TEX101 séminal en tant que prédicteur de la récupération de la spermatogenèse chez les hommes azoospermiques atteints de varicocèle palpable

Patients masculins (40) cas fréquentant la clinique externe d'andrologie des hôpitaux universitaires KASR EL-AINI, tous les patients présentaient une azoospermie, âgés de 18 à 43 ans, se plaignant principalement d'infertilité ou d'azoospermie découverte accidentellement lors d'un examen prénuptial ou de douleurs testiculaires chroniques causée par une varicocèle de longue date. Azoospermie Non Obstructive (ANO) infertile (n=40) soumis à varicocélectomie et patients évalués 3 mois après varicocélectomie par analyse du sperme, puis selon les résultats population divisée en 2 groupes : Groupe A (Répondants) : Patients avec analyse du sperme positif pour

spermatozoïdes 3 mois après varicocélectomie.

Groupe B (non répondeurs) : patients sans spermatozoïdes dans l'analyse du sperme

à 3 et/ou 6 mois après varicocélectomie.

Méthode d'estimation du TEX101 humain dans le sperme :

Des échantillons de sperme collectés de 1 ml ont été centrifugés pendant 20 minutes à 1000xg à 4 o C, puis le surnageant de chaque échantillon a été collecté pour l'estimation de TEX101. Le TEX101 humain (Testis exprimé 101) a été dosé par un kit ELISA disponible dans le commerce fourni par Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Chine.

Principe de la procédure :

Ce kit était basé sur la technique de dosage immuno-absorbant lié à une enzyme en sandwich. L'anticorps anti-TEX101 a été pré-enduit sur une plaque à 96 puits. L'anticorps conjugué à la biotine a été utilisé comme anticorps de détection. Les étalons, les échantillons de test et l'anticorps de détection conjugué à la biotine ont ensuite été ajoutés aux puits et lavés avec un tampon de lavage.

De la HRP-streptavidine a été ajoutée et les conjugués non liés ont été lavés avec un tampon de lavage. Des substrats TMB ont été utilisés pour visualiser la réaction enzymatique HRP. Le TMB a été catalysé par HRP pour produire un produit de couleur bleue qui s'est transformé en jaune après l'ajout d'une solution d'arrêt acide. L'intensité du jaune est proportionnelle à la quantité cible d'échantillon capturé dans la plaque.