TEX101 seminale come predittore del recupero della spermatogenesi negli uomini azoospermici con varicocele palpabile

Pazienti di sesso maschile (40) casi che frequentano l'ambulatorio di Andrologia presso gli ospedali universitari KASR EL-AINI, tutti pazienti presentati con azoospermia, età: 18-43 anni, che lamentano principalmente infertilità o scoperta accidentale di azoospermia durante il controllo prematrimoniale o dolore testicolare cronico causato da varicocele di lunga data. Azoospermia Non Ostruttiva Infertile (NOA) (n=40) sottoposte a varicocelectomia e pazienti valutati 3 mesi dopo varicocelectomia mediante analisi del liquido seminale, quindi in base ai risultati popolazione suddivisa in 2 gruppi: Gruppo A (Responders): Pazienti con analisi del liquido seminale positiva per

spermatozoi 3 mesi dopo varicocelectomia.

Gruppo B (non responsivi): pazienti senza spermatozoi nell'analisi del liquido seminale

in 3 e/o 6 mesi dopo la varicocelectomia.

Metodo di stima del TEX101 umano nel seme:

Un campione di seme raccolto da 1 ml è stato centrifugato per 20 minuti a 1000xg a 4°C, quindi è stato raccolto il supernatante di ciascun campione per la stima di TEX101. Il TEX101 umano (Testis espresso 101) è stato analizzato con un kit ELISA disponibile in commercio fornito da Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Cina.

Principio della procedura:

Questo kit si basava su una tecnica di analisi dell'immunosorbente legata all'enzima sandwich. L'anticorpo anti-TEX101 è stato pre-rivestito su una piastra a 96 pozzetti. L'anticorpo coniugato alla biotina è stato utilizzato come anticorpi di rilevamento. Gli standard, i campioni di analisi e l'anticorpo di rilevazione coniugato alla biotina sono stati successivamente aggiunti ai pozzetti e lavati con tampone di lavaggio.

È stata aggiunta HRP-streptavidina e i coniugati non legati sono stati lavati via con tampone di lavaggio. I substrati TMB sono stati utilizzati per visualizzare la reazione enzimatica HRP. TMB è stato catalizzato da HRP per produrre un prodotto di colore blu che è cambiato in giallo dopo l'aggiunta di una soluzione di arresto acida. L'intensità del giallo è proporzionale alla quantità target di campione catturato nella piastra.