolerância à glicose (OGTT). Um questionário autoaplicado padronizado será usado para coletar informações na visita de triagem sobre hábitos tabágicos, ingestão de cálcio, histórico médico, medicamentos, fraturas anteriores, atividade física e hábitos alimentares. Os participantes elegíveis são então convidados para a visita de randomização. Na visita de randomização, os sujeitos do estudo serão solicitados a abster-se de exercícios físicos, além de caminhar e manter uma dieta normal inalterada desde o dia 14 do estudo. A randomização será realizada pelo fornecedor do LR (BioGaiaAB). Os investigadores não terão acesso ao código de randomização e o mascaramento será mantido até o final do estudo e bloqueio do banco de dados. Após a randomização, os participantes do estudo consumirão LR ou placebo por 30 dias. Após o período inicial de 14 dias, todos os participantes começarão a tomar 25 mg de prednisolona oral todas as manhãs durante 7 dias. Na visita de 14 dias, será iniciado um monitoramento de glicose de 24 horas para os 10 dias seguintes. Na próxima visita no dia 16, amostras de sangue em jejum serão coletadas pela manhã (7-9 horas), amostras de fezes fornecidas (dentro de 24 horas após a coleta) e os participantes iniciarão o tratamento oral com GC naquela visita após as amostras de sangue terem sido coletadas. retirou. Nas visitas de 19, 23 e 30 dias, as amostras de sangue serão coletadas pela manhã (das 7h às 9h para todas as visitas, antes de tomar a dose de GC). Amostras de fezes também serão coletadas nessas visitas. Os participantes incluídos serão solicitados a comparecer à clínica e relatar a adesão e possíveis eventos adversos durante a duração do estudo e em todas as visitas.

Análises.

Questionários:

Um questionário padronizado será usado para coletar informações na visita de triagem sobre hábitos tabágicos, ingestão de cálcio, histórico médico (por exemplo, acidente vascular cerebral, artrite reumatóide e diabetes), medicamentos e fraturas anteriores. Atividade física atual e hábitos alimentares serão avaliados por meio de questionários autorreferidos (IPAQ e QFA) no início do estudo. A ingestão diária de cálcio será calculada a partir dos questionários sobre alimentos que contêm cálcio (por exemplo, laticínios, vegetais, etc.). Os sintomas gastrointestinais serão analisados ​​por meio do questionário GSRS.

Análises de soro, plasma e fezes:

Soro e plasma serão coletados pela manhã (jejum), congelados e armazenados a -80° C até novas análises. Amostras do dia 16 serão coletadas antes do início do tratamento oral com GC. Um máximo de 30 ml de sangue será coletado em cada visita. A glicemia de jejum será analisada usando sangue fresco na triagem (com a adição de HbA1c na triagem) e nos dias 16 (início do GC), 19, 23 e 30. As amostras de soro e plasma serão congeladas imediatamente e mantidas até a análise. As análises de soro ou plasma e marcadores ósseos (osteocalcina, P1NP e CTX) serão realizadas por meio de ensaios imunossorventes disponíveis comercialmente. Amostras de fezes serão coletadas dentro de 24 horas desde produzidas e armazenadas a -80oC até análise posterior.

Teste oral de tolerância à glicose (TOTG):

Na visita de triagem, será medida uma glicemia de jejum matinal, seguida da ingestão de 24 cl de xarope de glicose, contendo 75 gramas de açúcar. Após 2 horas, outra medição de glicose no sangue será realizada. A inclusão no estudo dependerá de ter glicemia de jejum normal (≤6 mmol/l) e OGTT (<7,8 mmol/l).

Marcadores de permeabilidade intestinal e inflamação intestinal:

As análises de marcadores para permeabilidade intestinal (análise de endotoxina, Ensaio fluorescente de ponto final do fator recombinante PyroGeneTM) serão realizadas usando um ensaio fluorescente no dia 16, dia 19 e dia 23. Marcadores de inflamação intestinal (lipocalina-2 e calprotectina) também serão analisados ​​nas fezes e no soro.

Análises da microbiota intestinal - análises exploratórias:

O DNA das amostras de fezes será isolado usando um protocolo bem validado e realizará PCR para amplificar as regiões variáveis ​​(V4) do gene bacteriano 16S rRNA usando primers com código de barras. Análises de metagenoma de todas as amostras também serão realizadas.

Monitoramento contínuo de glicose:

No dia 14 do estudo, o monitoramento contínuo da glicose (CGM) será iniciado, permitindo um período de observação de 48 horas antes do início da dosagem oral de prednisolona. CGM será usado a partir do dia 14 até a cessação do tratamento com prednisolona no dia 23. O sistema Dexcom G6 será usado para CGM em todos os participantes.