Včasná identifikace Candidy u intraabdominální kandidózy (ICCA)
Studie ICCA (Včasná identifikace Candida u intraabdominální kandidózy)
Intraabdominální kandidóza zůstává prvním původem invazivní kandidózy u kriticky nemocných pacientů s mortalitou až 60 %. Tato vysoká mortalita částečně souvisí se zpožděním aplikace antimykotické léčby. Podle odborníků v oboru jsou nové diagnostické metody pro rychlou detekci Candidy u intraabdominálních infekcí povinné, protože současné strategie trpí nedostatkem citlivosti i specifičnosti.
Calscreener (SYMCEL®) je nový diagnostický nástroj pro rychlou identifikaci přítomnosti patogenů v biologických vzorcích na základě detekce mikrometabolické aktivity.
Projekt ICCA bude testovat proveditelnost, přesnost a diagnostický výkon kalscreeneru na existující biologické sbírce peritoneální tekutiny. Tento soubor pocházel od kohorty kriticky nemocných pacientů s intraabdominální infekcí, která vyžadovala operaci břicha. Intraabdominální infekce se skládají z bakteriální peritonitidy a intraabdominální kandidózy. Přítomnost patogenů (bakterie a kvasinky) je již známa, peritoneální tekutina je po rutinní analýze (bakteriologie / mykologie) uchovávána.
V tomto projektu bude zkoumána pouze detekce/identifikace kvasinek.
Přehled studie
Postavení
Detailní popis
Vysoká mortalita pacientů s infekcí nitrobřišní kandidózy částečně souvisí s oddálením antimykotické léčby. Zlatým standardem pro detekci Candida zůstává kultivace kvasinek na mykologickém médiu, která trpí zpožděnou dobou odezvy (až 5 dní).
V důsledku toho je v běžné praxi rozhodnutí o zahájení antimykotické léčby založeno na prediktivních skóre, jako je skóre peritonitidy. Ať už je skóre jakékoli, všechny trpí nedostatkem senzitivity a specificity a mohly by vystavit pacienty na JIP opožděné léčbě s negativním dopadem na mortalitu. Po zavedení a před dostupností výsledku kultivace může být antimykotikum zastaveno na základě dvou měření séra 1,3 beta D glukanu < 80 pg/ml. Tato strategie umožňuje protiplísňové náhradní. Existuje tedy prostor pro zlepšení, pokud jde o včasnou detekci a identifikaci Candidy pro správnou volbu antimykotika.
Calscreener (SYMCEL®) je nový diagnostický nástroj pro rychlou identifikaci přítomnosti patogenů v biologických vzorcích na základě detekce mikrometabolické aktivity. Metabolická aktivita předjímá budoucí pozitivní kulturu. Dosud se většina experimentů s calscreenerTM týká bakterií. Během vývojové fáze byly s Candidou provedeny některé experimenty, většinou in vitro. Údaje o proveditelnosti s klinickými vzorky, jako je peritoneální tekutina, chybí. Kromě toho v současné době neexistuje žádná knihovna týkající se metabolického profilu Candida, a to jak u albicans, tak u non-albicans druhů. Celkově vzato je jeho rutinní použití v současnosti nemožné.
První výsledky (nepublikovaná data našeho týmu) detekce metabolické aktivity v peritoneální tekutině se známou přítomností Candidy ukázaly časovou detekci <1 hodina. Naším cílem je potvrdit tyto slibné výsledky pomocí biologických vzorků odebraných v probíhající kohortové studii. Nejprve potřebujeme popsat křivky metabolické aktivity různých druhů Candida, abychom mohli vytvořit knihovnu.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Vandoeuvre les Nancy, Francie, 54500
- Central Hospital
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
- Dítě
- Dospělý
- Starší dospělý
Přijímá zdravé dobrovolníky
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
V této studii budou použity klinické vzorky získané z biologického odběru peritoneální tekutiny ze studie pBDG2. Přítomnost Candida každého vzorku je známa díky rutinní analýze. Protože studie p BDG 2 již probíhá nábor, bude ve STUDII ICCA vyšetřeno pouze 100 prvních pacientů z centra „NANCY“.
Výsledky získané pomocí calscreeneru budou porovnány s výsledky získanými kultivací kvasinek, aby se potvrdila detekce Candida bez ohledu na druhy albicans a non-albicans.
Nakonec bude zpoždění detekce pomocí calscreeneru porovnáno se zpožděním růstu kvasinkové kultury
Popis
Kritéria patří do studie pBDG2 (Peritoneální 1,3-ß-D-glukan pro diagnostiku intraabdominální kandidózy u kriticky nemocných).
Kritéria pro zařazení:
- dospělý
- Hrazeno zdravotní pojišťovnou
- Přijat na JIP s intraabdominální infekcí vyžadující břišní operaci nebo perkutánní drenáž
Kritéria vyloučení:
- Těhotná nebo kojící žena
- Pacient zbaven svobody po vydání soudního rozhodnutí
- Pacient v psychiatrické péči
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Observační modely: Kohorta
- Časové perspektivy: Retrospektivní
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
kriticky nemocných dospělých pacientů s intraabdominální infekcí
Studie ICCA je doplňkovou studií neintervenční prospektivní kohortové studie (studie pBDG2, NCT03997929) Do studie pBDG 2 byli zařazeni pacienti na JIP s intraabdominální infekcí vyžadující operaci břicha. Během chirurgického zákroku byla odebírána peritoneální tekutina, aby se identifikovaly patogeny, které se na nich podílejí, a aby se vedly protiinfekční terapie. Po rutinních analýzách byla zbývající peritoneální tekutina uložena pro vytvoření biologické sbírky. Tato biologická sbírka, ve které je znám obsah bakterií a kvasinek, bude analyzována pomocí calscreeneru. |
Calscreener (SYMCEL®) je nový diagnostický nástroj pro rychlou identifikaci přítomnosti patogenů v biologických vzorcích na základě detekce mikrometabolické aktivity.
Všechny živé buňky produkují teplo chemickými a fyzikálními procesy života; sledováním toku tepla v čase (J/s, W) lze získat značné množství informací o biologickém systému.
Cal screener umožňuje měření metabolické aktivity patogenů přímo ze vzorku (zde peritoneální tekutiny). Produkce tepla bude porovnána mezi peritoneální tekutinou, s nebo bez přidání bakterií
Pro vysvětlení metabolické aktivity bude analyzován růst a přechod kvasinek do hyf pomocí optické mikroskopie a konvenční kultivace
Pro vysvětlení metabolické aktivity bude řešena a porovnána úroveň exprese 5 genů virulence Candida albicans (UME6, ALS3, SFL2, HWP1 a ECE1) mezi peritoneální tekutinou.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Detekce (Ano/Ne) přítomnosti Candidy v peritoneální tekutině
Časové okno: Den 1.–3
|
Detekce calscreenerem: detekce metabolické aktivity > 5 µW (podle doporučení SYMCEL)
|
Den 1.–3
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Zpoždění (v hodinách) detekce
Časové okno: Den 1.–3
|
Zpoždění (v hodinách) od začátku analýzy calscreeneru do první detekce tepelného toku > 5 µW
|
Den 1.–3
|
Další výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Výroba tepla (Joule)
Časové okno: Den 1.–3
|
Produkce tepla v závislosti na peritoneální tekutině a přítomnosti nebo nepřítomnosti bakterií
|
Den 1.–3
|
|
Morfologie Candida
Časové okno: Den 1
|
Kmen C. albicans SC5314 bude inokulován trojmo do jednoho ml různé peritoneální tekutiny, stejně jako kontrolní média (Sabouraud a ascitická tekutina) při optické hustotě (OD) 0,3 nm, což odpovídá přibližně 3,10^6 koloniím C. albicans na mililitr (C. albicans/ml) média. Kontrolní jamky obsahující pouze médium bez C. albicans byly také zahrnuty na stejné 24jamkové destičce pro potvrzení nepřítomnosti kontaminace. 24jamková destička bude naočkována a inkubována při 37 °C s třepáním při 300 RPM po dobu 24 hodin. Morfologie C. albicans (kvasinky nebo pseudohyfy nebo hyfy) byla pozorována pod světelným mikroskopem v hodinových intervalech po dobu prvních osmi hodin, poté následovala pozorování v H16 a H24. |
Den 1
|
|
Růst Candidy
Časové okno: Den 1
|
Kmen C. albicans SC5314 bude inokulován trojmo do jednoho ml různé peritoneální tekutiny, stejně jako kontrolní média (Sabouraud a ascitická tekutina) při optické hustotě (OD) 0,3 nm, což odpovídá přibližně 3,10^6 koloniím C. albicans na mililitr (C. albicans/ml) média. Kontrolní jamky obsahující pouze médium bez C. albicans byly také zahrnuty na stejné 24jamkové destičce pro potvrzení nepřítomnosti kontaminace. 24jamková destička bude naočkována a inkubována při 37 °C s třepáním při 300 RPM po dobu 24 hodin. Růst C. albicans byl hodnocen inokulací 10 ul z každé jamky na SBD dextrózový agar a kolonie byly spočítány po 24 hodinách inkubace při 37 °C. Pro usnadnění počítání byla předem připravena 1000násobná ředění každé naočkované jamky. |
Den 1
|
|
Exprese genu virulence Candida
Časové okno: Den 1
|
Inokulace C. albicans do různých médií se řídila stejným protokolem jako pro fenotypové hodnocení, s kultivací přes noc 24 hodin před analýzou genové exprese.
Těmito pěti geny virulence jsou UME6, ALS3, SFL2, HWP1 a ECE1.
Po 24hodinové kultivaci přes noc budou vzorky odstředěny, aby se zachovala pouze buněčná peleta.
Buněčná peleta byla poté dvakrát promyta 10 ml fosfátem pufrovaného fyziologického roztoku (PBS).
Následně byl PBS odstraněn a zůstala po něm pouze buněčná peleta.
Extrakce RNA bude provedena pomocí technologie lýzy FASTPREP®.
Reverzní transkripce bude provedena pomocí soupravy QuantiTect Reverse Transscription kit od Qiagen® (Germantown, Maryland, Spojené státy americké) podle pokynů výrobce.
qPCR byla provedena v MicroAmp Optical 96-well Reaction Plates (Applied Biosystems) za použití CFX96 Real-Time PCR System (Bio-Rad, Marnes-la Coquette, Francie).
|
Den 1
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Spolupracovníci
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- 2021PI051
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
produkt vyrobený a vyvážený z USA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .