Účinky zavinování a hnízdění na bolest a stres u novorozenců

Tato studie byla navržena za účelem zkoumání vlivu metod zavinování a hnízdění na úroveň bolesti a stresu u novorozenců léčených nosní CPAP. Studie byla plánována jako randomizovaná a experimentální povahy. Studijní populace bude zahrnovat všechny novorozence vyžadující nosní CPAP/neinvazivní mechanickou ventilaci na jednotce intenzivní péče pro novorozence ve městské nemocnici. Studie bude sestávat ze dvou intervenčních skupin. Celkem 100 novorozeneckých pacientů (skupina zavinování = 50, skupina hnízdění = 50) bude zařazeno do studie po získání souhlasu rodičů novorozenců s diagnózou přechodné tachypnoe, narozených ve 35. týdnu těhotenství nebo později, kteří jsou léčeni nosní CPAP/neinvazivní mechanickou ventilací na JIP a splňují inkluzní kritéria studie. Environmentální podmínky, které by mohly způsobit stres novorozencům (hluk, teplo, osvětlení atd.), budou udržovány na optimální úrovni. Při umístění na nCPAP bude dítě položeno do polohy na zádech, aby bylo možné lépe pozorovat pohyby hrudníku a dýchací vzorce. Pro zajištění průchodnosti dýchacích cest dítěte bude dosaženo mírné extenzní polohy pomocí krčních válečků. Respirační tíseň u novorozenců léčených nCPAP, stres způsobený pozitivním tlakem vzduchu a bolest způsobená tlakem nosní kanyly na nosní dírky budou hodnoceny dvěma výzkumníky pomocí Škály hodnocení bolesti a stresu novorozenců ALPS-Neo (ALPS-Neo). Ve skupině zavinování budou vzorky slin odebrány před aplikací metody zavinování (t1), během aplikace (t2) a 30 minut po aplikaci metody zavinování (t3). Srdeční frekvence, dechová frekvence, hodnoty parciálního tlaku kyslíku, úroveň bolesti a stresu (ALPS-Neo) budou zaznamenány dvěma výzkumníky. Ve skupině hnízdění budou také odebrány vzorky slin před aplikací metody hnízdění (t1), během aplikace (t2) a 30 minut po aplikaci metody zavinování (t3). Srdeční frekvence, dechová frekvence, hodnoty parciálního tlaku kyslíku, úroveň bolesti a stresu (ALPS-Neo) budou zaznamenány dvěma výzkumníky. Proces odběru vzorků slin bude proveden odstraněním bavlněného válečku z vnitřní zkumavky a držením za jeden konec pod jazykem dítěte nebo v koutcích úst (2,5 cm), kde lze sliny sbírat přibližně 2 minuty, dokud bavlna nebude důkladně nasáklá slinami (0,012-3,000 ug/dL). Bavlněný váleček bude držen za suchý konec a mokrá část bude vložena zpět do vnitřní zkumavky, víčko zkumavky bude uzavřeno a na každý odebraný vzorek budou nalepeny čárové kódy s napsaným jménem pacienta. Odebrané vzorky slin budou očíslovány a uloženy při -20°C v lednici na jednotce intenzivní péče pro novorozence. Ve stejný den budou převezeny do výzkumné laboratoře (KUYAM) za podmínek studeného řetězce s výzkumným povolením a velikost vzorku ve studijních skupinách bude dokončena. Budou skladovány při -80°C až do doby studie ELISA. Proces odběru vzorků slin bude proveden odstraněním bavlněného válečku z vnitřní zkumavky a držením za jeden konec pod jazykem dítěte nebo v koutcích úst (2,5 cm), kde lze sliny sbírat přibližně 2 minuty, dokud bavlna nebude důkladně nasáklá slinami (0,012-3,000 ug/dL). Celá studie ELISA bude provedena ve Výzkumné laboratoři Univerzity zdravotnických věd v Kütahyi (KUYAM) a odebrané vzorky budou pro pracovníka ELISA anonymizovány. Vzorky slin budou znovu centrifugovány při 1000 g po dobu 2 minut, aby se odstranily muciny a další částice, které by mohly interferovat s vazbou protilátek a ovlivnit výsledky. Až všechny vzorky dosáhnou pokojové teploty, pipetujte 25 µL standardu a vzorku do každé jamky 96jamkové destičky obsažené v soupravě. Poté přidejte 200 µL assay diluentu do 96jamkové destičky pomocí mikropipety a inkubujte při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny při 500 ot./min. Po dokončení inkubace proveďte 4× promytí 300 µL promývacího pufru. Po dokončení promývání přidejte 200 µL roztoku substrátu TMB do každé jamky obsahující vzorek a standardy a inkubujte při pokojové teplotě ve tmě při 500 ot./min po dobu 25 minut. Po dokončení inkubačního procesu bude do každé jamky přidáno 50 µL roztoku pro zastavení reakce. V tomto okamžiku bude pozorováno, jak se reakce v jamkách změní ze zelené na žlutou, a poté, co všechny jamky zežloutnou, bude provedeno spektrofotometrické měření při vlnové délce 450 nm. Celkové koncentrace budou vypočteny z hodnot absorbance pro standardy a vzorky a hladiny kortizolu budou uvedeny v µg/dL.