Kääreiden ja pesinnän vaikutukset vastasyntyneiden kipuun ja stressiin

Tässä tutkimuksessa selvitettiin käärimis- ja pesintämenetelmien vaikutusta nenä-CPAP:ta saavien vastasyntyneiden kipu- ja stressitasoihin. Tutkimus suunniteltiin satunnaistetuksi ja kokeelliseksi. Tutkimuspopulaatioon kuuluu kaikki kaupungin sairaalan vastasyntyneiden tehohoidon yksikössä nenä-CPAP:ta/ei-invasiivista mekaanista hengitystä tarvitsevat vastasyntyneet. Tutkimus koostuu kahdesta interventioryhmästä. Tutkimukseen otetaan mukaan yhteensä 100 vastasyntyneen potilasta (Käärimisryhmä = 50, Pesintäryhmä = 50) sen jälkeen, kun on saatu suostumus vastasyntyneiden vanhemmilta, joilla on diagnosoitu ohimenevä takypnea, jotka ovat syntyneet 35 raskausviikolla tai myöhemmin, jotka saavat nenä-CPAP:ta/ei-invasiivista mekaanista hengityslaitteen hoitoa vastasyntyneiden tehohoidon yksikössä ja jotka täyttävät tutkimuksen sisällyttämiskriteerit. Vastasyntyneille stressiä aiheuttavat ympäristöolosuhteet (melu, lämpö, valaistus jne.) pidetään optimaalisella tasolla. Kun lapsi asetetaan nCPAP:lle, vauva asetetaan selkänoja-asentoon, jotta rintakehän liikkeitä ja hengityskuvioita voidaan tarkkailla paremmin. Varmistaakseen vauvan hengitysteiden avoimuuden, käytetään niskatukia hieman venyttävään asentoon. Kahden tutkijan arvioi ALPS-Neo vastasyntyneiden kivun ja stressin arviointiasteikolla (ALPS-Neo) nenä-CPAP:ta saavien vastasyntyneiden hengitysvaikeudet, positiivisen ilmanpaineen aiheuttaman stressin ja nenäkannulan paineen aiheuttaman kivun sieraimissa. Käärimisryhmässä sylkinäytteet kerätään ennen käärimismenetelmän soveltamista (t1), soveltamisen aikana (t2) ja 30 minuuttia käärimismenetelmän soveltamisen jälkeen (t3). Kaksi tutkijaa tallentaa sykkeen, hengitystiheyden, osittaisen happipaineen arvot, kivun ja stressitasot (ALPS-Neo). Pesintäryhmässä sylkinäytteet kerätään myös ennen pesintämenetelmän soveltamista (t1), soveltamisen aikana (t2) ja 30 minuuttia pesintämenetelmän soveltamisen jälkeen (t3). Kaksi tutkijaa tallentaa sykkeen, hengitystiheyden, osittaisen happipaineen arvot, kivun ja stressitasot (ALPS-Neo). Sylkinäytteenkeräysprosessi suoritetaan poistamalla puuvillarulla sisäputkesta ja pitämällä sitä toisesta päästä vauvan kielen alla tai suun nurkissa (2,5 cm), joista sylkeä voidaan kerätä noin 2 minuuttia, kunnes puuvilla on täysin kyllästynyt sylkeen (0,012-3,000 µg/dL). Puuvillarulla pidetään kuivasta päästä ja märkä osa asetetaan takaisin sisäputkeen, putken korkki suljetaan ja otettuihin näytteisiin kiinnitetään viivakoodit, joihin on kirjoitettu potilaan nimi. Kerätyt sylkinäytteet numeroidaan ja säilytetään -20°C:ssa vastasyntyneiden tehohoidon yksikön jääkaapissa. Samana päivänä ne siirretään tutkimuslaboratorioon (KUYAM) kylmäketjuolosuhteissa tutkimusluvalla, ja tutkimusryhmien näytekoko täydennetään. Ne säilytetään -80°C:ssa, kunnes ELISA-tutkimus aloitetaan. Sylkinäytteenkeräysprosessi suoritetaan poistamalla puuvillarulla sisäputkesta ja pitämällä sitä toisesta päästä vauvan kielen alla tai suun nurkissa (2,5 cm), joista sylkeä voidaan kerätä noin 2 minuuttia, kunnes puuvilla on täysin kyllästynyt sylkeen (0,012-3,000 µg/dL). Koko ELISA-tutkimus suoritetaan Kütahyan terveystieteiden yliopiston tutkimuslaboratoriossa (KUYAM), ja kerätyt näytteet anonymisoidaan ELISA-työntekijälle. Sylkinäytteet sentrifugoidaan uudelleen 1000 g:ssa 2 minuuttia poistaakseen muskiinit ja muut partikkelit, jotka voivat häiritä vasta-aineiden sitoutumista ja vaikuttaa tuloksiin. Kun kaikki näytteet ovat saavuttaneet huoneenlämpötilan, pipetoidaan 25 µL standardia ja näytettä kittiin kuuluvan 96-kuoppalevyn jokaiseen kuoppaan. Seuraavaksi lisätään 200 µL assay-diluenttia 96-kuoppalevyyn mikropipetilla ja inkuboidaan huoneenlämpötilassa 1 tunti 500 rpm:llä. Inkubaation päätyttyä pestään 4 kertaa 300 µL pesupuskurilla. Pesun päätyttyä lisätään 200 µL TMB-substraattiliuosta jokaiseen näytteitä ja standardeja sisältävään kuoppaan ja inkuboidaan huoneenlämpötilassa pimeässä 500 rpm:llä 25 minuuttia. Inkubaatioprosessin päätyttyä lisätään 50 µL reaktion pysäytysliuosta jokaiseen kuoppaan. Tässä vaiheessa havaitaan, että reaktio kuopissa muuttuu vihreästä keltaiseksi, ja kun kaikki kuopat ovat muuttuneet keltaisiksi, spektrofotometrinen mittaus tehdään 450 nm:n aallonpituudella. Kokonaispitoisuudet lasketaan standardien ja näytteiden absorbanssiarvoista, ja kortisolitasot raportoidaan µg/dL.