Effecten van Inbakeren en Nestelen op Pijn en Stress bij Pasgeborenen

Dit onderzoek was ontworpen om het effect van inbakeren en nestingmethoden op pijn- en stressniveaus bij pasgeborenen die nasale CPAP krijgen te onderzoeken. Het onderzoek was gepland om gerandomiseerd en experimenteel van aard te zijn. De onderzoekspopulatie zal bestaan uit alle pasgeborenen die nasale CPAP/niet-invasieve mechanische ventilatie nodig hebben op de neonatale intensive care van een stadsziekenhuis. Het onderzoek zal bestaan uit twee interventiegroepen. In totaal zullen 100 pasgeboren patiënten (Inbakerengroep = 50, Nestinggroep = 50) worden opgenomen in het onderzoek na toestemming van de ouders van pasgeborenen met de diagnose voorbijgaande tachypneu, geboren na 35 weken zwangerschap of later, die nasale CPAP/niet-invasieve mechanische ventilatiebehandeling krijgen op de NICU en voldoen aan de inclusiecriteria van het onderzoek. Omgevingsomstandigheden die stress bij pasgeborenen kunnen veroorzaken (geluid, warmte, verlichting, enz.) worden op optimale niveaus gehouden. Bij plaatsing op nCPAP wordt de baby in rugligging geplaatst om borstbewegingen en ademhalingspatronen beter te kunnen observeren. Om de doorgankelijkheid van de luchtwegen van de baby te waarborgen, wordt een lichte extensiepositie bereikt met behulp van nekrollen. Ademnood bij pasgeborenen die nCPAP krijgen, stress door positieve luchtdruk en pijn veroorzaakt door de druk van de nasale canule op de neusgaten worden door twee onderzoekers beoordeeld met behulp van de ALPS-Neo Neonatale Pijn- en Stressbeoordelingsschaal (ALPS-Neo). In de inbakerengroep worden speekselmonsters verzameld vóór toepassing van de inbakeringsmethode (t1), tijdens toepassing (t2) en 30 minuten na toepassing van de inbakeringsmethode (t3). Hartslag, ademhalingsfrequentie, partiële zuurstofdrukwaarden, pijn- en stressniveaus (ALPS-Neo) worden door twee onderzoekers geregistreerd. In de Nestinggroep worden ook speekselmonsters verzameld vóór toepassing van de Nestingmethode (t1), tijdens toepassing (t2) en 30 minuten na toepassing van de inbakeringsmethode (t3). Hartslag, ademhalingsfrequentie, partiële zuurstofdrukwaarden, pijn- en stressniveaus (ALPS-Neo) worden door twee onderzoekers geregistreerd. Het speekselmonsterverzamelingsproces wordt uitgevoerd door de katoenrol uit de binnenbuis te verwijderen en deze aan één uiteinde onder de tong van de baby of in de mondhoeken (2,5 cm) vast te houden waar gedurende ongeveer 2 minuten speeksel kan worden verzameld totdat het katoen grondig verzadigd is met speeksel (0,012-3.000 ug/dL). De katoenrol wordt aan het droge uiteinde vastgehouden en het natte deel wordt teruggeplaatst in de binnenbuis, de buisdop wordt gesloten en streepjescodes met de naam van de patiënt erop worden op elk afgenomen monster geplakt. De verzamelde speekselmonsters worden genummerd en opgeslagen bij -20°C in de koelkast op de neonatale intensive care. Op dezelfde dag worden ze onder koudeketenomstandigheden met onderzoeksmachtiging overgebracht naar het onderzoekslaboratorium (KUYAM), en de steekproefomvang in de onderzoeksgroepen wordt voltooid. Ze worden opgeslagen bij -80°C tot de ELISA-studietijd. Het speekselmonsterverzamelingsproces wordt uitgevoerd door de katoenrol uit de binnenbuis te verwijderen en deze aan één uiteinde onder de tong van de baby of in de mondhoeken (2,5 cm) vast te houden waar gedurende ongeveer 2 minuten speeksel kan worden verzameld totdat het katoen grondig verzadigd is met speeksel (0,012-3.000 ug/dL). De gehele ELISA-studie wordt uitgevoerd in het Kütahya Gezondheidswetenschappen Universiteit Onderzoekslaboratorium (KUYAM), en de verzamelde monsters worden geblindeerd voor de ELISA-werknemer. Speekselmonsters worden opnieuw gecentrifugeerd bij 1000 g gedurende 2 minuten om mucines en andere deeltjes te verwijderen die de antilichaambinding kunnen verstoren en de resultaten kunnen beïnvloeden. Wanneer alle monsters op kamertemperatuur zijn, wordt 25 μL standaard en monster in elke put van de 96-well plaat gepipetteerd die in de kit is inbegrepen. Voeg vervolgens 200 μL assay-verdunningsmiddel toe aan de 96-well plaat met behulp van een micropipet en incubeer gedurende 1 uur bij kamertemperatuur bij 500 rpm. Na voltooiing van de incubatie, was 4 keer met 300 μL wasbuffer. Na voltooiing van het wassen, voeg 200 μL TMB-substraatoplossing toe aan elke put die het monster en de standaarden bevat en incubeer gedurende 25 minuten bij kamertemperatuur in het donker bij 500 rpm. Na voltooiing van het incubatieproces wordt 50 μL reactiestopoplossing aan elke put toegevoegd. Op dit punt wordt waargenomen dat de reactie in de putten van groen naar geel verandert, en nadat alle putten geel zijn geworden, wordt een spectrofotometrische meting uitgevoerd bij een golflengte van 450 nm. Totale concentraties worden berekend op basis van de absorptiewaarden voor standaarden en monsters, en cortisolspiegels worden gerapporteerd in μg/dL.