Seminal TEX101 als Prädiktor für die Wiederherstellung der Spermatogenese bei azoospermischen Männern mit tastbarer Varikozele

Männliche Patienten (40) Fälle, die die Ambulanz für Andrologie an den Universitätskliniken KASR EL-AINI besuchen, alle Patienten mit Azoospermie, Alter: 18-43 Jahre, die hauptsächlich über Unfruchtbarkeit oder zufällig entdeckte Azoospermie während der vorehelichen Untersuchung oder chronische Hodenschmerzen klagen verursacht durch langjährige Varikozele. Unfruchtbare nicht-obstruktive Azoospermie (NOA) (n=40) einer Varikozelektomie unterzogen und Patienten 3 Monate nach der Varikozelektomie durch Samenanalyse ausgewertet, dann gemäß den Ergebnissen die Population in 2 Gruppen eingeteilt: Gruppe A (Responder): Patienten mit positiver Samenanalyse für

Spermien 3 Monate nach Varikozelektomie.

Gruppe B (Non-Responder): Patienten ohne Spermien in der Samenanalyse

in 3 und/oder 6 Monaten nach Varikozelektomie.

Methode zur Schätzung von menschlichem TEX101 im Sperma:

1 ml gesammelte Samenproben wurden 20 Minuten lang bei 1000 x g bei 4°C zentrifugiert, dann wurde der Überstand jeder Probe zur Schätzung von TEX101 gesammelt. Das menschliche TEX101 (Testis exprimiert 101) wurde mit einem im Handel erhältlichen ELISA-Kit, geliefert von Wuhan Fine Biotech Co., Ltd., getestet. China.

Prinzip des Verfahrens:

Dieses Kit basierte auf der Sandwich-Enzym-Linked-Immunsorbens-Assay-Technik. Anti-TEX101-Antikörper wurde auf eine Platte mit 96 Vertiefungen vorbeschichtet. Der mit Biotin konjugierte Antikörper wurde als Nachweisantikörper verwendet. Die Standards, Testproben und Biotin-konjugierter Detektionsantikörper wurden anschließend in die Vertiefungen gegeben und mit Waschpuffer gewaschen.

HRP-Streptavidin wurde zugegeben und ungebundene Konjugate wurden mit Waschpuffer weggewaschen. TMB-Substrate wurden verwendet, um die enzymatische HRP-Reaktion sichtbar zu machen. TMB wurde durch HRP katalysiert, um ein blau gefärbtes Produkt zu erzeugen, das sich nach Zugabe von saurer Stopplösung in gelb änderte. Die Intensität von Gelb ist proportional zur Zielmenge der in der Platte aufgenommenen Probe.