Effekt af diodelaseren på bakteriemi associeret med paradentallapkirurgi: en klinisk-mikrobiologisk undersøgelse

DATAKILDE Patient, der besøger den ambulante afdeling af afdelingen for periodontologi, Krishnadevaraya College of Dental Sciences og Hospital, vil blive screenet og tilfældigt rekrutteret til undersøgelsen i henhold til inklusions- og eksklusionskriterier. De berettigede forsøgspersoner vil blive informeret om arten og fordelene ved deltagelse i undersøgelsen, og der vil blive indhentet et skriftligt underskrevet samtykke. Undersøgelsespopulationen vil bestå af tyve (n=20) forsøgspersoner, som vil være alder (30 til 40 år) og køn matchede.

Prøvestørrelse Undersøgelsen blev udført i henhold til design med spaltet mund, og alle tænder i munden blev behandlet tilfældigt med enten venstre eller højre side af maxilla og underkæben til kontrol og den modsatte side til terapien. Hver patient blev indgået i en klinisk protokol bestående af to forskellige behandlingsmodaliteter.

Gruppe I (n=10) - Testgruppe ( diodelaser + klapoperation) Gruppe II (n=10) - kontrolgruppe (klapoperation)

KIRURGISK PROCEDURE GRUPPE I (TESTGRUPPE) Patienten vil blive bedt om at skylle med 0,2 % klorhexidin mundskyl. Efter administration af lokalbedøvelse 2% lignocainhydrochlorid (med 1:80.000 epinephrin), vil laserpåføring blive udført ved hjælp af 810 nm (A.R.C LASER FoxTM) diodelaser med en fleksibel optisk spids på 300µm. Sulci vil blive lasert med en gentagen stråle (0,2 sek på 0,3 sek off) ved en udgangseffekt på 1,0 W.

Intrakrevikulært snit vil blive placeret ved hjælp af 15c Bard Parker kirurgisk blad, mucoperiosteal flap i fuld tykkelse vil blive forhøjet.

Debridering af granulationsvæv vil blive udført, og flap vil blive sutur tilbage på plads ved hjælp af 3-0 sort paneret silkesutur, stedet vil blive dækket med non-eugenol parodontal bandage for beskyttelse.

Postoperative instruktioner vil blive givet til patienten. 2 ml blod vil blive opsamlet ved baseline (prøve 1), 5 minutter (prøve 2) og inden for 20-30 minutter (prøve 3) efter start af proceduren.

GRUPPE II (KONTROLGRUPPE) Patienten vil blive bedt om at skylle med 0,2 % klorhexidin mundskyl. Efter administration af lokalbedøvelse 2% lignocainhydrochlorid (med 1:80.000 adrenalin), vil der blive placeret et intracrevikulært snit ved hjælp af 15c Bard Parker kirurgisk blad, mucoperiosteal flap i fuld tykkelse vil blive forhøjet.

Debridering af granulationsvæv vil blive udført, og flap vil blive sutur tilbage på plads ved hjælp af 3-0 sort paneret silkesutur, stedet vil blive dækket med non-eugenol parodontal bandage for beskyttelse.

Postoperative instruktioner vil blive givet til patienten. 2 ml blod vil blive opsamlet ved baseline (prøve 1), 5 minutter (prøve 2) og inden for 20-30 minutter (prøve 3) efter start af proceduren

Indsamling af blodprøver Seks milliliter (6 ml) blodprøver vil blive udtaget fra patienten gennem en antecubital vene ved brug af streng aseptisk teknik via en 22-gage steril plastikkanyle og sendt til qPCR-analyse for at kvantificere den samlede bakteriemængde.

PCR-ANALYSE Polymerasekædereaktionen (PCR) er en laboratorieteknik til DNA-replikation, der tillader "mål"-DNA-sekvensen at blive selektivt amplificeret. PCR'en involverer den primermedierede enzymatiske amplifikation af DNA. I denne undersøgelse udføres kvantitativ polymerasekædereaktion.

• DNA fra blodprøverne vil blive ekstraheret ved hjælp af QIAamp DNA Blood Mini Kit i henhold til producentens anbefalinger.
• For at kvantificere den totale bakteriemængde vil qPCR blive udført ved hjælp af en universel primer til 16S ribosomale RNA-genet.
• Analyse blev udført i et samlet volumen på 6 ml blod.
• Prøver til qPCR vil blive dispenseret i brøndplader, forseglet og centrifugeret.
• Amplifikation vil blive udført, indstillinger for qPCR vil være som følger: 95 grader Celsius i 10 minutter efterfulgt af 40 amplifikationscyklusser ved 95 grader Celsius i 1 minut, 52 grader Celsius i 1 minut, 72 grader Celsius i 1 minut.
• Efter hver cyklus vil PCR-produkter blive overvåget for stigningen i fluorescens af SYBR green.
• Alle målinger vil blive udført i tre eksemplarer for både test og kontroller.
• Til den negative kontrol vil ultrarent vand blive brugt til at erstatte den kliniske prøve.
• For at bestemme specificiteten af ​​de amplificerede produkter vil der blive opnået en smeltekurve fra 60 grader celsius til 95 grader celsius, med kontinuerlig florescensmåling ved hver 1 % stigning i temperaturen.
• Dataindsamling og analyse vil blive udført ved hjælp af ABI 7500-softwaren.

Statistisk analyse Data vil blive underkastet normalitetstest. Bedst på den dataparametriske eller ikke-parametriske test vil blive udført. P-værdi < 0,05 vil blive betragtet som statistisk signifikant.