Identificación temprana de Candida en candidiasis intraabdominal (ICCA)
Estudio ICCA (Identificación temprana de Candida en la CANDIDIASIS INTRAABDOMINAL)
La candidiasis intraabdominal sigue siendo el primer origen de candidiasis invasiva en pacientes críticos con una mortalidad de hasta el 60%. Esta alta mortalidad está en parte relacionada con el retraso en la administración del tratamiento antifúngico. Según los expertos en el campo, los nuevos métodos de diagnóstico para detectar rápidamente Candida en infecciones intraabdominales son obligatorios porque las estrategias actuales carecen tanto de sensibilidad como de especificidad.
El calscreener (SYMCEL®) es una nueva herramienta de diagnóstico para identificar rápidamente la presencia de patógenos en muestras biológicas basada en la detección de actividad micrometabólica.
El proyecto ICCA probará la viabilidad, la precisión y el rendimiento diagnóstico del calscreener en una colección biológica existente de líquido peritoneal. Esta colección provino de una cohorte de pacientes críticos con infección intraabdominal que requirieron cirugía abdominal. Las infecciones intraabdominales consisten en peritonitis bacteriana y candidiasis intraabdominal. Ya se conoce la presencia de patógenos (bacterias y levaduras), almacenándose el líquido peritoneal tras análisis de rutina (bacteriología/micología).
En este proyecto solo se investigará la detección/identificación de levaduras.
Descripción general del estudio
Estado
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
La alta tasa de mortalidad de los pacientes con infección por candidiasis intraabdominal se relaciona en parte con el retraso en el tratamiento antifúngico. El método estándar de oro para la detección de Candida sigue siendo el cultivo de levadura en medios micológicos que sufre de un tiempo de respuesta retardado (hasta 5 días).
En consecuencia, en la práctica habitual, la decisión de iniciar un tratamiento antifúngico se basa en puntuaciones predictivas como la puntuación de Peritonitis. Cualquiera que sea el puntaje, todos sufren de falta de sensibilidad y especificidad y podrían exponer a los pacientes de la UCI a un tratamiento retrasado con un impacto negativo en la mortalidad. Una vez introducido y antes de disponer del resultado del cultivo, el antifúngico puede suspenderse en base a dos medidas séricas de 1,3 beta D Glucano < 80 pg/ml. Esta estrategia permite repuestos antifúngicos. Por lo tanto, existe margen de mejora con respecto a la detección e identificación tempranas de Candida para la elección correcta del antifúngico.
El calscreener (SYMCEL®) es una nueva herramienta de diagnóstico para identificar rápidamente la presencia de patógenos en muestras biológicas basada en la detección de actividad micrometabólica. La actividad metabólica anticipa el futuro cultivo positivo. Hasta la fecha, la mayoría de los experimentos con calscreenerTM se refieren a bacterias. Durante la fase de desarrollo se han realizado algunos experimentos con Candida, la mayoría in vitro. Faltan datos de factibilidad con muestras clínicas como el líquido peritoneal. Además, actualmente no existe una biblioteca sobre el perfil metabólico de Candida, tanto en especies albicans como no albicans. Con todo, su uso rutinario es actualmente imposible.
Los primeros resultados (datos no publicados de nuestro equipo) de detección de actividad metabólica en líquido peritoneal con presencia conocida de Candida mostraron un tiempo de detección <1 hora. Nuestro objetivo es confirmar estos resultados prometedores utilizando muestras biológicas recolectadas en un estudio de cohorte en curso. Primero necesitamos describir las curvas de actividad metabólica de diferentes especies de Candida para constituir una biblioteca.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Vandoeuvre les Nancy, Francia, 54500
- Central Hospital
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Niño
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Método de muestreo
Población de estudio
En el presente estudio se utilizarán las muestras clínicas extraídas de la colección biológica de líquido peritoneal procedente del estudio pBDG2. La presencia de Candida de cada muestra se conoce gracias a análisis de rutina. Debido a que el estudio p BDG 2 ya está reclutando, solo los 100 primeros pacientes del centro "NANCY" serán investigados en el ESTUDIO ICCA.
Los resultados obtenidos con el calscreener se compararán con los obtenidos por cultivo de levadura para confirmar la detección de Candida independientemente y en función de las especies albicans y no albicans.
Por último, se comparará el retraso de la detección con el calscreener con el retraso del crecimiento del cultivo de levadura.
Descripción
Los criterios pertenecen al estudio pBDG2 (Peritoneal 1.3-ß-D-glucan for the Diagnosis of Intra-abdominal Candidiasis in Critically Illpatients).
Criterios de inclusión:
- adulto
- Cubierto por un seguro de salud
- Ingresado en UCI con infección intraabdominal que requiere cirugía abdominal o drenaje percutáneo
Criterio de exclusión:
- Mujer embarazada o lactante
- Paciente privado de libertad tras administración de sentencia judicial
- Paciente bajo cuidado psiquiátrico
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Grupo
- Perspectivas temporales: Retrospectivo
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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Pacientes adultos en estado crítico con infección intraabdominal.
El estudio ICCA es un estudio auxiliar de un estudio de cohorte prospectivo no intervencionista (el estudio pBDG2, NCT03997929). El estudio pBDG 2 inscribió a pacientes de UCI con infección intraabdominal que requerían cirugía abdominal. Durante la cirugía, se recolectó líquido peritoneal para identificar los patógenos involucrados y guiar las terapias antiinfecciosas. Después de los análisis de rutina, el líquido peritoneal remanente se almacenó para crear una colección biológica. Esta colección biológica, en la que se conoce el contenido de bacterias y levaduras, será analizada con el calscreener. |
El calscreener (SYMCEL®) es una nueva herramienta de diagnóstico para identificar rápidamente la presencia de patógenos en muestras biológicas basada en la detección de actividad micrometabólica.
Todas las células vivas producen calor por los procesos químicos y físicos de la vida; al monitorear el flujo de calor a lo largo del tiempo (J/s, W) se puede obtener una cantidad significativa de información sobre el sistema biológico.
El cal screener permite medir la actividad metabólica de los patógenos directamente de una muestra (aquí, el líquido peritoneal). La producción de calor se comparará entre fluido peritoneal, con o sin adición de bacterias
Para explicar la actividad metabólica, se analizará el crecimiento y la transición de levadura a hifa mediante microscopía óptica y cultivo convencional.
Para explicar la actividad metabólica, se abordará el nivel de expresión de 5 genes de virulencia de Candida albicans (UME6, ALS3, SFL2, HWP1 y ECE1) y se comparará entre fluidos peritoneales.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Detección (Sí/No) de la presencia de Candida en el líquido peritoneal
Periodo de tiempo: Día 1 - 3
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Detección por el calscreener: detección de actividad metabólica > 5 µW (según recomendación SYMCEL)
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Día 1 - 3
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Retraso (en horas) de detección
Periodo de tiempo: Día 1 - 3
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Retraso (en horas) desde el inicio del análisis calscreener hasta la primera detección de flujo de calor > 5 µW
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Día 1 - 3
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Otras medidas de resultado
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Producción de calor (julios)
Periodo de tiempo: Día 1 - 3
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Producción de calor en función del líquido peritoneal y de la presencia o ausencia de bacterias
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Día 1 - 3
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Morfología de la cándida
Periodo de tiempo: Día 1
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La cepa C. albicans SC5314 se inoculará por triplicado en un ml de los diferentes fluidos peritoneales, así como en medios de control (Sabouraud y líquido ascítico) a una densidad óptica (DO) de 0,3 nm, correspondiente a aproximadamente 3,10^6 colonias de C . albicans por mililitro (C. albicans/ml) de medio. También se incluyeron pocillos de control que contenían únicamente los medios sin C. albicans en la misma placa de 24 pocillos para confirmar la ausencia de contaminación. La placa de 24 pozos será inoculada e incubada a 37°C con agitación a 300 RPM por 24 horas. La morfología de C. albicans (levadura o pseudo-hifas o hifas) se observó bajo un microscopio óptico a intervalos de una hora durante las ocho horas iniciales, seguido de observaciones en H16 y H24. |
Día 1
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Crecimiento de cándida
Periodo de tiempo: Día 1
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La cepa C. albicans SC5314 se inoculará por triplicado en un ml de los diferentes fluidos peritoneales, así como en medios de control (Sabouraud y líquido ascítico) a una densidad óptica (DO) de 0,3 nm, correspondiente a aproximadamente 3,10^6 colonias de C . albicans por mililitro (C. albicans/ml) de medio. También se incluyeron pocillos de control que contenían únicamente los medios sin C. albicans en la misma placa de 24 pocillos para confirmar la ausencia de contaminación. La placa de 24 pozos será inoculada e incubada a 37°C con agitación a 300 RPM por 24 horas. El crecimiento de C. albicans se evaluó mediante la inoculación de 10 μL de cada pocillo en agar dextrosa SBD y las colonias se contaron después de 24 horas de incubación a 37 °C. Para facilitar el conteo, se prepararon previamente diluciones de 1000 veces de cada pocillo inoculado. |
Día 1
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Expresión del gen de virulencia de Candida
Periodo de tiempo: Día 1
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La inoculación de C. albicans en los diferentes medios siguió el mismo protocolo que para la evaluación fenotípica, con un cultivo nocturno de 24 horas antes del análisis de la expresión génica.
Los cinco genes de virulencia de interés son UME6, ALS3, SFL2, HWP1 y ECE1.
Después del cultivo nocturno de 24 horas, las muestras se centrifugarán para retener solo el sedimento celular.
A continuación, el sedimento celular se lavó dos veces con 10 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS).
Posteriormente, se eliminó el PBS, dejando solo el sedimento celular.
La extracción de ARN se realizará mediante la tecnología de lisis FASTPREP®.
La transcripción inversa se realizará con el kit de transcripción inversa QuantiTect de Qiagen® (Germantown, Maryland, Estados Unidos) siguiendo las instrucciones del fabricante.
La qPCR se realizó en placas de reacción MicroAmp Optical de 96 pocillos (Applied Biosystems) utilizando el sistema de PCR en tiempo real CFX96 (Bio-Rad, Marnes-la Coquette, Francia).
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Día 1
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- 2021PI051
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
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Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
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