A pólyázás és fészkelés hatása az újszülöttek fájdalomára és stresszére

Ez a tanulmány a pólyázás és fészkelés módszereinek fájdalom- és stresszszintre gyakorolt hatásának vizsgálatára készült újszülötteknél, akik orr-CPAP kezelésben részesülnek. A tanulmány véletlenszerű és kísérleti jellegűnek volt tervezve. A vizsgálati populációt egy városi kórház újszülött intenzív osztályán orr-CPAP/noninvaszív mechanikus lélegeztetést igénylő összes újszülött alkotja majd. A tanulmány két intervenciós csoportból fog állni. Összesen 100 újszülött beteg (Pólyázás csoport = 50, Fészkelés csoport = 50) kerül bevonásra a tanulmányba, miután a szülők beleegyezését megkapták azoknak az újszülötteknek, akiknél átmeneti tachypnea diagnózis áll fenn, 35. terhességi hét vagy afölötti korban születtek, akik az újszülött intenzív osztályon orr-CPAP/noninvaszív mechanikus lélegeztető kezelésben részesülnek, és megfelelnek a tanulmány bevonási kritériumainak. Az újszülöttek számára stresszt okozó környezeti feltételeket (zaj, hő, világítás stb.) optimális szinten tartják. Az nCPAP-re helyezéskor a csecsemő hátonfekvő helyzetbe kerül, hogy jobban megfigyelhetőek legyenek a mellkas mozgásai és a légzési mintázata. A csecsemő légútjának átjárhatóságának biztosítása érdekében enyhe nyújtási helyzetet érnek el nyaktekercsek használatával. Az nCPAP-t kapó újszülöttek légzési nehézségeit, a pozitív légnyomás okozta stresszt, valamint az orrkanül nyomásának az orrlyukakra gyakorolt fájdalmat két kutató értékeli majd az ALPS-Neo Újszülött Fájdalom- és Stresszértékelési Skála (ALPS-Neo) segítségével. A pólyázás csoportban nyálmintákat gyűjtenek a pólyázási módszer alkalmazása előtt (t1), alkalmazás közben (t2) és a pólyázási módszer alkalmazását követő 30 perccel (t3). A szívfrekvenciát, légzési frekvenciát, részleges oxigénnyomás értékeket, fájdalom- és stresszszinteket (ALPS-Neo) két kutató rögzíti. A Fészkelés Csoportban szintén nyálmintákat gyűjtenek a Fészkelési módszer alkalmazása előtt (t1), alkalmazás közben (t2) és a pólyázási módszer alkalmazását követő 30 perccel (t3). A szívfrekvenciát, légzési frekvenciát, részleges oxigénnyomás értékeket, fájdalom- és stresszszinteket (ALPS-Neo) két kutató rögzíti. A nyálminta gyűjtési folyamatát úgy hajtják végre, hogy eltávolítják a vattahengert a belső csőből, és egyik végét a csecsemő nyelve alatt vagy a száj sarkaiban (2,5 cm) tartják, ahol a nyál kb. 2 percig gyűjthető, amíg a vatta teljesen át nem nedvesedik nyállal (0,012-3,000 µg/dL). A vattahengert a száraz végénél fogva tartják, és a nedves részt visszahelyezik a belső csőbe, lezárják a cső kupakját, és a beteg nevét feltüntető vonalkódokat ragasztanak minden egyes vett mintára. Az összegyűjtött nyálmintákat számozzák és -20°C-on tárolják a hűtőszekrényben az újszülött intenzív osztályon. Ugyanazon a napon hideglánc feltételek mellett, kutatói engedéllyel átviszik őket a kutató laboratóriumba (KUYAM), és a vizsgálati csoportokban a minta méret befejeződik. -80°C-on tárolják őket az ELISA vizsgálat idejéig. A nyálminta gyűjtési folyamatát úgy hajtják végre, hogy eltávolítják a vattahengert a belső csőből, és egyik végét a csecsemő nyelve alatt vagy a száj sarkaiban (2,5 cm) tartják, ahol a nyál kb. 2 percig gyűjthető, amíg a vatta teljesen át nem nedvesedik nyállal (0,012-3,000 µg/dL). A teljes ELISA vizsgálatot a Kütahya Egészségtudományi Egyetem Kutató Laboratóriumában (KUYAM) végzik, és az összegyűjtött mintákat vakítják az ELISA munkatárs számára. A nyálmintákat újra centrifugálják 1000 g-on 2 percig, hogy eltávolítsák a mucinokat és egyéb részecskéket, amelyek zavarhatják az antitest kötődést és befolyásolhatják az eredményeket. Amikor minden minta eléri a szobahőmérsékletet, pipettázzanak 25 µL standardot és mintát a készletben található 96 kútacskás lemez minden egyes kútacskájába. Ezután adjanak hozzá 200 µL assay hígítót a 96 kútacskás lemezhez mikropipetta segítségével, és inkubáljanak szobahőmérsékleten 1 órán keresztül 500 rpm-en. Az inkubáció befejezése után mossanak 4 alkalommal 300 µL mosó pufferrel. A mosás befejezése után adjanak hozzá 200 µL TMB szubsztrát oldatot a mintát és a standardokat tartalmazó minden egyes kútacskához, és inkubáljanak szobahőmérsékleten, sötétben, 500 rpm-en 25 percig. Az inkubációs folyamat befejezése után 50 µL reakció leállító oldatot adnak minden egyes kútacskához. Ezen a ponton megfigyelhető lesz, hogy a kútacskákban a reakció zöldről sárgára változik, és miután minden kútacska sárgává vált, spektrofotometriás mérést végeznek 450 nm hullámhosszon. Az abszorbancia értékekből számítják ki a teljes koncentrációkat a standardok és minták esetében, és a kortizol szinteket µg/dL-ben jelentik.