복강 내 칸디다증에서 칸디다의 조기 식별 (ICCA)
ICCA 연구(복강 내 칸디다증에서 칸디다의 조기 식별)
복강 내 칸디다증은 최대 60%의 사망률을 보이는 중환자에서 침습성 칸디다증의 첫 번째 원인으로 남아 있습니다. 이러한 높은 사망률은 항진균제 투여의 지연과 부분적으로 관련이 있습니다. 현장의 전문가들에 따르면, 현재의 전략은 민감도와 특이성이 모두 부족하기 때문에 복강 내 감염에서 칸디다를 신속하게 검출하는 새로운 진단 방법이 필수적입니다.
칼스크리너(SYMCEL®)는 미세대사 활성 검출을 기반으로 생물학적 시료에서 병원체의 존재를 신속하게 식별하는 새로운 진단 도구입니다.
ICCA 프로젝트는 기존의 생물학적 복막액 수집에 대한 calscreener의 실행 가능성, 정확성 및 진단 성능을 테스트합니다. 이 수집은 복부 수술이 필요한 복강 내 감염이 있는 중환자 집단에서 나왔습니다. 복강 내 감염은 세균성 복막염과 복강 내 칸디다증으로 구성됩니다. 병원균(박테리아 및 효모)의 존재는 이미 알려져 있으며 일상적인 분석(세균학/진균학) 후에 복막액이 저장됩니다.
이 프로젝트에서는 효모의 검출/식별만 조사합니다.
연구 개요
상세 설명
복강 내 칸디다증 감염 환자의 높은 사망률은 부분적으로 항진균제 치료의 지연과 관련이 있습니다. 칸디다 검출을 위한 황금 표준 방법은 지연된 반응 시간(최대 5일)을 겪는 진균 배지의 효모 배양으로 남아 있습니다.
따라서 일상적인 진료에서 항진균제 치료를 시작하기로 한 결정은 복막염 점수와 같은 예측 점수를 기반으로 합니다. 점수가 무엇이든, 그들은 모두 민감도와 특이도가 부족하여 ICU 환자를 지연된 치료에 노출시켜 사망률에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다. 일단 도입되고 배양 결과가 나오기 전에 항진균제는 1,3 베타 D 글루칸 < 80 pg/ml의 두 가지 혈청 측정치를 기준으로 중지할 수 있습니다. 이 전략은 항진균제 여분을 허용합니다. 따라서 항진균제의 올바른 선택을 위한 조기 칸디다 검출 및 식별과 관련하여 개선의 여지가 있습니다.
칼스크리너(SYMCEL®)는 미세대사 활성 검출을 기반으로 생물학적 시료에서 병원체의 존재를 신속하게 식별하는 새로운 진단 도구입니다. 신진대사 활동은 미래의 긍정적인 문화를 예상합니다. 현재까지 calscreenerTM을 사용한 대부분의 실험은 박테리아에 관한 것입니다. 개발 단계에서 칸디다로 일부 실험이 주로 시험관 내에서 수행되었습니다. 복막액과 같은 임상 샘플에 대한 타당성 데이터가 부족합니다. 게다가, 현재 알비칸 및 비알비칸 종 모두에서 칸디다의 대사 프로필에 관한 라이브러리가 없습니다. 대체로 일상적인 사용은 현재 불가능합니다.
칸디다의 존재가 알려진 복막액에서 대사 활동 검출의 첫 번째 결과(우리 팀의 미공개 데이터)는 시간 검출이 1시간 미만인 것으로 나타났습니다. 우리는 진행 중인 코호트 연구에서 수집된 생물학적 샘플을 사용하여 이러한 유망한 결과를 확인하는 것을 목표로 합니다. 먼저 라이브러리를 구성하기 위해 다양한 칸디다 종의 대사 활동 곡선을 설명해야 합니다.
연구 유형
등록 (실제)
연락처 및 위치
연구 연락처
- 이름: Medhi EL SIAGHY
- 전화번호: +33 3 83 15 52 85
- 이메일: m.siaghy@chru-nancy.fr
연구 장소
-
-
-
Vandoeuvre les Nancy, 프랑스, 54500
- Central Hospital
-
-
참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
- 어린이
- 성인
- 고령자
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
샘플링 방법
연구 인구
본 연구에서는 pBDG2 연구에서 나온 복막액 문제의 생물학적 수집에서 발행된 임상 샘플을 사용할 것입니다. 일상적인 분석 덕분에 각 샘플의 칸디다균 존재를 알 수 있습니다. p BDG 2 연구가 이미 모집 중이기 때문에 ICCA STUDY에서는 센터 "NANCY"의 첫 번째 환자 100명만 조사할 것입니다.
칼스크리너로 얻은 결과를 효모 배양으로 얻은 결과와 비교하여 알비칸 및 비알비칸 종에 관계없이 칸디다 검출을 확인합니다.
마지막으로 칼스크리너를 사용한 검출 지연을 효모 배양의 성장 지연과 비교할 것입니다.
설명
기준은 pBDG2 연구(중환자에서 복강내 칸디다증 진단을 위한 복막 1.3-ß-D-글루칸)에 속합니다.
포함 기준:
- 성인
- 건강 보험 적용
- 복부 수술 또는 경피 배액이 필요한 복강 내 감염으로 ICU에 입원
제외 기준:
- 임산부 또는 수유부
- 사법적 결정 집행 후 자유를 박탈당한 환자
- 정신과 치료중인 환자
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 관찰 모델: 보병대
- 시간 관점: 회고전
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
개입 / 치료 |
|---|---|
|
복강 내 감염이 있는 위독한 성인 환자
ICCA 연구는 비개입적 전향적 코호트 연구(pBDG2 연구, NCT03997929)의 보조 연구입니다. pBDG 2 연구는 복부 수술이 필요한 복강내 감염이 있는 ICU 환자를 등록했습니다. 수술 중 관련된 병원균을 식별하고 항감염 요법을 안내하기 위해 복막액을 채취했습니다. 일상적인 분석 후 남은 복막액은 생물학적 수집물을 만들기 위해 저장되었습니다. 박테리아와 효모의 함량이 알려진 이 생물학적 수집물은 칼스크리너로 분석될 것입니다. |
칼스크리너(SYMCEL®)는 미세대사 활성 검출을 기반으로 생물학적 시료에서 병원체의 존재를 신속하게 식별하는 새로운 진단 도구입니다.
모든 살아있는 세포는 생명의 화학적 및 물리적 과정에 의해 열을 생성합니다. 시간 경과에 따른 열 흐름(J/s, W)을 모니터링하여 생물학적 시스템에 관한 상당한 양의 정보를 얻을 수 있습니다.
칼 스크리너를 사용하면 샘플(여기서는 복막액)에서 직접 병원체의 대사 활동을 측정할 수 있습니다. 박테리아를 추가하거나 추가하지 않은 복막액 사이의 열 생성을 비교합니다.
신진대사 활동을 설명하기 위해 광학 현미경과 기존 배양을 사용하여 성장 및 효모에서 균사로의 전이를 분석합니다.
대사 활동을 설명하기 위해 5개의 칸디다 알비칸스 독성 유전자(UME6, ALS3, SFL2, HWP1 및 ECE1)의 발현 수준을 다루고 복막액 간에 비교한다.
|
연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
|---|---|---|
|
복막액 내 칸디다균 존재 여부 감지(예/아니오)
기간: 1일 - 3일
|
칼스크리너에 의한 감지: 대사 활동 감지 > 5 µW(SYMCEL 권장 사항에 따름)
|
1일 - 3일
|
2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
|---|---|---|
|
감지 지연(시간)
기간: 1일 - 3일
|
칼스크리너 분석 시작부터 첫 번째 열 흐름 감지까지의 지연(시간) > 5µW
|
1일 - 3일
|
기타 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
|---|---|---|
|
열 생산(줄)
기간: 1일 - 3일
|
복막액과 세균의 유무에 따른 열생산
|
1일 - 3일
|
|
칸디다 형태
기간: 1일차
|
C. albicans SC5314 균주는 약 3.10^6 C 콜로니에 해당하는 0.3nm의 광학 밀도(OD)에서 제어 배지(Sabouraud 및 복수액)뿐만 아니라 1mL의 다양한 복막액에 3회 접종됩니다. . 밀리리터당 알비칸스(C. albicans/mL)의 미디어. C. albicans가 없는 배지만 포함하는 대조군 웰도 동일한 24웰 플레이트에 포함시켜 오염이 없음을 확인했습니다. 24웰 플레이트를 접종하고 300 RPM에서 24시간 동안 진탕하면서 37°C에서 배양합니다. C. albicans(yeast 또는 pseudo-hyphae 또는 hyphae)의 형태는 처음 8시간 동안 1시간 간격으로 광학현미경으로 관찰한 후 H16 및 H24에서 관찰하였다. |
1일차
|
|
칸디다 성장
기간: 1일차
|
C. albicans SC5314 균주는 약 3.10^6 C 콜로니에 해당하는 0.3nm의 광학 밀도(OD)에서 제어 배지(Sabouraud 및 복수액)뿐만 아니라 1mL의 다양한 복막액에 3회 접종됩니다. . 밀리리터당 알비칸스(C. albicans/mL)의 미디어. C. albicans가 없는 배지만 포함하는 대조군 웰도 동일한 24웰 플레이트에 포함시켜 오염이 없음을 확인했습니다. 24웰 플레이트를 접종하고 300 RPM에서 24시간 동안 진탕하면서 37°C에서 배양합니다. C. albicans 성장은 각 웰에서 SBD 포도당 한천에 10 μL를 접종하여 평가했으며, 콜로니는 37°C에서 24시간 배양한 후 계수했습니다. 계수를 용이하게 하기 위해 각 접종된 웰의 1000배 희석액을 미리 준비했습니다. |
1일차
|
|
칸디다 독성 유전자 발현
기간: 1일차
|
상이한 배지에서의 C. 알비칸스 접종은 유전자 발현 분석 전 24시간의 밤새 배양과 함께 표현형 평가를 위한 것과 동일한 프로토콜을 따랐다.
관심 있는 5개의 독성 유전자는 UME6, ALS3, SFL2, HWP1 및 ECE1입니다.
24시간 밤새 배양한 후 샘플을 원심분리하여 세포 펠릿만 남게 합니다.
그런 다음 세포 펠릿을 10mL의 인산염 완충 식염수(PBS)로 두 번 세척했습니다.
그런 다음 PBS를 제거하고 세포 펠릿만 남겼습니다.
RNA 추출은 FASTPREP® 용해 기술을 사용하여 수행됩니다.
제조업체의 지침에 따라 Qiagen®(미국 메릴랜드주 저먼타운)의 QuantiTect 역전사 키트를 사용하여 역전사를 수행합니다.
qPCR은 CFX96 Real-Time PCR System(Bio-Rad, Marnes-la Coquette, France)을 사용하여 MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plates(Applied Biosystems)에서 수행되었습니다.
|
1일차
|
공동 작업자 및 조사자
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작 (실제)
기본 완료 (실제)
연구 완료 (실제)
연구 등록 날짜
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (실제)
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (실제)
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
마지막으로 확인됨
추가 정보
이 연구와 관련된 용어
추가 관련 MeSH 약관
기타 연구 ID 번호
- 2021PI051
개별 참가자 데이터(IPD) 계획
개별 참가자 데이터(IPD)를 공유할 계획입니까?
약물 및 장치 정보, 연구 문서
미국 FDA 규제 의약품 연구
미국 FDA 규제 기기 제품 연구
미국에서 제조되어 미국에서 수출되는 제품
이 정보는 변경 없이 clinicaltrials.gov 웹사이트에서 직접 가져온 것입니다. 귀하의 연구 세부 정보를 변경, 제거 또는 업데이트하도록 요청하는 경우 register@clinicaltrials.gov. 문의하십시오. 변경 사항이 clinicaltrials.gov에 구현되는 즉시 저희 웹사이트에도 자동으로 업데이트됩니다. .