Раннее выявление Candida при интраабдоминальном кандидозе (ICCA)
Исследование ICCA (ранняя идентификация Candida при интраабдоминальном кандидозе)
Интраабдоминальный кандидоз остается первой причиной возникновения инвазивного кандидоза у больных в критическом состоянии с летальностью до 60%. Такая высокая смертность частично связана с задержкой начала противогрибкового лечения. По мнению экспертов в этой области, новые диагностические методы для быстрого выявления Candida при интраабдоминальных инфекциях являются обязательными, поскольку существующие стратегии страдают отсутствием как чувствительности, так и специфичности.
Calscreener (SYMCEL®) — это новый диагностический инструмент для быстрой идентификации присутствия патогенов в биологических образцах на основе обнаружения микрометаболической активности.
В рамках проекта ICCA будет проверена осуществимость, точность и диагностические характеристики прибора для скрининга кальция на существующей биологической коллекции перитонеальной жидкости. Эта коллекция была получена от когорты пациентов в критическом состоянии с внутрибрюшной инфекцией, которым потребовалась абдоминальная операция. Интраабдоминальные инфекции состоят из бактериального перитонита и интраабдоминального кандидоза. Присутствие патогенов (бактерий и дрожжей) уже известно, перитонеальная жидкость сохраняется после рутинного анализа (бактериология/микология).
В этом проекте будет исследовано только обнаружение/идентификация дрожжей.
Обзор исследования
Статус
Подробное описание
Высокая смертность пациентов с интраабдоминальной кандидозной инфекцией отчасти связана с запоздалым противогрибковым лечением. Золотым стандартом для обнаружения Candida остается культура дрожжей на микологических средах, которая характеризуется замедленным временем отклика (до 5 дней).
Следовательно, в обычной практике решение о начале противогрибкового лечения основывается на прогностических показателях, таких как показатель перитонита. Какой бы ни была оценка, все они страдают недостатком чувствительности и специфичности и могут подвергнуть пациентов ОИТ задержке лечения с негативным влиянием на смертность. После введения и до получения результата посева противогрибковое средство можно прекратить на основании двух показателей 1,3 бета-D-глюкана в сыворотке крови < 80 пг/мл. Эта стратегия позволяет избежать противогрибкового запаса. Следовательно, есть возможности для улучшения раннего обнаружения и идентификации Candida для правильного выбора противогрибкового препарата.
Calscreener (SYMCEL®) — это новый диагностический инструмент для быстрой идентификации присутствия патогенов в биологических образцах на основе обнаружения микрометаболической активности. Метаболическая активность предвосхищает будущую положительную культуру. На сегодняшний день большинство экспериментов с calscreenerTM касаются бактерий. На этапе разработки были проведены некоторые эксперименты с Candida, в основном in vitro. Данные о возможности использования клинических образцов, таких как перитонеальная жидкость, отсутствуют. Кроме того, в настоящее время нет библиотеки по метаболическому профилю Candida как у albicans, так и у не-albicans видов. В общем, его рутинное использование в настоящее время невозможно.
Первые результаты (неопубликованные данные нашей группы) обнаружения метаболической активности в перитонеальной жидкости с известным присутствием Candida показали время обнаружения <1 часа. Мы стремимся подтвердить эти многообещающие результаты, используя биологические образцы, собранные в продолжающемся когортном исследовании. Сначала нам нужно описать кривые метаболической активности различных видов Candida, чтобы составить библиотеку.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Vandoeuvre les Nancy, Франция, 54500
- Central Hospital
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
- Ребенок
- Взрослый
- Пожилой взрослый
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
В настоящем исследовании будут использованы клинические образцы, полученные из биологической коллекции перитонеальной жидкости, выделившейся из исследования pBDG2. Присутствие Candida в каждом образце известно благодаря рутинному анализу. Поскольку в исследование p BDG 2 уже идет набор, в ICCA STUDY будут исследованы только 100 первых пациентов из центра «НЭНСИ».
Результаты, полученные с помощью кальскринера, будут сравниваться с результатами, полученными с помощью культуры дрожжей, чтобы подтвердить обнаружение Candida независимо и в зависимости от видов albicans и non-albicans.
Наконец, задержку обнаружения с помощью кальскринера можно сравнить с задержкой роста культуры дрожжей.
Описание
Критерии относятся к исследованию pBDG2 (Перитонеальный 1,3-β-D-глюкан для диагностики интраабдоминального кандидоза у пациентов в критическом состоянии).
Критерии включения:
- взрослый
- Покрывается медицинской страховкой
- Поступил в отделение интенсивной терапии с внутрибрюшной инфекцией, требующей абдоминальной хирургии или чрескожного дренирования.
Критерий исключения:
- Беременная или кормящая женщина
- Пациент, лишенный свободы после исполнения судебного решения
- Пациент на психиатрическом лечении
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Когорта
- Временные перспективы: Ретроспектива
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
тяжелобольные взрослые пациенты с интраабдоминальной инфекцией
Исследование ICCA является вспомогательным исследованием неинтервенционного проспективного когортного исследования (исследование pBDG2, NCT03997929). В исследование pBDG 2 были включены пациенты ОИТ с внутрибрюшной инфекцией, нуждающиеся в абдоминальной хирургии. Во время операции собирали перитонеальную жидкость для выявления вовлеченных патогенов и назначения противоинфекционной терапии. После рутинных анализов оставшуюся перитонеальную жидкость сохраняли для создания биологической коллекции. Эта биологическая коллекция, в которой известно содержание бактерий и дрожжей, будет проанализирована с помощью кальскринера. |
Calscreener (SYMCEL®) — это новый диагностический инструмент для быстрой идентификации присутствия патогенов в биологических образцах на основе обнаружения микрометаболической активности.
Все живые клетки производят тепло в результате химических и физических процессов жизни; путем наблюдения за тепловым потоком во времени (Дж/с, Вт) можно получить значительный объем информации о биологической системе.
Cal screener позволяет измерять метаболическую активность патогенов непосредственно из образца (в данном случае перитонеальной жидкости). Производство тепла будет сравниваться между перитонеальной жидкостью, с добавлением или без добавления бактерий.
Чтобы объяснить метаболическую активность, рост и переход дрожжей в гифы будут проанализированы с использованием оптической микроскопии и обычной культуры.
Чтобы объяснить метаболическую активность, уровень экспрессии 5 генов вирулентности Candida albicans (UME6, ALS3, SFL2, HWP1 и ECE1) будет рассмотрен и сравнен в перитонеальной жидкости.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Обнаружение (Да/Нет) наличия Candida в перитонеальной жидкости
Временное ограничение: День 1-3
|
Обнаружение с помощью кальскринера: обнаружение метаболической активности > 5 мкВт (в соответствии с рекомендацией SYMCEL)
|
День 1-3
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Задержка (в часах) обнаружения
Временное ограничение: День 1-3
|
Задержка (в часах) от начала анализа кальскринера до первого обнаружения теплового потока > 5 мкВт
|
День 1-3
|
Другие показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Производство тепла (Джоуль)
Временное ограничение: День 1-3
|
Теплопродукция в зависимости от перитонеальной жидкости и наличия или отсутствия бактерий
|
День 1-3
|
|
Морфология кандиды
Временное ограничение: 1 день
|
Штамм C. albicans SC5314 будет инокулирован в трех экземплярах в один мл различных перитонеальных жидкостей, а также в контрольные среды (сабуро и асцитическая жидкость) при оптической плотности (OD) 0,3 нм, что соответствует приблизительно 3,10^6 колониям C. .albicans на миллилитр (C. albicans/мл) среды. Контрольные лунки, содержащие только среду без C. albicans, также были включены в тот же 24-луночный планшет для подтверждения отсутствия контаминации. 24-луночный планшет инокулируют и инкубируют при 37°C при встряхивании при 300 об/мин в течение 24 часов. Морфологию C. albicans (дрожжи или псевдогифы или гифы) наблюдали под световым микроскопом с часовыми интервалами в течение первых восьми часов с последующими наблюдениями в H16 и H24. |
1 день
|
|
Кандидоз роста
Временное ограничение: 1 день
|
Штамм C. albicans SC5314 будет инокулирован в трех экземплярах в один мл различных перитонеальных жидкостей, а также в контрольные среды (сабуро и асцитическая жидкость) при оптической плотности (OD) 0,3 нм, что соответствует приблизительно 3,10^6 колониям C. .albicans на миллилитр (C. albicans/мл) среды. Контрольные лунки, содержащие только среду без C. albicans, также были включены в тот же 24-луночный планшет для подтверждения отсутствия контаминации. 24-луночный планшет инокулируют и инкубируют при 37°C при встряхивании при 300 об/мин в течение 24 часов. Рост C. albicans оценивали путем инокуляции 10 мкл из каждой лунки на декстрозный агар SBD и подсчитывали колонии через 24 часа инкубации при 37°C. Для облегчения подсчета заранее готовили 1000-кратные разведения каждой засеянной лунки. |
1 день
|
|
Экспрессия гена вирулентности Candida
Временное ограничение: 1 день
|
При инокуляции C. albicans в различных средах следовали тому же протоколу, что и для фенотипической оценки, с ночным культивированием в течение 24 часов перед анализом экспрессии генов.
Представляют интерес пять генов вирулентности: UME6, ALS3, SFL2, HWP1 и ECE1.
После 24-часового ночного культивирования образцы будут центрифугированы, чтобы сохранить только клеточный осадок.
Затем клеточный осадок дважды промывали 10 мл фосфатно-солевого буфера (PBS).
Впоследствии PBS удаляли, оставляя только клеточный осадок.
Экстракция РНК будет проводиться с использованием технологии лизиса FASTPREP®.
Обратная транскрипция будет выполняться с использованием набора для обратной транскрипции QuantiTect от Qiagen® (Джермантаун, Мэриленд, США) в соответствии с инструкциями производителя.
Количественную ПЦР проводили в 96-луночных реакционных планшетах MicroAmp Optical (Applied Biosystems) с использованием системы ПЦР в реальном времени CFX96 (Bio-Rad, Marnes-la Coquette, France).
|
1 день
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Соавторы
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- 2021PI051
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
продукт, произведенный в США и экспортированный из США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .