Vroege identificatie van Candida bij intra-abdominale candidiasis (ICCA)
De ICCA-studie (vroege identificatie van Candida bij intra-abdominale candidiasis)
Intra-abdominale candidiasis blijft de eerste oorzaak van invasieve candidiasis bij ernstig zieke patiënten met een mortaliteit tot 60%. Deze hoge mortaliteit houdt deels verband met het uitstel van de toediening van antischimmelbehandelingen. Volgens experts in het veld zijn nieuwe diagnostische methoden om Candida snel op te sporen bij intra-abdominale infecties noodzakelijk, omdat de huidige strategieën te kampen hebben met een gebrek aan sensitiviteit en specificiteit.
De calscreener (SYMCEL®) is een nieuw diagnostisch hulpmiddel om snel de aanwezigheid van pathogenen in biologische monsters te identificeren op basis van detectie van micrometabolische activiteit.
Het ICCA-project zal de haalbaarheid, de nauwkeurigheid en de diagnostische prestatie van de calscreener testen op een bestaande biologische verzameling peritoneale vloeistof. Deze collectie was afkomstig van een cohort van ernstig zieke patiënten met een intra-abdominale infectie waarvoor een buikoperatie nodig was. Intra-abdominale infecties bestaan uit bacteriële peritonitis en intra-abdominale candidiasis. De aanwezigheid van ziekteverwekkers (bacteriën en gisten) is al bekend, het buikvocht wordt opgeslagen na routinematige analyse (bacteriologie / mycologie).
In dit project zal enkel de detectie/identificatie van gist onderzocht worden.
Studie Overzicht
Toestand
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Het hoge sterftecijfer van patiënten met een intra-abdominale candidiasisinfectie houdt deels verband met het uitstel van de antischimmelbehandeling. De gouden standaardmethode voor Candida-detectie blijft de gistcultuur op mycologische media die lijdt aan een vertraagde responstijd (tot 5 dagen).
Bijgevolg wordt in de dagelijkse praktijk de beslissing om een antischimmelbehandeling te starten gebaseerd op voorspellende scores zoals de Peritonitis-score. Wat de score ook is, ze lijden allemaal aan een gebrek aan sensitiviteit en specificiteit en kunnen IC-patiënten blootstellen aan uitgestelde behandeling met een negatieve invloed op de mortaliteit. Eenmaal geïntroduceerd en voordat het resultaat van de kweek beschikbaar is, kan het antischimmelmiddel worden gestopt op basis van twee serummetingen van 1,3 beta D Glucan < 80 pg/ml. Deze strategie maakt antischimmelreserves mogelijk. Daarom is er ruimte voor verbetering met betrekking tot vroege detectie en identificatie van Candida voor de juiste keuze van antischimmelmiddelen.
De calscreener (SYMCEL®) is een nieuw diagnostisch hulpmiddel om snel de aanwezigheid van pathogenen in biologische monsters te identificeren op basis van detectie van micrometabolische activiteit. De metabole activiteit anticipeert op de toekomstige positieve cultuur. Tot op heden hebben de meeste experimenten met de calscreenerTM betrekking op bacteriën. Tijdens de ontwikkelingsfase zijn enkele experimenten uitgevoerd met Candida, meestal in vitro. Gegevens over de haalbaarheid met klinische monsters zoals de peritoneale vloeistof ontbreken. Bovendien is er momenteel geen bibliotheek met betrekking tot het metabole profiel van Candida, zowel bij albicans als niet-albicans soorten. Al met al is routinematig gebruik momenteel onmogelijk.
Eerste resultaten (niet-gepubliceerde gegevens van ons team) van detectie van metabole activiteit in peritoneale vloeistof met bekende aanwezigheid van Candida toonden een tijddetectie <1 uur. We streven ernaar deze veelbelovende resultaten te bevestigen met behulp van biologische monsters die zijn verzameld in een lopende cohortstudie. We moeten eerst de metabolische activiteitscurven van verschillende Candida-soorten beschrijven om een bibliotheek te vormen.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Vandoeuvre les Nancy, Frankrijk, 54500
- Central Hospital
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
- Kind
- Volwassen
- Oudere volwassene
Accepteert gezonde vrijwilligers
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
In de huidige studie zullen de klinische monsters worden gebruikt die zijn verkregen uit de biologische verzameling van peritoneale vloeistofafgifte uit de pBDG2-studie. De aanwezigheid van Candida van elk monster is bekend dankzij routinematige analyse. Omdat de p BDG 2-studie al aan het rekruteren is, zullen alleen de 100 eerste patiënten uit het centrum "NANCY" worden onderzocht in de ICCA-STUDIE.
De resultaten verkregen met de calscreener zullen worden vergeleken met die verkregen door gistkweek om de Candida-detectie te bevestigen ongeacht en afhankelijk van de albicans en niet-albicans soorten.
Ten slotte zal de detectievertraging met de calscreener vergeleken worden met de groeivertraging van een gistcultuur
Beschrijving
De criteria behoren tot de pBDG2-studie (Peritoneale 1.3-ß-D-glucaan voor de diagnose van intra-abdominale candidiasis bij ernstig zieke patiënten).
Inclusiecriteria:
- volwassen
- Gedekt door de zorgverzekering
- Opgenomen op de IC met een intra-abdominale infectie die een buikoperatie of percutane drainage vereist
Uitsluitingscriteria:
- Zwangere of zogende vrouw
- Patiënt van vrijheid beroofd na betekening rechterlijke beslissing
- Patiënt onder psychiatrische zorg
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Observatiemodellen: Cohort
- Tijdsperspectieven: Retrospectief
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
ernstig zieke volwassen patiënten met een intra-abdominale infectie
De ICCA-studie is een aanvullende studie van een niet-interventionele prospectieve cohortstudie (de pBDG2-studie, NCT03997929). De pBDG 2-studie heeft IC-patiënten opgenomen met intra-abdominale infectie die een buikoperatie nodig hadden. Tijdens de operatie is peritoneale vloeistof verzameld om de betrokken ziekteverwekkers te identificeren en anti-infectieuze therapieën te begeleiden. Na de routinematige analyses werd het achtergebleven peritoneale vocht opgeslagen om een biologische verzameling te creëren. Deze biologische collectie, waarin het gehalte aan bacteriën en gisten bekend is, zal geanalyseerd worden met de calscreener. |
De calscreener (SYMCEL®) is een nieuw diagnostisch hulpmiddel om snel de aanwezigheid van pathogenen in biologische monsters te identificeren op basis van detectie van micrometabolische activiteit.
Alle levende cellen produceren warmte door de chemische en fysische levensprocessen; door de warmtestroom in de tijd te volgen (J/s, W) kan een aanzienlijke hoeveelheid informatie worden verkregen over het biologische systeem.
Met de cal screener kan de metabole activiteit van ziekteverwekkers rechtstreeks uit een monster worden gemeten (hier de peritoneale vloeistof). De warmteproductie wordt vergeleken tussen peritoneale vloeistof, met of zonder toevoeging van bacteriën
Om de metabolische activiteit, groei en overgang van gist naar hyfen te verklaren, zullen we analyseren met behulp van optische microscopie en conventionele kweek.
Om de metabole activiteit te verklaren, zal het expressieniveau van 5 Candida albicans virulentiegenen (UME6, ALS3, SFL2, HWP1 en ECE1) worden geadresseerd en vergeleken tussen peritoneale vloeistof.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Detectie (ja/nee) van de aanwezigheid van Candida in het peritoneale vocht
Tijdsspanne: Dag 1 - 3
|
Detectie door de calscreener: detectie van metabole activiteit > 5 µW (volgens SYMCEL-aanbeveling)
|
Dag 1 - 3
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Vertraging (in uren) van detectie
Tijdsspanne: Dag 1 - 3
|
Vertraging (in uren) vanaf het begin van de calscreener-analyse tot de eerste detectie van een warmtestroom > 5 µW
|
Dag 1 - 3
|
Andere uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Warmteproductie (Joule)
Tijdsspanne: Dag 1 - 3
|
Warmteproductie afhankelijk van de peritoneale vloeistof en de aan- of afwezigheid van bacteriën
|
Dag 1 - 3
|
|
Candida-morfologie
Tijdsspanne: Dag 1
|
C. albicans SC5314-stam zal in drievoud worden geïnoculeerd in één ml van de verschillende peritoneale vloeistof, evenals controlemedia (Sabouraud en ascitische vloeistof) bij een optische dichtheid (OD) van 0,3 nm, overeenkomend met ongeveer 3,10 ^ 6 kolonies van C albicans per milliliter (C. albicans/ml) media. Controleputjes die alleen de media zonder C. albicans bevatten, werden ook op dezelfde plaat met 24 putjes geplaatst om de afwezigheid van verontreiniging te bevestigen. De plaat met 24 putjes wordt geïnoculeerd en geïncubeerd bij 37°C onder schudden bij 300 RPM gedurende 24 uur. De morfologie van C. albicans (gist of pseudo-hyfen of hyfen) werd de eerste acht uur met tussenpozen van een uur waargenomen onder een lichtmicroscoop, gevolgd door waarnemingen bij H16 en H24. |
Dag 1
|
|
Candida-groei
Tijdsspanne: Dag 1
|
C. albicans SC5314-stam zal in drievoud worden geïnoculeerd in één ml van de verschillende peritoneale vloeistof, evenals controlemedia (Sabouraud en ascitische vloeistof) bij een optische dichtheid (OD) van 0,3 nm, overeenkomend met ongeveer 3,10 ^ 6 kolonies van C albicans per milliliter (C. albicans/ml) media. Controleputjes die alleen de media zonder C. albicans bevatten, werden ook op dezelfde plaat met 24 putjes geplaatst om de afwezigheid van verontreiniging te bevestigen. De plaat met 24 putjes wordt geïnoculeerd en geïncubeerd bij 37°C onder schudden bij 300 RPM gedurende 24 uur. De groei van C. albicans werd beoordeeld door 10 μl van elk putje te inoculeren op SBD-dextrose-agar, en de kolonies werden geteld na 24 uur incubatie bij 37°C. Om het tellen te vergemakkelijken, werden van tevoren 1000-voudige verdunningen van elk geïnoculeerd putje bereid. |
Dag 1
|
|
Candida virulentie genexpressie
Tijdsspanne: Dag 1
|
C. albicans-inoculatie in de verschillende media volgde hetzelfde protocol als voor fenotypische evaluatie, met een nachtelijke kweek van 24 uur vóór analyse van genexpressie.
De vijf virulentiegenen van belang zijn UME6, ALS3, SFL2, HWP1 en ECE1.
Na de 24 uur durende kweek gedurende de nacht worden de monsters gecentrifugeerd om alleen de celpellet te behouden.
De celpellet werd vervolgens tweemaal gewassen met 10 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS).
Vervolgens werd de PBS verwijderd, waarbij alleen de celpellet achterbleef.
RNA-extractie zal worden uitgevoerd met behulp van de FASTPREP®-lysistechnologie.
Omgekeerde transcriptie zal worden uitgevoerd met behulp van de QuantiTect Reverse Transcription-kit van Qiagen® (Germantown, Maryland, Verenigde Staten) volgens de instructies van de fabrikant.
De qPCR werd uitgevoerd in MicroAmp optische reactieplaten met 96 putjes (Applied Biosystems) met behulp van het CFX96 real-time PCR-systeem (Bio-Rad, Marnes-la Coquette, Frankrijk).
|
Dag 1
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Medewerkers
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- 2021PI051
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
product vervaardigd in en geëxporteerd uit de V.S.
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .