Wpływ owijania i gniazdowania na ból i stres u noworodków

To badanie zostało zaprojektowane w celu zbadania wpływu metod owijania i gniazdowania na poziom bólu i stresu u noworodków otrzymujących nCPAP przez nos. Badanie planowano jako randomizowane i eksperymentalne z natury. Populacja badana będzie składać się ze wszystkich noworodków wymagających nCPAP/nieinwazyjnej wentylacji mechanicznej na oddziale intensywnej terapii noworodków szpitala miejskiego. Badanie będzie składać się z dwóch grup interwencyjnych. W sumie 100 pacjentów noworodkowych (Grupa owijania = 50, Grupa gniazdowania = 50) zostanie włączonych do badania po uzyskaniu zgody od rodziców noworodków zdiagnozowanych z przemijającą tachypneą, urodzonych w 35 tygodniu ciąży lub później, które otrzymują leczenie nCPAP/nieinwazyjnym respiratorem mechanicznym na OITN i spełniają kryteria włączenia do badania. Warunki środowiskowe, które mogą powodować stres u noworodków (hałas, ciepło, oświetlenie itp.), będą utrzymywane na optymalnym poziomie. Po umieszczeniu na nCPAP, niemowlę będzie umieszczane w pozycji na wznak, aby lepiej obserwować ruchy klatki piersiowej i wzorce oddychania. Aby zapewnić drożność dróg oddechowych niemowlęcia, osiągnięta zostanie lekka pozycja wyprostna za pomocą rolek pod szyję. Zaburzenia oddychania u noworodków otrzymujących nCPAP, stres spowodowany dodatnim ciśnieniem powietrza oraz ból spowodowany naciskiem kaniuli nosowej na nozdrza będą oceniane przez dwóch badaczy za pomocą Skali Oceny Bólu i Stresu Noworodkowego ALPS-Neo (ALPS-Neo). W grupie owijania próbki śliny będą pobierane przed zastosowaniem metody owijania (t1), podczas aplikacji (t2) oraz 30 minut po zastosowaniu metody owijania (t3). Częstość akcji serca, częstość oddechów, wartości ciśnienia parcjalnego tlenu, poziom bólu i stresu (ALPS-Neo) będą rejestrowane przez dwóch badaczy. W grupie gniazdowania próbki śliny również będą pobierane przed zastosowaniem metody gniazdowania (t1), podczas aplikacji (t2) oraz 30 minut po zastosowaniu metody owijania (t3). Częstość akcji serca, częstość oddechów, wartości ciśnienia parcjalnego tlenu, poziom bólu i stresu (ALPS-Neo) będą rejestrowane przez dwóch badaczy. Proces pobierania próbek śliny będzie przeprowadzany poprzez usunięcie rolki bawełnianej z wewnętrznej rurki i trzymanie jej za jeden koniec pod językiem dziecka lub w kącikach ust (2,5 cm), gdzie ślina może być zbierana przez około 2 minuty, aż bawełna zostanie dokładnie nasycona śliną (0,012-3,000 ug/dL). Rolka bawełny będzie trzymana za suchy koniec, a mokra część zostanie umieszczona z powrotem w wewnętrznej rurce, nakrętka rurki zostanie zamknięta, a kody kreskowe z imieniem pacjenta będą przyklejone do każdej pobranej próbki. Zebrane próbki śliny zostaną ponumerowane i przechowywane w temperaturze -20°C w lodówce na oddziale intensywnej terapii noworodków. Tego samego dnia zostaną przeniesione do laboratorium badawczego (KUYAM) w warunkach zimnego łańcucha z pozwoleniem na badania, a wielkość próby w grupach badawczych zostanie uzupełniona. Będą przechowywane w temperaturze -80°C do czasu badania ELISA. Proces pobierania próbek śliny będzie przeprowadzany poprzez usunięcie rolki bawełnianej z wewnętrznej rurki i trzymanie jej za jeden koniec pod językiem dziecka lub w kącikach ust (2,5 cm), gdzie ślina może być zbierana przez około 2 minuty, aż bawełna zostanie dokładnie nasycona śliną (0,012-3,000 ug/dL). Całe badanie ELISA zostanie przeprowadzone w Laboratorium Badawczym Uniwersytetu Nauk o Zdrowiu w Kütahya (KUYAM), a zebrane próbki zostaną zaślepione dla pracownika ELISA. Próbki śliny zostaną ponownie odwirowane przy 1000 g przez 2 minuty, aby usunąć mucyny i inne cząstki stałe, które mogłyby zakłócać wiązanie przeciwciał i wpływać na wyniki. Gdy wszystkie próbki osiągną temperaturę pokojową, pipetować 25 µL wzorca i próbki do każdej studzienki 96-studzienkowej płytki zawartej w zestawie. Następnie dodać 200 µL rozcieńczalnika testowego do 96-studzienkowej płytki za pomocą mikropipety i inkubować w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę przy 500 obr./min. Po zakończeniu inkubacji przepłukać 4 razy 300 µL buforu płuczącego. Po zakończeniu płukania dodać 200 µL roztworu substratu TMB do każdej studzienki zawierającej próbkę i wzorce oraz inkubować w temperaturze pokojowej w ciemności przy 500 obr./min przez 25 minut. Po zakończeniu procesu inkubacji, 50 µL roztworu zatrzymującego reakcję zostanie dodane do każdej studzienki. W tym momencie zaobserwuje się zmianę reakcji w studzienkach z zielonej na żółtą, a po tym, jak wszystkie studzienki staną się żółte, zostanie wykonany pomiar spektrofotometryczny przy długości fali 450 nm. Całkowite stężenia zostaną obliczone z wartości absorbancji dla wzorców i próbek, a poziomy kortyzolu zostaną podane w µg/dL.